Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን።እየተጠቀሙበት ያለው የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የሲኤስኤስ ድጋፍ አለው።ለበለጠ ውጤት፣ አዲሱን የአሳሽዎን ስሪት (ወይም የተኳኋኝነት ሁነታን በInternet Explorer ውስጥ ማጥፋት) እንዲጠቀሙ እንመክራለን።እስከዚያው ድረስ ቀጣይነት ያለው ድጋፍን ለማረጋገጥ ጣቢያውን ያለ ቅጥ ወይም ጃቫስክሪፕት እያሳየን ነው።
ቀይ ጂንሰንግ ለብዙ መቶ ዓመታት በባህላዊ የእስያ መድኃኒቶች ውስጥ ጥቅም ላይ ውሏል።በዚህ ጥናት ውስጥ በተለያዩ ክልሎች የሚበቅሉትን አራት አይነት ቀይ ጊንሰንግ (የቻይና ቀይ ጊንሰንግ፣ የኮሪያ ቀይ ጂንሰንግ ቢ እና የኮሪያ ቀይ ጂንሰንግ ሲ) በተለያዩ ክልሎች የሚበቅሉትን የካርሲኖጅንን የሳንባ ምች መፈጠርን እና እድገትን ለመግታት ያላቸውን አቅም ገምግመናል። ዕጢዎች.በኤ/ጄ አይጦች ላይ የቤንዞ(a) pyrene (B(a)P) ሙከራ የተካሄደ ሲሆን የኮሪያ ቀይ ጂንሰንግ ቢ ከአራቱ ቀይ የጂንሰንግ ዝርያዎች መካከል የእጢ ጫናን በመቀነስ ረገድ ውጤታማ ሆኖ ተገኝቷል።በተጨማሪም የተለያዩ የጂንሰኖሳይዶችን ይዘቶች (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 እና Rg5) በአራት ቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች ውስጥ ተንትነን እና የኮሪያ ቀይ ጂንሰንግ ቢ እንዳለው አገኘን. በጣም ከፍተኛ የ ginsenoside Rg3 (G-Rg3) ፣ G-Rg3 በሕክምናው ውጤታማነት ውስጥ ጠቃሚ ሚና ሊጫወት እንደሚችል ይጠቁማል።ይህ ስራ G-Rg3 በአንፃራዊነት ዝቅተኛ ባዮአቫይል እንዳለው ያሳያል።ነገር ግን G-Rg3 ከ P-gp inhibitor ቬራፓሚል ጋር ሲተገበር የጂ-አርጂ 3 ወደ ካኮ-2 ህዋሶች የሚፈሰው ፈሳሽ ቀንሷል፣ የጂ-አርጂ 3 የአንጀት የመጠጣት መጠን በአይጥ ሞዴል ጨምሯል እና G-Rg3 ጨምሯል.በካኮ-2 ሴሎች ውስጥ የ Rg3 መውጣት ይቀንሳል, እና የ Rg3 ትኩረት መጠን ይቀንሳል.G-Rg3 በአንጀት እና በፕላዝማ ውስጥ ይጨምራል, እና እጢዎችን የመከላከል ችሎታው በ B (a) P-induced tumorigenesis አይጥ ሞዴል ውስጥም ይጨምራል.እንዲሁም G-Rg3 B (a) P-induced cytotoxicity እና ዲ ኤን ኤ የተቀነሰው በሰዎች የሳንባ ሴሎች ውስጥ ያለውን የሳይቶቶክሲክሽን መጠን በመቀነሱ እና የ II ኢንዛይሞችን አገላለጽ እና እንቅስቃሴ በ Nrf2 መንገድ በኩል ወደነበረበት ይመልሳል፣ ይህም ከተግባር ዘዴ ጋር የተያያዘ ሊሆን ይችላል። የጂ መከልከል -Rg3..ስለ የሳንባ ነቀርሳዎች መከሰት.የእኛ ጥናት ለ G-Rg3 በመዳፊት ሞዴሎች ውስጥ የሳንባ እጢዎችን በማነጣጠር ላይ ያለውን ጠቃሚ ሚና ያሳያል።የዚህ ጂንሰኖሳይድ የአፍ ባዮአቪላሽን በ P-glycoprotein ላይ በማነጣጠር ይሻሻላል፣ ይህም ሞለኪውሉ የፀረ-ነቀርሳ ተፅእኖን እንዲያደርግ ያስችለዋል።
በጣም የተለመደው የሳንባ ካንሰር አይነት ትንንሽ ያልሆነ ሕዋስ የሳንባ ካንሰር (NSCLC) ሲሆን በቻይና እና በሰሜን አሜሪካ ለካንሰር ሞት ከሚዳርጉ ምክንያቶች አንዱ ነው1,2.ትንንሽ ሴል ያልሆኑ የሳንባ ካንሰር የመያዝ እድልን የሚጨምር ዋናው ምክንያት ማጨስ ነው።የሲጋራ ጭስ ቤንዞ(ሀ) ፓይሬን (ቢ(ሀ)ፒ)፣ ኒትሮዛሚን እና ራዲዮአክቲቭ ኢሶቶፖችን ጨምሮ ከ60 በላይ ካርሲኖጅንን ከሬዶን መበስበስ ይዟል። ማጨስ.ለ B(a) P ሲጋለጥ፣ ሳይቶክሮም P450 ወደ B(a) P-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide (BPDE) ይለውጠዋል፣ እሱም ከዲኤንኤ ጋር ምላሽ በመስጠት BPDE-DNA adduct 4. በተጨማሪም፣ እነዚህ የሳንባ ነቀርሳ በሽታ አምጪ ተህዋስያን በእጢ ደረጃ እና ሂስቶፓቶሎጂ ከሰው የሳንባ ዕጢዎች ጋር ተመሳሳይ በሆነ አይጥ ውስጥ የሳንባ ቱሪጄኔሲስን ያነሳሳሉ።ይህ ባህሪ የ B(a) P-induced የሳምባ ካንሰር ሞዴል ተስማሚ የሆነ የፀረ-ካንሰር ባህሪያት ያላቸውን ውህዶች ለመገምገም ተስማሚ ስርዓት ያደርገዋል.
ከፍተኛ ተጋላጭነት ባላቸው ቡድኖች በተለይም አጫሾች ውስጥ የሳንባ ካንሰር እንዳይከሰት ለመከላከል አንዱ ዘዴ የኬሞፕረቬንቲቭ ኤጀንቶችን በመጠቀም የ intraepithelial neoplastic lesions እድገትን ለመግታት እና ከዚያም ወደ መጥፎ እድገት እንዳይሄዱ ለመከላከል ነው.የእንስሳት ጥናቶች እንደሚያሳዩት የተለያዩ የኬሚካል መከላከያ ወኪሎች ውጤታማ ናቸው6.የቀደመ ሪፖርታችን 7 ቀይ ጂንሰንግ በሳንባ ካንሰር ላይ ያለውን ጥሩ የመከላከያ ውጤት አጉልቶ አሳይቷል።ይህ እፅዋት እድሜን እና ጤናን ለማራዘም በባህላዊ የእስያ ህክምና ለዘመናት ሲያገለግል የቆየ ሲሆን ፀረ-ቲሞር ተፅእኖ እንዳለው ተረጋግጧል8.
የጂንሰንግ ገባሪ ነገር ginsenoside ነው፣ እሱም የጂንሰንግ ውህዶችን ጥራት ለመገምገም እንደ ውህድ ምልክት ሆኖ ያገለግላል።የድፍድፍ ጂንሰንግ ተዋጽኦዎች አሃዛዊ ትንታኔ በተለምዶ RK1፣ Rg1፣ F1፣ Re፣ Rb1፣ Rb2፣ Rb3፣ Rd፣ Rh1፣ Rh2፣ Rg3፣ Rg5 እና Rc9,10ን ጨምሮ በርካታ ginsenosides መጠቀምን ያካትታል።Ginsenosides በጣም ደካማ የአፍ ባዮአቫላይዜሽን ምክንያት ትንሽ ክሊኒካዊ ጥቅም የላቸውም11.ምንም እንኳን የዚህ ደካማ ባዮአቪላይዜሽን ዘዴ ግልጽ ባይሆንም በ P-glycoprotein (P-gp) 12 ምክንያት የሚፈጠረው የጂንሴኖሳይድ ፍሳሽ መንስኤ ሊሆን ይችላል.ፒ-ጂፒ በኤቲፒ-ቢንዲንግ ካሴት ማጓጓዣ ሱፐርፋሚሊ ውስጥ በጣም አስፈላጊ ከሆኑ የፍሳሽ ማጓጓዣዎች ውስጥ አንዱ ሲሆን ይህም የ ATP ሃይድሮሊሲስ ሃይልን በመጠቀም የውስጥ ህዋሳትን ወደ ውጫዊ አካባቢ ይለቃሉ.የፒ-ጂፒ ማጓጓዣዎች በተለምዶ በአንጀት፣ በኩላሊት፣ በጉበት እና በደም-አንጎል እንቅፋት ውስጥ በብዛት ይሰራጫሉ።ፒ-ጂፒ በአንጀት ውስጥ በመምጠጥ ውስጥ ወሳኝ ሚና ይጫወታል, እና P-gp ን መከልከል አንዳንድ የፀረ-ነቀርሳ መድሃኒቶችን በአፍ ውስጥ የመምጠጥ እና አቅርቦትን ይጨምራል12,14.ቀደም ሲል በስነ-ጽሑፍ ውስጥ ጥቅም ላይ የዋሉ አጋቾች ምሳሌዎች verapamil እና cyclosporine A15 ናቸው.ይህ ሥራ ከቻይና እና ከኮሪያ የተለያዩ ቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች አደገኛ በሽታዎችን የመፍጠር ችሎታን ለመገምገም B (a) P-induced የሳንባ ካንሰርን ለማጥናት የመዳፊት ስርዓት መዘርጋትን ያካትታል.በካርሲኖጅን ላይ ተጽዕኖ ሊያሳርፉ የሚችሉ ልዩ የጂንሴኖሳይዶችን ለመለየት ምርቶቹ በግለሰብ ተተነተኑ.ከዚያም ቬራፓሚል ፒ-ጂፒን ዒላማ ለማድረግ እና የካንሰር-ያነጣጠሩ የጂንሴኖሳይዶችን የአፍ ባዮአቪላይዜሽን እና የሕክምና ውጤታማነት ለማሻሻል ጥቅም ላይ ውሏል።
የጂንሰንግ ሳፖኖኖች በካርሲኖጄኔሲስ ላይ የሕክምና ውጤቶችን የሚያሳዩበት ዘዴ ግልጽ አይደለም.የተለያዩ ጂንሰኖሳይዶች የኦክስዲቲቭ ጭንቀትን በመቀነስ እና የ II ዲቶክሲፊሽን ኢንዛይሞችን በማንቃት በሴል ላይ ጉዳት እንዳይደርስ በማድረግ በካርሲኖጂንስ የሚደርሰውን የዲኤንኤ ጉዳት እንደሚቀንስ በጥናት ተረጋግጧል።Glutathione S-transferase (GST) በካርሲኖጂንስ17 የሚደርሰውን የዲኤንኤ ጉዳት ለመቀነስ የሚያስፈልገው የተለመደ ደረጃ II ኢንዛይም ነው።ኒዩክለር erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) redox homeostasisን የሚቆጣጠር እና የደረጃ II ኢንዛይሞችን እና የሳይቶፕሮቴክቲቭ አንቲኦክሲዳንት ምላሾችን የሚገልጽ ጠቃሚ የጽሑፍ መልእክት ነው።ጥናታችን በተጨማሪም የ B (a) P-induced cytotoxicity እና BPDE-DNA adduct ምስረታ በመቀነስ እና በመደበኛ የሳምባ ህዋሶች ውስጥ የ Nrf2 መንገድን በማስተካከል የ II ኢንዛይሞችን በማነሳሳት ተለይተው የሚታወቁ የጂንሴኖሳይዶች ተጽእኖ መርምሯል.
የ B (a) ፒ-የተከሰተ ካንሰር የመዳፊት ሞዴል መመስረት ከቀደመው ሥራ ጋር ይጣጣማል5.ምስል 1A የ20-ሳምንት የመዳፊት ካንሰር ሞዴል በB(a)P፣የውሃ (ቁጥጥር)፣ በቻይና ቀይ የጂንሰንግ ማውጫ (ሲአርጂ)፣ በኮሪያ ቀይ የጂንሰንግ ማውጫ A (KRGA) እና በኮሪያ ቀይ ምክንያት የተደረገውን የ20-ሳምንት ህክምና የሙከራ ንድፍ ያሳያል። ጂንሰንግB (KRGB) እና የኮሪያ ቀይ ጊንሰንግ ኤክስትራክት ሲ (KRGC) ማውጣት።ከ 20 ሳምንታት የቀይ የጂንሰንግ ህክምና በኋላ, አይጦች በ CO2 መተንፈስ ተሠዉ.ምስል 1B በተለያዩ የቀይ ጂንሰንግ ዓይነቶች በሚታከሙ እንስሳት ላይ ማክሮስኮፒክ የሳምባ ነቀርሳዎችን ያሳያል፣ እና ምስል 1C የእጢ ናሙና ተወካይ የብርሃን ማይክሮግራፍ ያሳያል።በስእል 1D ላይ እንደሚታየው የ KRGB-የታከሙ እንስሳት ዕጢ ሸክም (1.5 ± 0.35) ከቁጥጥር እንስሳት (0.82 ± 0.2, P <0.05) ያነሰ ነው.የቲሞር ጭነት መከልከል አማካይ ደረጃ 45% ነበር.ሌሎች ቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች የተሞከሩት በእጢ ሸክም (P> 0.05) ላይ እንዲህ ያሉ ጉልህ ለውጦችን አላሳዩም.በቀይ የጂንሰንግ ሕክምና በ 20 ሳምንታት ውስጥ በመዳፊት ሞዴል ላይ ምንም ግልጽ የጎንዮሽ ጉዳቶች አልተስተዋሉም, በሰውነት ክብደት ላይ ምንም ለውጥ (የማይታይ መረጃ) እና የጉበት ወይም የኩላሊት መርዛማነት (ምስል 1E,F).
ቀይ የጂንሰንግ ማውጣት በ A / J አይጦች ውስጥ የሳንባ እጢ እድገትን ያክማል.(ሀ) የሙከራ ንድፍ.(ለ) በመዳፊት ሞዴል ውስጥ ትላልቅ የሳምባ ነቀርሳዎች.ዕጢዎች ቀስቶች ይጠቁማሉ.a: የቻይና ቀይ የጂንሰንግ ቡድን.ለ: ቡድን A የኮሪያ ቀይ ጂንሰንግ.ሐ፡ የኮሪያ ቀይ ጂንሰንግ ቡድን B. መ፡ የኮሪያ ቀይ ጂንሰንግ ቡድን C. መ፡ የቁጥጥር ቡድን።(ሐ) የብርሃን ማይክሮግራፍ የሳንባ እጢ ያሳያል።ማጉላት፡ 100. ለ፡ 400. (D) በቀይ ጂንሰንግ የማውጣት ቡድን ውስጥ የዕጢ ጭነት።(ኢ) የፕላዝማ መጠን የጉበት ኢንዛይም ALT.(ኤፍ) የኩላሊት ኢንዛይም የፕላዝማ ደረጃዎች Cr.መረጃ በአማካይ ± መደበኛ መዛባት ተገልጿል.* ፒ <0.05.
በዚህ ጥናት ውስጥ ተለይተው የሚታወቁት ቀይ የጂንሰንግ ውህዶች እጅግ በጣም ጥሩ ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ታንደም ስፔክትሮሜትሪ (UPLC-MS/MS) በሚከተሉት የጂንሴኖሳይዶች መጠን ለመለካት: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3. Rh2፣ F1፣ Rk1 እና Rg5ትንታኔዎችን ለመለካት ጥቅም ላይ የዋሉት የUPLC እና MS ሁኔታዎች ባለፈው ዘገባ19 ውስጥ ተገልጸዋል።UPLC-MS/MS chromatograms የአራት ቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች በስእል 2A ውስጥ ይታያሉ።በ CRG (590.27 ± 41.28 μሞል / ሊ) (ምስል 2B) ውስጥ ከፍተኛው የጂንሰኖሳይድ ይዘት በጠቅላላው የጂንሴኖሳይድ ይዘት ውስጥ ከፍተኛ ልዩነቶች ነበሩ.የግለሰብ ጂንሰኖሳይዶችን (ምስል 2C) ሲገመግሙ, KRGB ከሌሎች ጂንሴኖሲዶች (58.33 ± 3.81 μmol / L ለ G-Rg3s እና 41.56 ± 2.88 μmol / L ለ G-Rg3r) ጋር ሲነፃፀር ከፍተኛውን የ G-Rg3 ደረጃ አሳይቷል.ቀይ የጂንሰንግ ዓይነት (P <0.001).G-Rg3 የሚከሰተው እንደ ጥንድ ስቴሪዮሶመሮች G-Rg3r እና G-Rg3s ሲሆን እነዚህም በካርቦን 20 ውስጥ ባለው የሃይድሮክሳይል ቡድን አቀማመጥ ይለያያሉ (ምስል 2D)።ውጤቶቹ እንደሚያመለክቱት G-Rg3r ወይም G-Rg3 በ B(a)P በተፈጠረ የካንሰር መዳፊት ሞዴል ውስጥ ጠቃሚ የፀረ-ነቀርሳ አቅም ሊኖራቸው ይችላል።
በተለያዩ የቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች ውስጥ የጂንሴኖሳይዶች ይዘት።(ሀ) UPLC-MS/MS chromatograms የአራት ቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች።(ለ) በተጠቀሱት ንጣፎች ውስጥ አጠቃላይ የጂንሴኖሳይድ ይዘት ግምት.(ሐ) በተሰየሙ ገለጻዎች ውስጥ የግለሰብ ጂንሴኖሳይዶችን መለየት።(D) የጂንሴኖሳይድ ስቴሪዮሶመሮች G-Rg3r እና G-Rg3s አወቃቀሮች።መረጃ የሶስትዮሽ ውሳኔዎች አማካኝ ± መደበኛ መዛባት ተብሎ ይገለጻል።*** ፒ <0.001.
የ UPLC-MS/MS ጥናት ከ 20 ሳምንታት ህክምና በኋላ በአንጀት እና በደም ናሙናዎች ውስጥ የጂንሴኖሳይዶችን መጠን መቁጠርን ይጠይቃል.ከ KRGB ጋር የሚደረግ ሕክምና በደም ውስጥ 0.0063 ± 0.0005 μg / ml Rg5 ብቻ መኖሩን ያሳያል.ምንም የቀሩ ጂንሰኖሳይዶች አልተገኙም, ይህም ደካማ የአፍ ባዮአቪላይዜሽን ያሳያል እና ስለዚህ ለእነዚህ ginsenosides ተጋላጭነትን ይቀንሳል.
ኮሎን አዶኖካርሲኖማ ሴል መስመር Caco-2 በሰው አንጀት ኤፒተልየል ሴሎች ከሥነ-ቅርጽ አኳያ እና ባዮኬሚካላዊ ተመሳሳይ ነው, ይህም የኢንትሮሳይት መጓጓዣን በአንጀት ውስጥ ያለውን ኤፒተልያል አጥር ለመገምገም ያለውን ጥቅም ያሳያል.ይህ ትንታኔ ቀደም ባለው ጥናት 20 ላይ የተመሰረተ ነው.ምስሎች 3A,B,C,D,E,F የ Caco-2 monolayer ሞዴልን በመጠቀም የ G-Rg3r እና G-Rg3 የትራንስሴሉላር ትራንስፖርት ተወካይ ምስሎችን ያሳያሉ።የG-Rg3r ወይም G-Rg3 ትራንስሴሉላር ማጓጓዝ በካኮ-2 ሞኖላይየሮች ከባሶላተራል ወደ apical ጎን (Pb-a) ከአፕቲካል ወደ ባሶላተራል ጎን (Pa-b) በከፍተኛ ደረጃ ከፍ ያለ ነበር።ለ G-Rg3r, አማካኝ ፓ-ቢ ዋጋ 0.38 ± 0.06 ነበር, ይህም በ 50 μሞል / ሊ ቬራፓሚል ከታከመ በኋላ ወደ 0.73 ± 0.06 ከፍ ብሏል እና በ 1.14 ± 0.09 በ 100 μmol / L ቬራፓሚል (p <0.01) ከታከመ በኋላ (p <0.01). በቅደም ተከተል ምስል 2).3 ሀ)የ G-Rg3 ምልከታዎች ተመሳሳይ ንድፍ (ምስል 3B) ተከትለዋል, እና ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት የቬራፓሚል ሕክምና የ G-Rg3r እና G-Rg3 መጓጓዣን ያሻሽላል.የቬራፓሚል ሕክምና በአማካኝ Pb-a እና G-Rg3r እና G-Rg3s የፍሰት ሬሾዎች (ምስል 3C,D,E,F) ላይ በከፍተኛ ሁኔታ እንዲቀንስ አድርጓል, ይህም የቬራፓሚል ሕክምና በካኮ-2 ፈሳሽ ሴሎች ውስጥ የጂንሴኖሳይድ ይዘትን እንደሚቀንስ ያሳያል..
በ Caco-2 monolayers ውስጥ የ G-Rg3 ትራንስሴሉላር ማጓጓዝ እና በአይጥ ፐርፊሽን ምርመራ ውስጥ የአንጀት መሳብ.(A) የ G-Rg3r ቡድን ፓ-ቢ ዋጋ በካኮ-2 ሞኖላይየር።(ለ) በ Caco-2 monolayer ውስጥ የ G-Rg3s ቡድኖች ፓ-ቢ እሴት።(ሐ) የ G-Rg3r ቡድን በ Caco-2 monolayer ውስጥ ፒቢ እሴት።(D) የ G-Rg3s ቡድኖች በ Caco-2 monolayer ውስጥ ፒቢ እሴት።(ኢ) የG-Rg3r ቡድኖች በካኮ-2 ሞኖላይየር ውስጥ ያለው የምርት ጥምርታ።(ኤፍ) የG-Rg3 ቡድኖች የካኮ-2 ሞኖሌይተር ምርት ጥምርታ።(ጂ) በአይጦች ውስጥ የደም መፍሰስ ምርመራ G-Rg3r የአንጀት የመምጠጥ መቶኛ።(H) በአይጦች ውስጥ የደም መፍሰስ ምርመራ G-Rg3 የአንጀት የመምጠጥ መቶኛ።ቬራፓሚል ሳይጨምር የመተላለፊያ እና የመምጠጥ ሁኔታ ተነጻጽሯል.መረጃ እንደ አምስት ገለልተኛ ሙከራዎች አማካኝ ± መደበኛ መዛባት ተገልጿል.* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001.
ከቀደምት work20 ጋር በሚስማማ መልኩ የጂ-አርጂ 3 በአንጀት ውስጥ የመምጠጥ መጠን ከቬራፓሚል ሕክምና በኋላ መጨመሩን ለማወቅ orthotopic intestinal intestinal አይጦች ተካሂደዋል።ምስሎች 3G፣H በካንሰር አምሳያ አይጦች ውስጥ የG-Rg3r እና G-Rg3 የአንጀት የመምጠጥ መቶኛን ከላይ ባሉት ጊዜያት ለመገምገም የተወካይ የደም መፍሰስ ዳሰሳ ያሳያል።በ 50 μM ቬራፓሚል እና በ 100 μM ቬራፓሚል ከታከመ በኋላ የ G-Rg3r ደካማ የ G-Rg3r የመጀመሪያ ደረጃ መቶኛ ወደ 20% ከፍ ብሏል.በተመሳሳይ መልኩ G-Rg3, የመጀመርያው የ 10% መጠን ያለው, በተጨማሪም በ 50 μM ቬራፓሚል ከታከመ በኋላ ከ 20% በላይ ከፍተኛ እና በ 100 μM ቬራፓሚል ከታከመ በኋላ ወደ 30% ገደማ አሳይቷል, ይህም P-gpን በቬራፓሚል መከልከል እንደሚያሻሽል ይጠቁማል. አንጀት G-absorption Rg3 በሳንባ ካንሰር የመዳፊት ሞዴል.
ከላይ በተጠቀሰው ዘዴ መሰረት, በስእል 4A እንደሚታየው B (a) ፒ-የተፈጠሩ የካንሰር ሞዴል አይጦች በዘፈቀደ በስድስት ቡድኖች ተከፍለዋል.ከቁጥጥር ቡድን ጋር ሲነፃፀር በ G-Rg3 ሕክምና ቡድን ውስጥ ምንም ጉልህ የሆነ የክብደት መቀነስ ወይም የመርዛማነት ክሊኒካዊ ምልክቶች አልተስተዋሉም (መረጃ አይታይም).ከ 20 ሳምንታት ህክምና በኋላ የእያንዳንዱ መዳፊት ሳንባዎች ተሰብስበዋል.ምስል 4B ከላይ በተጠቀሱት የሕክምና ቡድኖች ውስጥ በአይጦች ውስጥ ማክሮስኮፒክ የሳምባ ነቀርሳዎችን ያሳያል, እና ምስል 4C ተወካይ እጢ የብርሃን ማይክሮግራፍ ያሳያል.በእያንዳንዱ ቡድን ውስጥ ስላለው ዕጢ ሸክም (ምስል 4D) በ G-Rg3r እና G-Rg3s የሚታከሙ አይጦች 0.75 ± 0.29 mm3 እና 0.81 ± 0.30 mm3 ሲሆኑ የጂ አይጦች ዋጋ በቅደም ተከተል ከ -Rg3s ጋር 1.63 በቅደም ± 0.40 mm3 ነበሩ.አይጦችን ይቆጣጠሩ (p <0.001)፣ የG-Rg3 ሕክምና አይጥ ላይ ያለውን ዕጢ ሸክም እንደቀነሰ ያሳያል።የቬራፓሚል አስተዳደር ይህንን ቅነሳ የበለጠ አሻሽሏል-በቬራፓሚል + G-Rg3r አይጦች ውስጥ ያሉት ዋጋዎች ከ 0.75 ± 0.29 mm3 ወደ 0.33 ± 0.25 mm3 (p <0.01) እና የ verapamil + ከ 0.81 ± 0.30 ± 0.2 ወደ 1.29 ቀንሷል. mm3 በ G. -Rg3s የሚታከሙ አይጦች (p <0.05)፣ ይህም ቬራፓሚል የ G-Rg3ን በቲዩሪጄኔሲስ ላይ ያለውን የመከልከል ውጤት እንደሚያሳድግ ያሳያል።የቲሞር ሸክም በቁጥጥር ቡድን እና በቬራፓሚል ቡድን, በ G-Rg3r ቡድን እና በ G-Rg3s ቡድን እና በቬራፓሚል + G-Rg3r ቡድን እና በቬራፓሚል + G-Rg3s ቡድን መካከል ምንም ልዩነት አላሳየም.ከዚህም በላይ ከተገመገሙት ሕክምናዎች ጋር የተያያዙ ጉልህ የሆኑ የጉበት ወይም የኩላሊት መርዞች አልነበሩም (ምስል 4E,F).
ከ G-Rg3 ህክምና እና ፕላዝማ ወይም የአንጀት G-Rg3r እና G-Rg3 ደረጃዎች በኋላ በተጠቀሱት ቡድኖች ውስጥ የቱመር ሸክም.(ሀ) የሙከራ ንድፍ.(ለ) በመዳፊት ሞዴል ውስጥ የማክሮስኮፒክ እጢዎች።ዕጢዎች ቀስቶች ይጠቁማሉ.a፡ G-Rg3r.ለ፡ G-Rg3sc: G-Rg3r ከቬራፓሚል ጋር በማጣመር.d: G-Rg3 ከቬራፓሚል ጋር በማጣመር.መ፡ ቬራፓሚልሠ፡ መቆጣጠር።(ሐ) በማጉላት ላይ ዕጢው የኦፕቲካል ማይክሮግራፍ.መልስ፡ 100xለ: 400X.(D) የ G-Rg3 + ቬራፓሚል ሕክምና በኤ/ጄ አይጦች ላይ ባለው ዕጢ ሸክም ላይ ያለው ተጽእኖ።(ኢ) የፕላዝማ መጠን የጉበት ኢንዛይም ALT.(ኤፍ) የኩላሊት ኢንዛይም የፕላዝማ ደረጃዎች Cr.(ጂ) የተጠቆሙት ቡድኖች G-Rg3r ወይም G-Rg3 የፕላዝማ ደረጃዎች።(H) በተጠቀሱት ቡድኖች አንጀት ውስጥ የ G-Rg3r ወይም G-Rg3s ደረጃዎች።መረጃ የሶስትዮሽ ውሳኔዎች አማካኝ ± መደበኛ መዛባት ተብሎ ይገለጻል።* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001.
በ B (a) ፒ-የተቀሰቀሰ የካንሰር ሞዴል አይጦች ውስጥ የ G-Rg3 ደረጃዎች በ UPLC-MS / MS ከ 20-ሳምንት የሕክምና ጊዜ በኋላ በዘዴዎች ክፍል ውስጥ በተገለጸው ዘዴ መሰረት ተገምግመዋል.ምስሎች 4G እና H የፕላዝማ እና የአንጀት G-Rg3 ደረጃዎችን በቅደም ተከተል ያሳያሉ።የፕላዝማ G-Rg3r ደረጃዎች 0.44 ± 0.32 μmol/L እና ወደ 1.17 ± 0.47 μmol/L በአንድ ጊዜ የቬራፓሚል አስተዳደር (p <0.001) ሲጨምር የአንጀት G-Rg3r ደረጃዎች 0.53 ± 0.08.µከቬራፓሚል ጋር ሲደባለቅ, g ወደ 1.35 ± 0.13 μg / g (p <0.001) ጨምሯል.ለ G-Rg3, ውጤቶቹ ተመሳሳይ ንድፍ ተከትለዋል, ይህም የቬራፓሚል ህክምና በ A/J አይጦች ውስጥ የ G-Rg3 የአፍ ውስጥ ባዮአቪላይዜሽን እንደጨመረ ያሳያል.
የሕዋስ አዋጭነት ዳሰሳ የ B(a) P እና G-Rg3 በሄል ሴል ላይ ያለውን ሳይቶቶክሲክነት ለመገምገም ጥቅም ላይ ውሏል።በ hEL ሴሎች ውስጥ በ B (a) P የሚነሳው ሳይቶቶክሲክ በስእል 5A ይታያል, የ G-Rg3r እና G-Rg3 መርዛማ ያልሆኑ ባህሪያት በስእል 5A እና 5B ውስጥ ይታያሉ.5B, C. የ G-Rg3 የሳይቶፕሮቴቲክ ተጽእኖን ለመገምገም, B (a) P ከተለያዩ የጂ-Rg3r ወይም G-Rg3 ውህዶች ጋር ወደ hEL ሕዋሳት ተካቷል.በስእል 5D ላይ እንደሚታየው G-Rg3r በ 5 μM፣ 10 μM እና 20 μM የተመለሰ የሕዋስ አቅምን ወደ 58.3%፣ 79.3% እና 77.3%፣ በቅደም ተከተል።ተመሳሳይ ውጤቶች በG-Rg3s ቡድን ውስጥም ሊታዩ ይችላሉ።የG-Rg3s ክምችት 5 μM፣ 10 μM እና 20 μM ሲሆኑ፣ የሕዋስ አዋጭነት ወደ 58.3%፣ 72.7% እና 76.7%፣ በቅደም ተከተል ተመልሷል (ምስል 5E)።).የ BPDE-DNA ንጣፎች መኖራቸው የሚለካው የ ELISA ኪት በመጠቀም ነው።ውጤታችን እንደሚያሳየው የ BPDE-DNA የመግቢያ ደረጃዎች ከቁጥጥር ቡድን ጋር ሲነፃፀር በ B (a) P-ታከመው ቡድን ውስጥ ጨምረዋል, ነገር ግን ከጂ-አርጂ 3 የጋራ ሕክምና ጋር ሲነጻጸር, BPDE-DNA የመግቢያ ደረጃዎች በ B (a) P ቡድን ውስጥ. B በተያዘው ቡድን ውስጥ, የዲ ኤን ኤ የመግቢያ ደረጃዎች በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሰዋል.ከ B (a) P ጋር የሚደረግ ሕክምና ብቻ በስእል 5F (1.87 ± 0.33 vs. 3.77 ± 0.42 ለ G-Rg3r, 1.93 ± 0.48 vs. 3.77 ± 0.42 ለ G -Rg3s, p <0.001).
በG-Rg3 እና B(a) P በሚታከሙ የሄል ሴሎች ውስጥ የሕዋስ አዋጭነት እና የ BPDE-DNA ቁርኝት መፈጠር።(A) በ B(a) P የታከሙ የሄል ህዋሶች መኖር።(ለ) በG-Rg3r የታከሙ የሄል ሴሎች መኖር።(ሐ) በG-Rg3 የታከሙ የሄል ሴሎች መኖር።(D) በ B(a) P እና G-Rg3r የታከሙ የሄል ሴሎች መኖር።(E) በ B(a) P እና G-Rg3 የታከሙ የሄል ሴሎች መኖር።(ኤፍ) በ B(a) P እና G-Rg3 በሚታከሙ የሄል ሴሎች ውስጥ የ BPDE-DNA የተቀናጁ ደረጃዎች።መረጃ የሶስትዮሽ ውሳኔዎች አማካኝ ± መደበኛ መዛባት ተብሎ ይገለጻል።* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001.
የጂኤስቲ ኢንዛይም አገላለጽ ከ10 μM B(a) P እና 10 μM G-Rg3r ወይም G-Rg3s ጋር አብሮ ከታከመ በኋላ ተገኝቷል።ውጤታችን እንደሚያሳየው B (a) P የ GST አገላለጽ (59.7 ± 8.2% በ G-Rg3r ቡድን እና 39 ± 4.5% በ G-Rg3s ቡድን) እና B (a) P ከ G-Rg3r ጋር የተያያዘ ነው. ፣ ወይም በG-Rg3r፣ ወይም በG-Rg3r።ከG-Rg3s ጋር የሚደረግ የጋራ ሕክምና የጂኤስቲ አገላለጽ ወደነበረበት ተመልሷል።GST አገላለጽ (103.7 ± 15.5% በ G-Rg3r ቡድን እና 110 ± 11.1% በ G-Rg3s ቡድን, p <0.05 እና p <0.001, በቅደም, ምስል 6A, B እና C).የGST እንቅስቃሴ የተገመገመው የእንቅስቃሴ መመዘኛ ኪት በመጠቀም ነው።ውጤታችን እንደሚያሳየው ጥምር ሕክምና ቡድን ከ B (a) P ብቻ ቡድን (96.3 ± 6.6% vs. 35.7 ± 7.8% በ G-Rg3r ቡድን ከ 92.3 ± 6.5 ጋር ሲነፃፀር በ G-Rg3r ቡድን ውስጥ ከ 92.3 ± 6.5 ጋር ሲነፃፀር ከፍተኛ የ GST እንቅስቃሴ ነበረው. ).% vs 35.7 ± 7.8% በ G-Rg3s ቡድን, p <0.001, ምስል 6D).
B(a)P እና G-Rg3 በሚታከሙ በ hEL ሴሎች ውስጥ የጂኤስቲ እና Nrf2 መግለጫ።(ሀ) የጂኤስቲ አገላለፅን በምዕራቡ መጥፋት መለየት።(ለ) በ B(a) P እና G-Rg3r በሚታከሙ የኤችኤል ሴሎች ውስጥ የጂኤስቲ የቁጥር መግለጫ።(ሐ) B(a)P እና G-Rg3s በሚታከሙ የኤችኤል ሴሎች ውስጥ የጂኤስቲ የቁጥር መግለጫ።(D) በ B(a) P እና G-Rg3 በሚታከሙ የሄል ሴሎች ውስጥ የጂኤስቲ እንቅስቃሴ።(ኢ) የNrf2 አገላለጽ በምዕራቡ መጥፋት መለየት።(ኤፍ) በ B(a) P እና G-Rg3r በሚታከሙ በ hEL ሴሎች ውስጥ የ Nrf2 የቁጥር መግለጫ።(ጂ) በ B(a) P እና G-Rg3s በሚታከሙ በ hEL ሴሎች ውስጥ የ Nrf2 የቁጥር አገላለጽ።መረጃ የሶስትዮሽ ውሳኔዎች አማካኝ ± መደበኛ መዛባት ተብሎ ይገለጻል።* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001.
በ G-Rg3-መካከለኛው የ B (a) P-induced tumorigenesis ውስጥ የተካተቱትን መንገዶች ለማብራራት, Nrf2 አገላለጽ በምዕራባዊ መጥፋት ተገምግሟል.በስእል 6E,F,G ላይ እንደሚታየው ከቁጥጥር ቡድን ጋር ሲነፃፀር በ B (a) P ሕክምና ቡድን ውስጥ ያለው የ Nrf2 ደረጃ ብቻ ቀንሷል;ነገር ግን ከ B (a) P ሕክምና ቡድን ጋር ሲነጻጸር, B (a) Nrf2 ደረጃዎች በ PG-Rg3 ቡድን ውስጥ ጨምረዋል (106 ± 9.5% ለ G-Rg3r vs. 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% ለ G-Rg3r ከ 41 ± 9.8% ለ G-Rg3s፣ p <0.01)።
የNrf2 መከላከያ ሚናን አረጋግጠናል የ Nrf2 አገላለፅን በመጨፍለቅ ልዩ የሆነ ትንሽ ጣልቃ-ገብ አር ኤን ኤ (siRNA)።Nrf2 ማንኳኳቱ በምዕራቡ መጥፋት ተረጋግጧል (ምስል 7A፣B)።በሥዕሎች 7C,D ላይ እንደሚታየው የሄል ሴሎችን ከ B (a) P እና G-Rg3 ጋር በጋራ ማከም የ BPDE-DNA adducts (1.47 ± 0.21) ከ B (a) P ጋር ሲነፃፀር መቀነስ አስከትሏል. በሲአርኤንኤ ቡድን ውስጥ ብቻውን.) G-Rg3r 4.13 ± 0.49, G-Rg3s 1.8 ± 0.32 እና 4.1 ± 0.57, p <0.01) ነበር.ሆኖም የጂ-አርጂ 3 በ BPDE-DNA ምስረታ ላይ የሚያሳድረው ተፅዕኖ በNrf2 knockdown ተሰርዟል።በ siNrf2 ቡድን ውስጥ በ B (a) P እና G-Rg3 የጋራ ሕክምና እና B (a) P ሕክምና (3.0 ± 0.21 ለ G-Rg3r vs. 3.56 ± 0.32 መካከል በ BPDE-DNA adduct ምስረታ ላይ ምንም ልዩነት የለም) ).ለ G-Rg3r ከ 3.6 ለ G-Rg3s ከ ± 0.45 ከ 4.0 ± 0.37 ፣ p > 0.05)።
የNrf2 ንክኪ በ BPDE-DNA የተቀናጀ ምስረታ በሄል ህዋሶች ላይ።(ሀ) Nrf2 መውደቅ በምዕራባውያን መጥፋት ተረጋግጧል።(ለ) የ Nrf2 ባንድ ጥንካሬ መጠን።(ሐ) በ B(a) P እና G-Rg3r በሚታከሙ የሄል ህዋሶች ውስጥ የNrf2 ንክኪ በ BPDE-DNA መገጣጠሚያ ደረጃዎች ላይ ያለው ውጤት።(D) በ B(a) P እና G-Rg3 በሚታከሙ የሄል ህዋሶች ውስጥ የ Nrf2 ንክኪ በ BPDE-DNA የተቀናጁ ደረጃዎች ላይ ያለው ውጤት።መረጃ የሶስትዮሽ ውሳኔዎች አማካኝ ± መደበኛ መዛባት ተብሎ ይገለጻል።* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001.
ይህ ጥናት በ B(a)P-induced የሳንባ ካንሰር የመዳፊት ሞዴል ላይ የተለያዩ የቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች የመከላከያ ውጤቶችን ገምግሟል፣ እና የKRGB ህክምና የዕጢ ሸክምን በእጅጉ ቀንሷል።G-Rg3 በዚህ የጂንሰንግ ረቂቅ ውስጥ ከፍተኛው ይዘት እንዳለው ግምት ውስጥ በማስገባት ይህ ginsenoside tumorigenesisን በመከላከል ረገድ ያለው ጠቃሚ ሚና ተጠንቷል።ሁለቱም G-Rg3r እና G-Rg3 (ሁለት የG-Rg3 ኤፒመሮች) በ B(a)P-የሚፈጠር ካንሰር ውስጥ ባለው የመዳፊት ሞዴል ላይ የእጢ ሸክምን በእጅጉ ቀንሰዋል።G-Rg3r እና G-Rg3 የቲዩመር ሴል 21 አፖፕቶሲስን በማነሳሳት ፣የእጢ እድገት22ን በመከልከል ፣የሴል ዑደቱን23 በመያዝ እና angiogenesis24 ላይ ተጽዕኖ በማድረግ የፀረ-ነቀርሳ ተፅእኖን ይፈጥራሉ።G-Rg3 ሴሉላር ሜታስታሲስ25ን እንደሚገታ ታይቷል፣ እና የጂ-አርጂ 3 የኬሞቴራፒ እና የሬዲዮቴራፒ ውጤቶችን የማጎልበት ችሎታ 26,27 ተመዝግቧል።Poon et al የ G-Rg3 ሕክምና የ B(a) P28 የጂኖቶክሲካል ተጽእኖን ሊቀንስ እንደሚችል አሳይተዋል።ይህ ጥናት G-Rg3 በአካባቢያዊ ካርሲኖጂክ ሞለኪውሎች ላይ በማነጣጠር እና ካንሰርን በመከላከል ረገድ ያለውን የህክምና አቅም ያሳያል።
ምንም እንኳን ጥሩ የመከላከያ አቅም ቢኖራቸውም ፣ የጂንሴኖሳይዶች ደካማ የአፍ ባዮአቪላይዜሽን ለእነዚህ ሞለኪውሎች ክሊኒካዊ አጠቃቀም ፈታኝ ነው።በአይጦች ውስጥ የጂንሰኖሳይዶችን የአፍ አስተዳደር የፋርማሲኪኔቲክ ትንታኔ እንደሚያሳየው ባዮአቫይል አሁንም ከ 5% 29 ያነሰ ነው።እነዚህ ሙከራዎች እንደሚያሳዩት ከ 20-ሳምንት የሕክምና ጊዜ በኋላ, Rg5 የደም መጠን ብቻ ቀንሷል.ምንም እንኳን ደካማ ባዮአቪላይዜሽን ዋናው ዘዴ ግልጽ ሆኖ ቢቆይም, ፒ-ጂፒ በጂንሴኖሳይድ ፍሳሽ ውስጥ እንደሚሳተፍ ይታሰባል.ይህ ሥራ ለመጀመሪያ ጊዜ የቬራፓሚል አስተዳደር P-GP blocker የጂ-አርጂ3ር እና የጂ-አርጂ3ስ የአፍ ባዮአቪላሽን እንደሚጨምር አሳይቷል።ስለዚህም ይህ ግኝት G-Rg3r እና G-Rg3s ፍሳሹን ለመቆጣጠር እንደ P-gp substrates ሆነው እንደሚሰሩ ይጠቁማል።
ይህ ሥራ የሚያሳየው ከቬራፓሚል ጋር የሚደረግ ሕክምና በሳንባ ካንሰር የመዳፊት ሞዴል ውስጥ የጂ-አርጂ 3 የአፍ ባዮአቪላይዜሽን ይጨምራል።ይህ ግኝት በፒ-ጂፒ እገዳ ላይ በ G-Rg3 የአንጀት ትራንስሴሉላር ትራንስፖርት መጨመር የተደገፈ ነው፣ በዚህም መሳብን ይጨምራል።በካኮ2 ሴሎች ውስጥ የተደረጉ ግምገማዎች የቬራፓሚል ሕክምና የ G-Rg3r እና G-Rg3s ፍሳሾችን በመቀነሱ የሽፋን ቅልጥፍናን ያሻሽላል.በያንግ እና ሌሎች የተደረገ ጥናት.ጥናቶች እንደሚያሳዩት በሳይክሎፖሪን A (ሌላ ፒ-ጂፒ ማገጃ) የሚደረግ ሕክምና የጂንሴኖሳይድ Rh2 ባዮአቪላይዜሽን ከ 1% 20 የመነሻ እሴት ወደ 30% ይጨምራል።Ginsenosides ውህዶች K እና Rg1 ተመሳሳይ ውጤቶችን አሳይተዋል30,31.ቬራፓሚል እና ሳይክሎፖሮን ኤ በጋራ ሲታከሉ በካኮ-2 ሴሎች ውስጥ ያለው የስብስብ ኬ ፍልሰት ከ 26.6 ወደ 3 ያነሰ በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል, በሴሉላር ውስጥ ያለው የሴሉላር ደረጃ ደግሞ 40-fold30 ጨምሯል.ቬራፓሚል በሚኖርበት ጊዜ የ Rg1 ደረጃዎች በአይጥ ሳንባ ኤፒተልየል ሴሎች ውስጥ ጨምረዋል, ይህም ለፒ-ጂፒ በጂንሴኖሳይድ ፍሳሽ ውስጥ ሚና እንዳለው ይጠቁማል, በ Meng et al.31.ይሁን እንጂ ቬራፓሚል በአንዳንድ የጂንሴኖሳይዶች (እንደ Rg1, F1, Rh1 እና Re ያሉ) ፍሰቶች ላይ ተመሳሳይ ተጽእኖ አላሳደረም, ይህም በ P-gp substrates ላይ ተፅዕኖ እንደሌለው ያሳያል, በ Liang et al.32 .ይህ ምልከታ ከሌሎች ተጓጓዦች እና አማራጭ የጂንሴኖሳይድ አወቃቀሮች ተሳትፎ ጋር የተያያዘ ሊሆን ይችላል።
በካንሰር ላይ የጂ-አርጂ 3 የመከላከያ ውጤት ዘዴ ግልጽ አይደለም.ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች G-Rg3 የዲኤንኤ መጎዳትን እና አፖፕቶሲስን የሚከላከለው ኦክሳይድ ውጥረትን እና እብጠትን16,33 በመቀነስ ሲሆን ይህም B (a) P-induced tumorigenesisን ለመከላከል ዋናው ዘዴ ሊሆን ይችላል.አንዳንድ ሪፖርቶች እንደሚያመለክቱት በ B(a) P የሚቀሰቅሰው ጂኖቶክሲዝም በክፍል II ኢንዛይሞች በመቀየር BPDE-DNA34 እንዲፈጠር ማድረግ ይቻላል።GST የጂኤስኤች ከ BPDE ጋር መተሳሰርን በማስተዋወቅ የ BPDE-DNA የተቀናጀ አሰራርን የሚገታ የዲኤንኤ ጉዳት በ B(a)P35 የሚቀንስ ዓይነተኛ ምዕራፍ II ኢንዛይም ነው።ውጤታችን እንደሚያሳየው G-Rg3 ህክምና B (a) P-induced cytotoxicity እና BPDE-DNA adduct ምስረታ በ hEL ሴሎች ውስጥ እንዲቀንስ እና የ GST አገላለጽ እና እንቅስቃሴን በብልቃጥ ውስጥ ያድሳል።ነገር ግን፣ እነዚህ ተፅዕኖዎች Nrf2 በማይኖርበት ጊዜ አልነበሩም፣ ይህም G-Rg3 በ Nrf2 መንገድ በኩል የሳይቶፕሮክቲቭ ውጤቶችን እንደሚያመጣ ይጠቁማል።Nrf2 የ xenobiotics36 ን ማጽዳትን የሚያበረታታ ለክፍል II የመርዛማ ኢንዛይሞች ዋና ቅጂ ነው።የ Nrf2 ዱካ ማግበር የሳይቶፕሮቴሽንን ያመጣል እና የቲሹ ጉዳትን ይቀንሳል37.ከዚህም በላይ በርካታ ሪፖርቶች የ Nrf2 ሚና በካርሲኖጅጄኔሲስ38 ውስጥ እንደ ዕጢ ማጥፋት ደግፈዋል።ጥናታችን እንደሚያሳየው የ Nrf2 መንገድን በ G-Rg3 ማስተዋወቅ በ B (a) P-induced genotoxicity ውስጥ B (a) P መርዝ መርዝ በማድረግ ደረጃ II ኢንዛይሞችን በማንቃት የቲዩሪጄኔሲስ ሂደትን በመከልከል ጠቃሚ የቁጥጥር ሚና ይጫወታል።
ስራችን በጂንሰኖሳይድ G-Rg3 ጠቃሚ ተሳትፎ B(a)P-የሚፈጠር የሳንባ ካንሰርን በአይጦች ላይ ለመከላከል የቀይ ጂንሰንግ እምቅ አቅም ያሳያል።የዚህ ሞለኪውል ደካማ የአፍ ባዮአቪላይዜሽን ክሊኒካዊ አተገባበሩን ያደናቅፋል።ነገር ግን ይህ ጥናት ለመጀመሪያ ጊዜ G-Rg3 የP-GP substrate መሆኑን ያሳያል እና የ P-GP inhibitor አስተዳደር የጂ-አርጂ 3 በብልቃጥ እና በሰውነት ውስጥ ያለውን ባዮአቫይል ይጨምራል።G-Rg3 የ Nrf2 መንገድን በመቆጣጠር B(a) P-induced cytotoxicity ይቀንሳል፣ ይህም ለመከላከያ ተግባሩ ሊሆን የሚችል ዘዴ ሊሆን ይችላል።የእኛ ጥናት የጂንሰኖሳይድ G-Rg3 የሳንባ ካንሰርን ለመከላከል እና ለማከም ያለውን አቅም ያረጋግጣል.
የስድስት ሳምንት ሴት ኤ/ጄ አይጦች (20 ± 1 ግ) እና የ 7 ሳምንት ወንድ ዊስታር አይጦች (250 ± 20 ግ) የተገኙት ከጃክሰን ላብራቶሪ (ባር ሃርበር፣ ዩኤስኤ) እና ከ Wuhan የእንስሳት እንስሳት ተቋም ነው።ዩኒቨርሲቲ (ዋን ፣ ቻይና)።የቻይንኛ ዓይነት የባህል ስብስብ ማዕከል (Wuhan, China) Caco-2 እና hEL ሴሎችን ሰጥተውልናል.ሲግማ-አልድሪች (ሴንት. ሉዊስ፣ ዩኤስኤ) የ B(a) P እና tricaprine ምንጭ ነው።የተጣራ ginsenosides G-Rg3r እና G-Rg3s፣ዲሜቲል ሰልፎክሳይድ (DMSO)፣ CellTiter-96 proliferation assay kit (MTS)፣ ቬራፓሚል፣ አነስተኛ አስፈላጊ መካከለኛ (MEM) እና የፅንስ ቦቪን ሴረም (ኤፍ.ቢ.ኤስ) የተገዙት ከ Chengdu Must Bio-ቴክኖሎጂ ነው። .Co., Ltd.(ቼንግዱ፣ ቻይና)የQIAamp ዲ ኤን ኤ ሚኒ ኪት እና BPDE-DNA የELISA ኪት የተገዙት ከ Qiagen (ስታንፎርድ፣ ሲኤ፣ ዩኤስኤ) እና ሴል ባዮላብስ (ሳንዲያጎ፣ ሲኤ፣ አሜሪካ) ነው።የጂኤስቲ እንቅስቃሴ መመርመሪያ ኪት እና አጠቃላይ የፕሮቲን መመርመሪያ ኪት (መደበኛ BCA ዘዴ) የተገዙት ከሶላርቢዮ (ቤጂንግ፣ ቻይና) ነው።ሁሉም ቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች በሚንዩ ላቦራቶሪ ውስጥ ተከማችተዋል 7. የሆንግ ኮንግ ባፕቲስት ዩኒቨርሲቲ (ሆንግ ኮንግ፣ ቻይና) እና የኮሪያ ካንሰር ማዕከል (ሴኡል፣ ኮሪያ) የ CRG የማውጣት እና የተለያዩ የኮሪያ ዝርያ ያላቸው ቀይ የጂንሰንግ ተዋጽኦዎች የንግድ ምንጮች ናቸው (KRGA፣ KRGB ን ጨምሮ) እና KRGC)።ቀይ ጂንሰንግ የተሰራው ከ 6 አመት ትኩስ የጂንሰንግ ሥሮች ነው.ቀይ የጂንሰንግ ማዉጫ የሚገኘው ጂንሰንግን በውሃ ሶስት ጊዜ በማጠብ፣ከዚያም የዉሃዉን ዉሃ በማሰባሰብ እና በመጨረሻም ዝቅተኛ የሙቀት መጠን በማድረቅ የጂንሰንግ የማውጣት ዱቄት ማግኘት ይቻላል።ፀረ እንግዳ አካላት (ፀረ-Nrf2፣ ፀረ-ጂኤስቲ እና β-አክቲን)፣ ፈረስ ፐርኦክሳይድ-የተዋሃደ ፀረ-ጥንቸል ኢሚውኖግሎቡሊን ጂ (IgG)፣ የመተላለፊያ አቀንቃኝ፣ ቁጥጥር siRNA እና Nrf2 siRNA ከሳንታ ክሩዝ ባዮቴክኖሎጂ (ሳንታ ክሩዝ፣ ካሊኤ) ተገዙ። .), አሜሪካ).
Caco2 እና hEL ሴሎች በ100 ሚሜ 2 የሕዋስ ባህል ምግቦች ተበቅለዋል ከኤምኤምኤም ጋር 10% FBS በ 37 ° ሴ እርጥበት ባለው ከባቢ አየር 5% CO2።የሕክምና ሁኔታዎችን ተፅእኖ ለመወሰን, የሄል ሴሎች በተለያየ የ B (a) P እና G-Rg3 በ MEM ውስጥ ለ 48 ሰዓታት ተወስደዋል.ከሴሎች ነፃ የሆኑ ንጥረ ነገሮችን ለማዘጋጀት ህዋሶች የበለጠ ሊተነተኑ ወይም ሊሰበሰቡ ይችላሉ።
ሁሉም ሙከራዎች በቶንግጂ ሜዲካል ኮሌጅ የሙከራ የእንስሳት ስነ-ምግባር ኮሚቴ ጸድቀዋል, የሳይንስ እና ቴክኖሎጂ Huazhong ዩኒቨርሲቲ (ማጽደቂያ ቁጥር 2019; የምዝገባ ቁጥር 4587TH).ሁሉም ሙከራዎች የተከናወኑት በተዛማጅ መመሪያዎች እና ደንቦች መሰረት ነው, እና ጥናቱ የተካሄደው በእንስሳት ምርምር: በ Vivo ሙከራዎች (ARRIVE) መመሪያዎች መሰረት ነው.የስምንት ሣምንት እድሜ ያላቸው ኤ/ጄ አይጦች በመጀመሪያ በትሪካፕሪን መፍትሄ (100 mg/kg, 0.2 ml) በ B (a) P ውስጥ ወደ ውስጥ ገብተዋል.ከሳምንት በኋላ አይጦቹ በዘፈቀደ ወደ ቁጥጥር ቡድኖች እና የተለያዩ የሕክምና ቡድኖች ተከፋፈሉ, በእያንዳንዱ ቡድን ውስጥ 15 አይጦች እና በቀን አንድ ጊዜ ይዋጣሉ.ከ20 ሳምንታት ህክምና በኋላ እንስሳት በ CO2 አስፊክሲያ ተሠዉ።ሳንባዎች ተሰብስበው ለ 24 ሰዓታት ተስተካክለዋል.የሱፐርፊሻል እጢዎች ብዛት እና የነጠላ እጢ መጠኖች ለእያንዳንዱ ሳንባ በተበታተነ ማይክሮስኮፕ ተቆጥረዋል።የእጢ መጠን ግምቶች (V) የሚሰሉት በሚከተለው አገላለጽ ነው፡ V (mm3) = 4/3πr3፣ r የእጢው ዲያሜትር ነው።በአይጦች ሳንባ ውስጥ ያሉት ሁሉም የዕጢዎች መጠን ጠቅላላ እጢ መጠን ይወክላል እና በእያንዳንዱ ቡድን ውስጥ ያለው አማካይ አጠቃላይ ዕጢ መጠን የእጢውን ጭነት ይወክላል።ለ UPLC-MS/MS ውሳኔ አጠቃላይ የደም እና የአንጀት ናሙናዎች ተሰብስበው በ -80 ° ሴ ተከማችተዋል።ሴረም ተሰብስቦ አውቶሜትድ የኬሚስትሪ ተንታኝ አላኒን አሚኖትራንስፈራዝ (ALT) እና የሴረም ክሬቲኒን (Cr) ደረጃዎችን ለመተንተን የጉበት እና የኩላሊት ተግባርን ለመገምገም ጥቅም ላይ ውሏል።
የተሰበሰቡ ናሙናዎች ከቀዝቃዛ ማከማቻ ውስጥ ተወስደዋል, ቀልጠው, ተመዘኑ እና ከላይ እንደተገለፀው ወደ ቱቦዎች ተወስደዋል.ለዚህም በ 0.8 ሚሊ ሜትር ሜታኖል መፍትሄ ውስጥ 0.5 μM phlorizin (ውስጣዊ ደረጃ) ተጨምሯል.ቲሹው ቲሹ-እንባ በመጠቀም ግብረ-ሰዶማዊነት ተሰርቷል እና ግብረ-ሰዶማዊነት ወደ 1.5 ሚሊ ሜትር ማይክሮ ሴንትሪፉጅ ቱቦ ተላልፏል.ድብልቅው በ 15500 ሩብ ለ 15 ደቂቃዎች በሴንትሪፉድ ነበር.1.0 ሚሊ ሊትር ፈሳሽ ካስወገዱ በኋላ በናይትሮጅን ማድረቅ.ለማገገም ሁለት መቶ ማይክሮ ሊትር ሜታኖል ጥቅም ላይ ይውላል.ደሙ ተሰብስቦ በአንድ መስመር ላይ ይሠራል እና ለሁሉም መለኪያዎች በማጣቀሻነት ያገለግላል.
24-ጉድጓድ ትራንስዌል ሳህኖች ቬራፓሚል በመጨመር የጂ-አርጂ 3 ማጓጓዣን መሻሻል ለመገምገም በ 1.0 × 105 Caco-2 ሴሎች በደንብ ተዘርተዋል.ከ 3 ሳምንታት ባህል በኋላ, ሴሎች በ HBSS ታጥበው በ 37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ይዘጋጃሉ.400 μL ከ 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s ወይም ከ 50 ወይም 100 μM ቬራፓሚል ጋር ድብልቅ) ወደ ሞኖሌይተሩ ባሶላተራል ወይም አፕቲካል ጎን ተተከለ እና 600 μL የ HBSS መፍትሄ ወደ ሌላኛው ተጨምሯል. ጎን.100 µl የባህል ሚዲያ በተመደበው ጊዜ (0፣ 15፣ 30፣ 45፣ 60፣ 90 እና 120 ደቂቃዎች) ይሰብስቡ እና ይህን መጠን ለመሙላት 100 µl HBSS ይጨምሩ።በUPLC-MS/MS እስኪታወቅ ድረስ ናሙናዎች በ -4 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ተቀምጠዋል።Papp = dQ/(dT × A × C0) የሚለው አገላለጽ ግልጽ የሆነ ባለ አንድ አቅጣጫዊ አፕቲካል እና ባሶላተራል ፐርሜሽን እና በተቃራኒው (Pa-b እና Pb-a, በቅደም ተከተል) ለመለካት ጥቅም ላይ ይውላል;dQ/dT የትኩረት ለውጥ ነው፣ A (0.6 ሴሜ 2) የሞኖሌይተር ወለል ስፋት ነው፣ እና C0 የመጀመሪያው ለጋሾች ትኩረት ነው።የፍሳሹ ጥምርታ እንደ Pb-a/Pa-b ይሰላል፣ይህም የጥናት መድሀኒቱን የፍሰት መጠን ይወክላል።
ወንድ ዊስታር አይጦች ለ24 ሰአታት ይጾማሉ፣ ውሃ ብቻ ጠጡ እና 3.5% የፔንቶባርቢታል መፍትሄ በደም ውስጥ በሚሰጥ መርፌ ሰመመን።የተገጠመለት የሲሊኮን ቱቦ የዶዲነም መጨረሻ እንደ መግቢያ እና የኢሊየም መጨረሻ እንደ መውጫ አለው.መግቢያውን በ 10 µM G-Rg3r ወይም G-Rg3s በ isotonic HBSS በ0.1 ml/ደቂቃ ፍሰት ለማንሳት ፐርስታሊቲክ ፓምፕ ይጠቀሙ።የቬራፓሚል ተጽእኖ የተገመገመው 50 μM ወይም 100 μM ግቢውን ወደ 10 μM G-Rg3r ወይም G-Rg3s በመጨመር ነው.UPLC-MS/MS ደም መፍሰስ ከጀመረ በኋላ ባሉት 60፣ 90፣ 120 እና 150 ደቂቃዎች ውስጥ በተሰበሰቡ የፐርፊሽን ጨረሮች ላይ ተካሄዷል።የመምጠጥ መቶኛ በቀመር % absorption = (1 - Cout/Cin) × 100%;በመውጫው እና በመግቢያው ላይ ያለው የ G-Rg3 ትኩረት በ Cout እና Cin ይገለጻል.
የ hEL ሴሎች በ 96-ጉድጓድ ሳህኖች ውስጥ በ 1 × 104 ሴል ጥግግት ውስጥ ተዘርተዋል እና በ B(a) P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) ወይም G-Rg3 በዲኤምኤስኦ ውስጥ ተፈትተዋል. .ከዚያም መድሃኒቶቹ በባህል መካከለኛ ወደ ተለያዩ ጥራዞች (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) በ 48 ሰአታት ውስጥ ተጨምረዋል.በገበያ ላይ የሚገኘውን MTS የመመርመሪያ ኪት በመጠቀም ሴሎች ለመደበኛ ፕሮቶኮል ተዳርገዋል እና ከዚያም በማይክሮፕሌት አንባቢ በ490 nm ይለካሉ።ከ B (a) P (10 μM) እና G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) ጋር በመተባበር የታከሙት የቡድኖች የሕዋስ አዋጭነት ደረጃ ከላይ በተጠቀሰው ዘዴ እና ካልታከመው ቡድን ጋር ተነጻጽሯል.
የ hEL ሴሎች በ6-ጉድጓድ ሳህኖች ውስጥ በ1 × 105 ህዋሶች/በደንብ ጥግግት እና በ10 μMG-Rg3 መኖር እና አለመኖር በ10 μMB(a) P ታክመዋል።ከ48 ሰአታት ህክምና በኋላ፣ በአምራቹ ፕሮቶኮል መሰረት QIAamp DNA Mini Kit በመጠቀም ዲ ኤን ኤ ከሄል ሴሎች ወጣ።የ BPDE-ዲ ኤን ኤ መግቢያዎች መፈጠር የ BPDE-DNA ረዳት ELISA ኪት በመጠቀም ተገኝቷል።አንጻራዊ የ BPDE-DNA adduct ደረጃዎች የሚለካው በ 450 nm የመጠጣትን መጠን በመለካት በማይክሮፕሌት አንባቢ በመጠቀም ነው።
የ hEL ህዋሶች በ96-ጉድጓድ ሳህኖች ውስጥ በ1 × 104 ህዋሶች ጥግግት የተዘሩ ሲሆን 10 μM G-Rg3 በሌለበት ወይም ለ 48 ሰአታት በ 10 μMB(a) P ታክመዋል።የGST እንቅስቃሴ የሚለካው በአምራቹ ፕሮቶኮል መሰረት የንግድ GST እንቅስቃሴ መመዘኛ መሣሪያን በመጠቀም ነው።አንጻራዊ የጂኤስቲ ማግበር የሚለካው ማይክሮፕሌት አንባቢን በመጠቀም በ450 nm በመምጠጥ ነው።
የሄል ሴሎች በበረዶ በሚቀዘቅዝ ፒቢኤስ ታጥበው ከዚያም በሬዲዮኢሚውኖፕረሲፒቴሽን አሴይ ቋት ፕሮቲን ተከላካይ እና phosphatase አጋቾቹን በያዙ ተቀባ።አጠቃላይ የፕሮቲን መመርመሪያ ኪት በመጠቀም የፕሮቲን መጠን ከተመረመረ በኋላ በእያንዳንዱ ናሙና ውስጥ 30 μg ፕሮቲን በ12% SDS-PAGE ተለያይቶ ወደ ፒቪዲኤፍ ሽፋን በኤሌክትሮፊዮሬሲስ ተላልፏል።ሜምብራንስ በ 5% የተጣራ ወተት ታግደዋል እና በአንድ ምሽት በ 4 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ በዋና ፀረ እንግዳ አካላት ተክለዋል.በፈረስ ፐርኦክሳይድ ከተዋሃዱ ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ከተዋሃዱ በኋላ የማሰር ምልክቱን ለማየት የተሻሻሉ ኬሚሊሚኒሴንስ ሪጀንቶች ተጨመሩ።የእያንዳንዱ ፕሮቲን ባንድ መጠን በImageJ ሶፍትዌር በመጠቀም ተቆጥሯል።
GraphPad Prism 7.0 ሶፍትዌር ሁሉንም መረጃዎች ለመተንተን ጥቅም ላይ ውሏል፣ እንደ አማካኝ ± መደበኛ መዛባት።በሕክምና ቡድኖች መካከል ያለው ልዩነት የተማሪ ቲ ፈተናን ወይም የአንድ-መንገድ ልዩነት ትንታኔን በመጠቀም የተገመገመ ሲሆን የ P ዋጋ <0.05 ስታቲስቲካዊ ጠቀሜታን ያሳያል።
በዚህ ጥናት ወቅት የተገኙ ወይም የተተነተኑ ሁሉም መረጃዎች በዚህ የታተመ ጽሑፍ እና ተጨማሪ የመረጃ ፋይሎች ውስጥ ተካትተዋል።
Torre, LA, Siegel, RL እና Jemal, A. የሳንባ ካንሰር ስታቲስቲክስ.ተውሳክ.ጊዜው አልፎበታል።መድሃኒት.ባዮሎጂ.893፣ 1–19 (2016)።
ሄክት፣ ኤስ. የትምባሆ ካርሲኖጂንስ፣ ባዮማርከሮች እና በትምባሆ ምክንያት የሚመጣ ካንሰር።ናት.የካንሰር ቄስ.3፣ 733–744 (2003)።
ፊሊፕስ፣ ዲኤች እና ቬኒት፣ ኤስ ዲኤንኤ እና ፕሮቲን በሰው ቲሹዎች ውስጥ ለትምባሆ ጭስ መጋለጥ ምክንያት መፈጠር።አለማቀፋዊነት.ጄ ካንሰር.131, 2733-2753 (2012).
ያንግ Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA እና Yu M. የ Houttuynia cordata እና silibinin በ benzo (a) pyrene-induced ሳንባ ነቀርሳ በ A / J አይጦች ላይ ተጽእኖ.ካንሰር 7, 1053-1057 (2005).
ታንግ, ደብሊው እና ሌሎች.ፀረ-ነቀርሳ የተፈጥሮ ምርት ከቻይና የመድኃኒት ቁሳቁሶች ተለይቷል.መንጋጋ.መድሃኒት.6, 27 (2011)
ያንግ, Y. et al.የ polyphenon E, ቀይ ጂንሰንግ እና ራፓማይሲን በ ቤንዞ (a) ፓይሬን በተፈጠረው የሳንባ ቲሞሪጄኔሲስ በ A / J አይጦች ላይ ውጤታማነት.ካንሰር 8, 52-58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS እና Yuan, KS Red, በካንሰር ህክምና ውስጥ ተሳትፎ.መንጋጋ.ጄ. ኑትመድሃኒት.14፣ 7–16 (2016)
ሊ, TS, Mazza, G., Cottrell, AS እና Gao, L. Ginsenosides በአሜሪካ ጂንሰንግ ሥር እና ቅጠሎች ውስጥ.ጄ. አግሪክ.የምግብ ኬሚስትሪ.44፣ 717–720 (1996)።
Attele AS፣ Wu JA እና Yuan KS የጂንሰንግ ፋርማኮሎጂ፡ ብዙ አካላት እና ብዙ ውጤቶች።ባዮኬሚስትሪ.ፋርማኮሎጂ.58፣ 1685–1693 (1999)።
የፖስታ ሰአት፡ ሴፕቴምበር-17-2023