Salamat sa pagbisita sa Nature.com.Ang bersyon sa browser nga imong gigamit adunay limitado nga suporta sa CSS.Alang sa labing maayo nga mga resulta, among girekomendar ang paggamit sa mas bag-ong bersyon sa imong browser (o i-off ang compatibility mode sa Internet Explorer).Sa kasamtangan, aron masiguro ang padayon nga suporta, among gipakita ang site nga wala’y istilo o JavaScript.
Ang pula nga ginseng gigamit sa tradisyonal nga tambal sa Asia sulod sa gatusan ka tuig.Niini nga pagtuon, among gisusi ang abilidad sa upat ka matang sa red ginseng (Chinese red ginseng, Korean red ginseng A, Korean red ginseng B, ug Korean red ginseng C) nga gipatubo sa lain-laing rehiyon aron pugngan ang pagporma ug pagtubo sa carcinogen-induced lung mga tumor.Ang usa ka benzo(a)pyrene (B(a)P) nga pagsulay gihimo sa A/J nga mga ilaga, ug ang Korean red ginseng B nakaplagan nga labing epektibo sa pagpamenos sa tumor nga palas-anon taliwala sa upat ka pula nga ginseng varieties.Dugang pa, among gisusi ang sulod sa nagkalain-laing ginsenosides (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 ug Rg5) sa upat ka red ginseng extracts ug nakit-an nga ang Korean red ginseng B adunay ang labing taas nga lebel sa ginsenoside Rg3 (G-Rg3), nga nagsugyot nga ang G-Rg3 mahimong adunay hinungdanon nga papel sa pagkaepektibo sa pagtambal niini.Kini nga trabaho nagpakita nga ang G-Rg3 adunay medyo ubos nga bioavailability.Bisan pa, kung ang G-Rg3 gi-coadministered sa P-gp inhibitor verapamil, ang efflux sa G-Rg3 ngadto sa Caco-2 nga mga selula mikunhod, ang rate sa intestinal pagsuyup sa G-Rg3 nadugangan sa usa ka modelo sa ilaga, ug G-Rg3 nadugangan.Sa mga selula sa Caco-2, ang pag-agos sa Rg3 mikunhod, ug ang lebel sa konsentrasyon sa Rg3 mikunhod.Ang G-Rg3 gipadako sa tinai ug plasma, ug ang abilidad niini sa pagpugong sa mga tumor gipauswag usab sa usa ka modelo sa ilaga sa B (a) P-induced tumorigenesis.Nakita usab namo nga ang G-Rg3 mikunhod sa B(a) P-induced cytotoxicity ug DNA adduct formation sa human lung cells, ug gipahiuli ang ekspresyon ug kalihokan sa phase II enzymes pinaagi sa Nrf2 pathway, nga mahimong may kalabutan sa potensyal nga mekanismo sa aksyon. sa G pagdili -Rg3..Mahitungod sa panghitabo sa mga tumor sa baga.Gipakita sa among pagtuon ang usa ka potensyal nga hinungdanon nga papel alang sa G-Rg3 sa pag-target sa mga tumor sa baga sa mga modelo sa mouse.Ang oral bioavailability niini nga ginsenoside gipauswag pinaagi sa pag-target sa P-glycoprotein, nga nagtugot sa molekula sa paggamit sa mga epekto sa anticancer.
Ang labing komon nga matang sa kanser sa baga mao ang non-small cell lung cancer (NSCLC), nga usa sa mga nag-unang hinungdan sa pagkamatay sa kanser sa China ug North America1,2.Ang nag-unang hinungdan nga nagdugang sa risgo sa pagpalambo sa dili gamay nga selula sa kanser sa baga mao ang pagpanigarilyo.Ang aso sa sigarilyo adunay sobra sa 60 ka carcinogens, lakip ang benzo(a)pyrene (B(a)P), nitrosamines, ug radioactive isotopes gikan sa pagkadunot sa radon.3 Ang polycyclic aromatic hydrocarbons B(a)P mao ang nag-unang hinungdan sa toxicity sa sigarilyo. aso.Sa pagkaladlad sa B(a)P, ang cytochrome P450 mag-convert niini ngadto sa B(a)P-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide (BPDE), nga mo-react sa DNA aron maporma ang BPDE-DNA adduct 4. Dugang pa, kini Ang mga pagdugang nagpahinabog tumorigenesis sa baga sa mga ilaga nga adunay yugto sa tumor ug histopathology nga susama sa mga tumor sa baga sa tawo5.Kini nga feature naghimo sa B(a)P-induced lung cancer model nga usa ka angay nga sistema para sa pagtimbang-timbang sa mga compound nga adunay posibleng anticancer properties.
Usa ka posible nga estratehiya aron mapugngan ang pag-uswag sa kanser sa baga sa mga grupo nga adunay peligro, labi na ang mga hinabako, mao ang paggamit sa mga ahente nga chemopreventive aron mapugngan ang pag-uswag sa intraepithelial neoplastic lesions ug sa ingon mapugngan ang ilang sunod-sunod nga pag-uswag sa malignancy.Gipakita sa mga pagtuon sa hayop nga ang lainlaing mga ahente sa chemopreventive epektibo6.Ang among miaging report7 nagpasiugda sa maayong mga epekto sa pagpugong sa pula nga ginseng sa kanser sa baga.Kini nga hilba gigamit sa daghang siglo sa tradisyonal nga tambal sa Asia aron mapalugway ang kinabuhi ug kahimsog, ug na-dokumento nga adunay mga epekto sa antitumor8.
Ang aktibo nga hinungdan sa ginseng mao ang ginsenoside, nga gigamit ingon usa ka composite marker aron masusi ang kalidad sa mga ginseng extract.Ang quantitative analysis sa krudo nga ginseng extracts kasagarang naglakip sa paggamit sa daghang ginsenosides, lakip ang RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5, ug Rc9,10.Ang mga ginsenosides adunay gamay nga klinikal nga paggamit tungod sa ilang dili maayo nga oral bioavailability11.Bisan kung ang mekanismo alang niining dili maayo nga bioavailability dili klaro, ang efflux sa ginsenosides nga gipahinabo sa P-glycoprotein (P-gp)12 mahimong hinungdan.Ang P-gp maoy usa sa pinakaimportante nga efflux transporter sa ATP-binding cassette transporter superfamily, nga naggamit sa kusog sa ATP hydrolysis aron buhian ang intracellular substances ngadto sa gawas nga palibot.Ang mga transporter nga P-gp kasagaran kay kaylap nga naapod-apod sa tinai, kidney, atay ug blood-brain barrier13.Ang P-gp adunay usa ka kritikal nga papel sa pagsuyup sa tinai, ug ang pagdili sa P-gp nagdugang sa oral nga pagsuyup ug pagkaanaa sa pipila nga mga tambal nga anticancer12,14.Ang mga pananglitan sa mga inhibitor nga gigamit kaniadto sa literatura mao ang verapamil ug cyclosporine A15.Kini nga trabaho naglakip sa pag-establisar og sistema sa mouse para sa pagtuon sa B(a) P-induced lung cancer aron sa pagtimbang-timbang sa abilidad sa lain-laing red ginseng extracts gikan sa China ug Korea nga makaapekto sa mga malignancies.Ang mga extract gi-analisa aron mahibal-an ang piho nga mga ginsenosides nga mahimong makaapekto sa carcinogenesis.Gigamit dayon ang Verapamil aron matarget ang P-gp ug mapaayo ang oral bioavailability ug pagkaepektibo sa pagtambal sa mga ginsenosides nga gipunting sa kanser.
Ang mekanismo diin ang ginseng saponins adunay mga terapyutik nga epekto sa carcinogenesis nagpabilin nga dili klaro.Gipakita sa panukiduki nga ang lainlaing mga ginsenosides makapakunhod sa kadaot sa DNA nga gipahinabo sa mga carcinogens pinaagi sa pagkunhod sa stress sa oxidative ug pagpaaktibo sa phase II detoxification enzymes, sa ingon mapugngan ang kadaot sa cell.Ang Glutathione S-transferase (GST) usa ka tipikal nga phase II nga enzyme nga gikinahanglan aron makunhuran ang kadaot sa DNA tungod sa mga carcinogens17.Ang nuclear erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) usa ka importante nga transcription factor nga nag-regulate sa redox homeostasis ug nagpalihok sa pagpahayag sa phase II enzymes ug cytoprotective antioxidant responses18.Gisusi usab sa among pagtuon ang mga epekto sa giila nga ginsenosides sa pagkunhod sa B (a) P-induced cytotoxicity ug BPDE-DNA adduct formation, ingon man usab sa pag-induce sa phase II enzymes pinaagi sa modulate sa Nrf2 pathway sa normal nga mga selula sa baga.
Ang pagtukod sa usa ka modelo sa mouse sa B (a) P-induced cancer nahiuyon sa miaging trabaho5.Ang Figure 1A nagpakita sa eksperimento nga disenyo sa usa ka 20 ka semana nga pagtambal sa usa ka modelo sa kanser sa mouse nga gipahinabo sa B(a)P, tubig (kontrol), Chinese red ginseng extract (CRG), Korean red ginseng extract A (KRGA), ug Korean red ginseng.Extract B (KRGB) ug Korean Red Ginseng Extract C (KRGC).Human sa 20 ka semana nga red ginseng treatment, ang mga ilaga gisakripisyo sa CO2 asphyxiation.Ang Figure 1B nagpakita sa mga macroscopic nga tumor sa baga sa mga mananap nga gitambalan sa lain-laing matang sa pula nga ginseng, ug ang Figure 1C nagpakita sa usa ka representante nga light micrograph sa usa ka tumor sample.Ang palas-anon sa tumor sa mga hayop nga gitambalan sa KRGB (1.5 ± 0.35) mas ubos kaysa sa kontrol nga mga hayop (0.82 ± 0.2, P <0.05), ingon sa gipakita sa Figure 1D.Ang kasagaran nga lebel sa pagdili sa load sa tumor mao ang 45%.Ang ubang mga red ginseng extracts nga gisulayan wala magpakita sa ingon ka mahinungdanon nga mga pagbag-o sa tumor nga palas-anon (P> 0.05).Walay klaro nga side effects ang nakita sa mouse model sulod sa 20 ka semana nga red ginseng treatment, lakip ang walay kausaban sa body weight (data nga wala gipakita) ug walay liver o kidney toxicity (Figure 1E, F).
Ang pula nga ginseng extract nagtambal sa pag-uswag sa tumor sa baga sa A / J nga mga ilaga.(A) Eksperimental nga disenyo.(B) Daghang mga tumor sa baga sa usa ka modelo sa mouse.Ang mga tumor gipakita pinaagi sa mga pana.a: Intsik nga pula nga ginseng nga grupo.b: grupo A sa Korean pula nga ginseng.c: Korean red ginseng group B. d: Korean red ginseng group C. d: Control group.(C) Ang light micrograph nga nagpakita sa tumor sa baga.Magnification: 100. b: 400. (D) Tumor load sa red ginseng extract nga grupo.(E) Ang lebel sa plasma sa atay nga enzyme ALT.(F) Plasma nga lebel sa renal enzyme Cr.Ang datos gipahayag isip mean ± standard deviation.*P <0.05.
Ang red ginseng extracts nga giila niini nga pagtuon gi-analisa sa ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) aron ma-quantify ang mosunod nga ginsenosides: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3 , Rh2, F1, Rk1 ug Rg5.Ang mga kondisyon sa UPLC ug MS nga gigamit sa pagsukod sa mga analytes gihulagway sa miaging report19.Ang UPLC-MS/MS chromatograms sa upat ka red ginseng extracts gipakita sa Figure 2A.Adunay mahinungdanon nga mga kalainan sa kinatibuk-ang ginsenoside nga sulod, nga adunay pinakataas nga kinatibuk-ang ginsenoside nga sulod sa CRG (590.27 ± 41.28 μmol / L) (Figure 2B).Kung gisusi ang indibidwal nga ginsenosides (Figure 2C), gipakita sa KRGB ang labing taas nga lebel sa G-Rg3 kumpara sa ubang mga ginsenosides (58.33 ± 3.81 μmol / L alang sa G-Rg3s ug 41.56 ± 2.88 μmol / L alang sa G -Rg3r).L).pula nga ginseng type (P <0.001).Ang G-Rg3 mahitabo isip usa ka parisan sa mga stereoisomer nga G-Rg3r ug G-Rg3s, nga lahi sa posisyon sa hydroxyl group sa carbon 20 (Fig. 2D).Ang mga resulta nagpakita nga ang G-Rg3r o G-Rg3 mahimong adunay importante nga potensyal nga anticancer sa usa ka B (a) P-induced cancer mouse model.
Ang sulod sa ginsenosides sa nagkalain-laing red ginseng extracts.(A) UPLC-MS/MS chromatograms sa upat ka pula nga ginseng extracts.(B) Pagbanabana sa kinatibuk-ang sulod sa ginsenoside sa gipakita nga mga kinuha.(C) Detection sa indibidwal nga ginsenosides sa gimarkahan nga mga extract.(D) Mga istruktura sa ginsenoside stereoisomers G-Rg3r ug G-Rg3s.Ang datos gipahayag isip mean ± standard deviation sa triplicate determinations.***P <0.001.
Ang pagtuon sa UPLC-MS/MS nanginahanglan ug quantification sa ginsenosides sa intestinal ug blood samples human sa 20 ka semana nga pagtambal.Ang pagtambal sa KRGB nagpakita sa presensya lamang sa 0.0063 ± 0.0005 μg/ml Rg5 sa dugo.Walay nahabilin nga ginsenosides nga nakit-an, nga nagpakita sa dili maayo nga oral bioavailability ug busa pagkunhod sa exposure niini nga mga ginsenosides.
Ang colon adenocarcinoma cell line Caco-2 kay morphologically ug biochemically susama sa human intestinal epithelial cells, nga nagpakita sa iyang gamit sa pag-assess sa enterocyte transport tabok sa intestinal epithelial barrier.Kini nga pagtuki gibase sa naunang pagtuon 20 .Ang mga numero 3A, B, C, D, E, F nagpakita sa mga representante nga mga hulagway sa transcellular transport sa G-Rg3r ug G-Rg3 gamit ang Caco-2 monolayer nga modelo.Ang transcellular nga transportasyon sa G-Rg3r o G-Rg3 tabok sa Caco-2 monolayers gikan sa basolateral ngadto sa apical nga bahin (Pb-a) mas taas kay sa gikan sa apical ngadto sa basolateral nga bahin (Pa-b).Alang sa G-Rg3r, ang mean nga kantidad sa Pa-b maoy 0.38 ± 0.06, nga misaka ngadto sa 0.73 ± 0.06 human sa pagtambal sa 50 μmol/L verapamil ug ngadto sa 1.14 ± 0.09 human sa pagtambal sa 100 μmol/L verapamil (p <0.01, 0.01 ug 0.01 matag usa;3A).Ang mga obserbasyon alang sa G-Rg3 misunod sa susama nga sumbanan (Fig. 3B), ug ang mga resulta nagpakita nga ang verapamil nga pagtambal nagpalambo sa transportasyon sa G-Rg3r ug G-Rg3.Ang pagtambal sa Verapamil miresulta usab sa usa ka mahinungdanon nga pagkunhod sa mean Pb-a ug G-Rg3r ug G-Rg3s efflux ratios (Figure 3C,D,E,F), nga nagpakita nga ang verapamil nga pagtambal nagpamenos sa ginsenoside content sa Caco-2 efflux cells..
Transcellular transport sa G-Rg3 sa Caco-2 monolayers ug intestinal absorption sa usa ka rat perfusion assay.(A) Pa-b nga kantidad sa G-Rg3r nga grupo sa Caco-2 monolayer.(B) Pa-b nga kantidad sa G-Rg3s nga mga grupo sa Caco-2 monolayer.(C) Pb bili sa G-Rg3r nga grupo sa Caco-2 monolayer.(D) Pb nga kantidad sa G-Rg3s nga mga grupo sa Caco-2 monolayer.(E) Yield ratio sa G-Rg3r nga mga grupo sa usa ka Caco-2 monolayer.(F) Yield ratio sa G-Rg3 nga mga grupo sa usa ka Caco-2 monolayer.(G) Porsiyento sa intestinal pagsuyup sa G-Rg3r sa usa ka perfusion assay sa mga ilaga.(H) Porsiyento sa intestinal pagsuyup sa G-Rg3 sa usa ka perfusion assay sa mga ilaga.Ang pagkamatuhup ug pagsuyup gitandi nga walay pagdugang sa verapamil.Ang datos gipahayag isip mean ± standard deviation sa lima ka independenteng mga eksperimento.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Nahiuyon sa una nga trabaho20, ang orthotopic intestinal perfusion sa mga ilaga gihimo aron mahibal-an kung ang pagsuyup sa G-Rg3 sa tinai nagdugang pagkahuman sa pagtambal sa verapamil.Ang mga numero 3G, H nagpakita sa representante nga perfusion assays aron sa pagtimbang-timbang sa porsyento sa pagsuyup sa intestinal sa G-Rg3r ug G-Rg3 sa mga ilaga nga modelo sa kanser sa panahon sa ibabaw nga mga yugto sa panahon.Ang inisyal nga porsyento sa mahuyang nga G-Rg3r uptake nga gibana-bana nga 10% misaka ngadto sa labaw sa 20% human sa pagtambal sa 50 μM verapamil ug ngadto sa labaw pa kay sa 25% human sa pagtambal sa 100 μM verapamil.Sa samang paagi, ang G-Rg3, nga adunay inisyal nga uptake nga 10%, nagpakita usab sa peak nga labaw sa 20% human sa pagtambal sa 50 μM verapamil ug dul-an sa 30% human sa pagtambal sa 100 μM verapamil, nagsugyot nga ang pagdili sa P-gp pinaagi sa verapamil makapauswag intestinal G-absorption Rg3 sa usa ka modelo sa mouse sa kanser sa baga.
Sumala sa pamaagi sa ibabaw, ang B (a) P-induced cancer model nga mga ilaga random nga gibahin ngadto sa unom ka grupo, sama sa gipakita sa Figure 4A.Walay mahinungdanon nga pagkawala sa timbang o klinikal nga mga timailhan sa toxicity nga naobserbahan sa G-Rg3 nga grupo sa pagtambal kumpara sa kontrol nga grupo (wala gipakita ang datos).Human sa 20 ka semana nga pagtambal, ang mga baga sa matag ilaga gikolekta.Ang Figure 4B nagpakita sa mga macroscopic nga tumor sa baga sa mga ilaga sa mga grupo sa pagtambal sa ibabaw, ug ang Figure 4C nagpakita sa usa ka representante nga light micrograph sa usa ka representante nga tumor.Mahitungod sa palas-anon sa tumor sa matag grupo (Fig. 4D), ang mga bili alang sa mga ilaga nga gitambalan sa G-Rg3r ug G-Rg3s maoy 0.75 ± 0.29 mm3 ug 0.81 ± 0.30 mm3, matag usa, samtang ang mga bili alang sa G Mice nga gitambalan nga adunay -Rg3s mao ang 1.63 matag usa ± 0.40 mm3.pagkontrol sa mga ilaga (p <0.001), nga nagpakita nga ang G-Rg3 nga pagtambal nagpamenos sa palas-anon sa tumor sa mga ilaga.Ang pagdumala sa verapamil dugang nga nagpauswag niini nga pagkunhod: ang mga bili sa verapamil+ G-Rg3r nga mga ilaga mikunhod gikan sa 0.75 ± 0.29 mm3 ngadto sa 0.33 ± 0.25 mm3 (p <0.01), ug ang mga bili sa verapamil+ gikan sa 0.81 ± 0.30 mm3 mikunhod ngadto sa 0.81 ± 0.30 mm3 mm3 sa G. -Rg3s-treated nga mga ilaga (p <0.05), nga nagpakita nga ang verapamil mahimong makapauswag sa pagpugong sa epekto sa G-Rg3 sa tumorigenesis.Ang gibug-aton sa tumor nagpakita nga walay mahinungdanong kalainan tali sa kontrol nga grupo ug sa verapamil nga grupo, sa G-Rg3r nga grupo ug sa G-Rg3s nga grupo, ug sa verapamil + G-Rg3r nga grupo ug sa verapamil + G-Rg3s nga grupo.Dugang pa, wala'y mahinungdanon nga mga toxicity sa atay o kidney nga may kalabutan sa gisusi nga mga pagtambal (Figure 4E, F).
Ang palas-anon sa tumor human sa pagtambal sa G-Rg3 ug plasma o intestinal G-Rg3r ug G-Rg3 nga lebel sa gipakita nga mga grupo.(A) Eksperimental nga disenyo.(B) Macroscopic nga mga tumor sa usa ka modelo sa mouse.Ang mga tumor gipakita pinaagi sa mga pana.a: G-Rg3r.b: G-Rg3s.c: G-Rg3r inubanan sa verapamil.d: G-Rg3 inubanan sa verapamil.d: Verapamil.e: kontrol.(C) Optical micrograph sa tumor sa pagpadako.Tubag: 100x.b: 400x.(D) Epekto sa G-Rg3 + verapamil nga pagtambal sa tumor nga palas-anon sa A / J nga mga ilaga.(E) Ang lebel sa plasma sa atay nga enzyme ALT.(F) Plasma nga lebel sa renal enzyme Cr.(G) Mga lebel sa plasma sa G-Rg3r o G-Rg3 sa gipakita nga mga grupo.(H) Mga lebel sa G-Rg3r o G-Rg3s sa mga tinai sa gipakita nga mga grupo.Ang datos gipahayag isip mean ± standard deviation sa triplicate determinations.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Ang mga lebel sa G-Rg3 sa B (a) P-induced cancer model nga mga ilaga gi-assess sa UPLC-MS/MS pagkahuman sa 20-semana nga panahon sa pagtambal sumala sa pamaagi nga gihulagway sa seksyon sa Mga Pamaagi.Ang mga numero 4G ug H nagpakita sa plasma ug intestinal G-Rg3 nga lebel, matag usa.Ang lebel sa plasma G-Rg3r maoy 0.44 ± 0.32 μmol/L ug misaka ngadto sa 1.17 ± 0.47 μmol/L uban sa dungan nga administrasyon sa verapamil (p <0.001), samtang ang intestinal G-Rg3r nga lebel maoy 0.53 ± 0.08 μg.Kung gihiusa sa verapamil, ang g misaka sa 1.35 ± 0.13 μg / g (p <0.001).Alang sa G-Rg3, ang mga resulta nagsunod sa susama nga sumbanan, nga nagpakita nga ang verapamil nga pagtambal nagdugang sa oral bioavailability sa G-Rg3 sa A / J nga mga ilaga.
Ang cell viability assay gigamit sa pagtimbang-timbang sa cytotoxicity sa B (a) P ug G-Rg3 sa hEL cells.Ang cytotoxicity nga gipahinabo sa B (a) P sa mga selula sa hEL gipakita sa Figure 5A, samtang ang nontoxic nga mga kabtangan sa G-Rg3r ug G-Rg3 gipakita sa Mga Figure 5A ug 5B.5B, C. Aron sa pagtimbang-timbang sa cytoprotective nga epekto sa G-Rg3, B (a) P ang co-administered uban sa lain-laing mga konsentrasyon sa G-Rg3r o G-Rg3 ngadto sa hEL cells.Sama sa gipakita sa Figure 5D, ang G-Rg3r sa mga konsentrasyon nga 5 μM, 10 μM, ug 20 μM nagpahiuli sa cell viability sa 58.3%, 79.3%, ug 77.3%, matag usa.Ang susamang mga resulta makita usab sa G-Rg3s nga grupo.Sa diha nga ang mga konsentrasyon sa G-Rg3s mao ang 5 µM, 10 µM ug 20 µM, ang cell viability gipahiuli ngadto sa 58.3%, 72.7% ug 76.7%, matag usa (Figure 5E).).Ang presensya sa BPDE-DNA adducts gisukod gamit ang ELISA kit.Gipakita sa among mga resulta nga ang lebel sa pagdugang sa BPDE-DNA nadugangan sa B (a) P-treated nga grupo kumpara sa control group, apan itandi sa G-Rg3 co-treatment, BPDE-DNA adduct nga lebel sa B (a) P nga grupo B sa gitambalan nga grupo, ang lebel sa pagdugang sa DNA mikunhod pag-ayo.Ang mga resulta sa pagtambal sa B (a) P lamang gipakita sa Figure 5F (1.87 ± 0.33 kumpara sa 3.77 ± 0.42 alang sa G-Rg3r, 1.93 ± 0.48 kumpara sa 3.77 ± 0.42 alang sa G -Rg3s, p <0.001).
Cell viability ug BPDE-DNA adduct formation sa hEL cells nga gitambalan sa G-Rg3 ug B(a)P.(A) Viability sa hEL cells nga gitambalan sa B(a)P.(B) Viability sa hEL cells nga gitambalan sa G-Rg3r.(C) Viability sa hEL cells nga gitambalan sa G-Rg3.(D) Viability sa hEL cells nga gitambalan sa B(a)P ug G-Rg3r.(E) Viability sa hEL cells nga gitambalan sa B(a)P ug G-Rg3.(F) Mga lebel sa pagdugang sa BPDE-DNA sa mga selula sa hEL nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3.Ang datos gipahayag isip mean ± standard deviation sa triplicate determinations.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Ang ekspresyon sa GST nga enzyme nakit-an pagkahuman sa co-treatment nga adunay 10 μM B (a) P ug 10 μM G-Rg3r o G-Rg3s.Gipakita sa among mga resulta nga ang B (a) P nagpugong sa ekspresyon sa GST (59.7 ± 8.2% sa G-Rg3r nga grupo ug 39 ± 4.5% sa G-Rg3s nga grupo), ug ang B (a) P nakig-uban sa G-Rg3r. , o uban sa G-Rg3r, o uban sa G-Rg3r.Ang co-treatment uban sa G-Rg3s gipahiuli ang GST nga ekspresyon.GST nga ekspresyon (103.7 ± 15.5% sa G-Rg3r nga grupo ug 110 ± 11.1% sa G-Rg3s nga grupo, p <0.05 ug p <0.001, matag usa, Fig. 6A, B, ug C).Ang kalihokan sa GST gisusi gamit ang activity assay kit.Ang among mga resulta nagpakita nga ang kombinasyon nga grupo sa pagtambal adunay mas taas nga kalihokan sa GST kumpara sa B (a) P lamang nga grupo (96.3 ± 6.6% batok sa 35.7 ± 7.8% sa G-Rg3r nga grupo batok sa 92.3 ± 6.5 sa G-Rg3r nga grupo ).% vs 35.7 ± 7.8% sa G-Rg3s nga grupo, p <0.001, Figure 6D).
Pagpahayag sa GST ug Nrf2 sa mga selula sa hEL nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3.(A) Detection sa GST nga ekspresyon pinaagi sa Western blotting.(B) Gidaghanon nga ekspresyon sa GST sa mga selula sa hEL nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3r.(C) Gidaghanon nga ekspresyon sa GST sa mga selula sa hEL nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3s.(D) kalihokan sa GST sa mga selula sa hEL nga gitambalan sa B(a)P ug G-Rg3.(E) Detection sa Nrf2 nga ekspresyon pinaagi sa Western blotting.(F) Quantitative nga ekspresyon sa Nrf2 sa mga selula sa hEL nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3r.(G) Quantitative nga ekspresyon sa Nrf2 sa mga selula sa hEL nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3s.Ang datos gipahayag isip mean ± standard deviation sa triplicate determinations.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Aron mapatin-aw ang mga agianan nga nahilambigit sa G-Rg3-mediated nga pagsumpo sa B (a) P-induced tumorigenesis, ang ekspresyon sa Nrf2 gisusi sa Western blotting.Ingon sa gipakita sa Mga Figure 6E, F, G, kon itandi sa kontrol nga grupo, ang lebel lamang sa Nrf2 sa B (a) P nga grupo sa pagtambal mikunhod;bisan pa, kung itandi sa B (a) P nga grupo sa pagtambal, ang B (a) Nrf2 nga lebel sa PG-Rg3 nga grupo nadugangan (106 ± 9.5% alang sa G-Rg3r kumpara sa 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% alang sa G-Rg3r batok sa 41 ± 9.8% alang sa G-Rg3s, p <0.01).
Gikumpirma namo ang preventive nga papel sa Nrf2 pinaagi sa pagpugong sa Nrf2 nga ekspresyon gamit ang piho nga gamay nga interfering RNA (siRNA).Ang Nrf2 knockdown gipamatud-an sa Western blotting (Fig. 7A, B).Sama sa gipakita sa Figures 7C, D, ang co-treatment sa mga selula sa hEL nga adunay B (a) P ug G-Rg3 miresulta sa pagkunhod sa gidaghanon sa BPDE-DNA adducts (1.47 ± 0.21) kumpara sa pagtambal sa B (a) P nag-inusara sa control siRNA nga grupo.) G-Rg3r mao ang 4.13 ± 0.49, G-Rg3s mao ang 1.8 ± 0.32 ug 4.1 ± 0.57, p <0.01).Bisan pa, ang pagpugong nga epekto sa G-Rg3 sa pagporma sa BPDE-DNA giwagtang sa Nrf2 knockdown.Sa siNrf2 nga grupo, walay mahinungdanong kalainan sa BPDE-DNA adduct formation tali sa B (a) P ug G-Rg3 co-treatment ug B (a) P nga pagtambal nga nag-inusara (3.0 ± 0.21 alang sa G-Rg3r vs. 3.56 ± 0.32 ).alang sa G-Rg3r batok sa 3.6 alang sa G-Rg3 batok sa ± 0.45 batok sa 4.0±0.37, p > 0.05).
Epekto sa Nrf2 knockdown sa BPDE-DNA adduct formation sa hEL cells.(A) Ang Nrf2 knockdown gikumpirma sa Western blotting.(B) Pag-ihap sa Nrf2 band intensity.(C) Epekto sa Nrf2 knockdown sa BPDE-DNA adduct nga lebel sa hEL cells nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3r.(D) Epekto sa Nrf2 knockdown sa BPDE-DNA adduct nga lebel sa hEL cells nga gitambalan sa B (a) P ug G-Rg3.Ang datos gipahayag isip mean ± standard deviation sa triplicate determinations.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Kini nga pagtuon nag-evaluate sa preventive effects sa nagkalain-laing red ginseng extracts sa mouse model sa B(a) P-induced lung cancer, ug ang KRGB nga pagtambal nakamenus sa tumor nga palas-anon.Giisip nga ang G-Rg3 adunay labing kataas nga sulud sa kini nga ginseng extract, ang hinungdanon nga papel niini nga ginsenoside sa pagpugong sa tumorigenesis gitun-an.Parehong G-Rg3r ug G-Rg3 (duha ka epimer sa G-Rg3) hinungdanon nga pagkunhod sa palas-anon sa tumor sa usa ka modelo sa mouse sa B (a) P-induced cancer.Ang G-Rg3r ug G-Rg3 adunay mga epekto sa anticancer pinaagi sa pag-aghat sa apoptosis sa mga selula sa tumor21, pagpugong sa pagtubo sa tumor22, pag-aresto sa siklo sa selula23 ug pag-apekto sa angiogenesis24.Gipakita usab ang G-Rg3 nga makapugong sa cellular metastasis25, ug ang abilidad sa G-Rg3 aron mapalambo ang mga epekto sa chemotherapy ug radiotherapy na-dokumento26,27.Gipakita ni Poon et al nga ang pagtambal sa G-Rg3 makapakunhod sa mga epekto sa genotoxic sa B (a) P28.Gipakita niini nga pagtuon ang potensyal sa pagtambal sa G-Rg3 sa pag-target sa mga molekula nga carcinogenic sa kinaiyahan ug pagpugong sa kanser.
Bisan pa sa ilang maayo nga prophylactic nga potensyal, ang dili maayo nga oral bioavailability sa ginsenosides usa ka hagit alang sa klinikal nga paggamit niini nga mga molekula.Ang pharmacokinetic analysis sa oral administration sa ginsenosides sa mga ilaga nagpakita nga ang bioavailability niini ubos pa sa 5%29.Gipakita niini nga mga pagsulay nga pagkahuman sa 20-semana nga panahon sa pagtambal, ang lebel sa Rg5 sa dugo ra ang mikunhod.Bisan kung ang nagpahiping mekanismo sa dili maayo nga bioavailability nagpabilin nga gipatin-aw, ang P-gp gituohan nga nalambigit sa pag-agos sa ginsenosides.Kini nga buhat nagpakita sa unang higayon nga ang administrasyon sa verapamil, usa ka P-gp blocker, nagdugang sa oral bioavailability sa G-Rg3r ug G-Rg3s.Sa ingon, kini nga pagpangita nagsugyot nga ang G-Rg3r ug G-Rg3s molihok isip mga substrate sa P-gp aron makontrol ang efflux niini.
Gipakita sa kini nga trabaho nga ang kombinasyon nga pagtambal sa verapamil nagdugang sa oral bioavailability sa G-Rg3 sa usa ka modelo sa mouse sa kanser sa baga.Kini nga pagpangita gisuportahan sa dugang nga intestinal transcellular transport sa G-Rg3 sa P-gp blockade, sa ingon nagdugang ang pagsuyup niini.Ang mga assay sa Caco2 nga mga selula nagpakita nga ang verapamil nga pagtambal nagpamenos sa efflux sa G-Rg3r ug G-Rg3s samtang nagpauswag sa pagkamatagus sa lamad.Usa ka pagtuon ni Yang et al.Gipakita sa mga pagtuon nga ang pagtambal sa cyclosporine A (laing P-gp blocker) nagdugang sa bioavailability sa ginsenoside Rh2 gikan sa baseline nga kantidad nga 1%20 ngadto sa labaw sa 30%.Ginsenosides compounds K ug Rg1 usab nagpakita sa susama nga mga resulta30,31.Sa diha nga ang verapamil ug cyclosporin A co-administered, ang efflux sa compound K sa Caco-2 mga selula sa kamahinungdanon pagkunhod gikan sa 26.6 ngadto sa ubos pa kay sa 3, samtang ang intracellular nga lebel misaka sa 40-pilo30.Sa presensya sa verapamil, ang lebel sa Rg1 misaka sa mga epithelial cells sa baga sa ilaga, nga nagsugyot sa usa ka papel alang sa P-gp sa ginsenoside efflux, ingon sa gipakita ni Meng et al.31.Bisan pa, ang verapamil wala’y parehas nga epekto sa efflux sa pipila nga mga ginsenosides (sama sa Rg1, F1, Rh1 ug Re), nga nagpakita nga wala sila maapektuhan sa mga substrate sa P-gp, ingon sa gipakita ni Liang et al.32 .Kini nga obserbasyon mahimong may kalabutan sa pagkalambigit sa ubang mga transporter ug alternatibong mga istruktura sa ginsenoside.
Ang mekanismo sa pagpugong nga epekto sa G-Rg3 sa kanser dili klaro.Gipakita sa miaging mga pagtuon nga ang G-Rg3 nagpugong sa kadaot sa DNA ug apoptosis pinaagi sa pagkunhod sa oxidative stress ug panghubag16,33, nga mahimo’g ang nagpahiping mekanismo sa pagpugong sa B (a) P-induced tumorigenesis.Gipakita sa pipila nga mga taho nga ang genotoxicity nga gipahinabo sa B (a) P mahimong mapakunhod pinaagi sa pag-modulate sa phase II nga mga enzyme aron maporma ang BPDE-DNA34.Ang GST usa ka tipikal nga phase II nga enzyme nga nagpugong sa BPDE-DNA adduct formation pinaagi sa pagpasiugda sa pagbugkos sa GSH ngadto sa BPDE, sa ingon makapakunhod sa kadaot sa DNA nga gipahinabo sa B(a)P35.Ang among mga resulta nagpakita nga ang G-Rg3 nga pagtambal nagpamenos sa B(a) P-induced cytotoxicity ug BPDE-DNA adduct formation sa hEL cells ug nagpasig-uli sa GST expression ug activity in vitro.Bisan pa, kini nga mga epekto wala diha sa pagkawala sa Nrf2, nga nagsugyot nga ang G-Rg3 nag-aghat sa mga epekto sa cytoprotective pinaagi sa Nrf2 nga agianan.Ang Nrf2 usa ka mayor nga transcription factor alang sa phase II detoxification enzymes nga nagpasiugda sa clearance sa xenobiotics36.Ang pagpaaktibo sa Nrf2 nga agianan nag-aghat sa cytoprotection ug nagpamenos sa kadaot sa tisyu37.Dugang pa, daghang mga taho ang nagsuporta sa papel sa Nrf2 ingon usa ka suppressor sa tumor sa carcinogenesis38.Gipakita sa among pagtuon nga ang induction sa Nrf2 nga agianan sa G-Rg3 adunay hinungdanon nga papel sa regulasyon sa B (a) P-induced genotoxicity pinaagi sa pagpahinabo sa B (a) P detoxification pinaagi sa pagpaaktibo sa phase II enzymes, sa ingon makapugong sa proseso sa tumorigenesis.
Gipadayag sa among trabaho ang potensyal sa pula nga ginseng sa pagpugong sa B (a) P-induced nga kanser sa baga sa mga ilaga pinaagi sa hinungdanon nga pag-apil sa ginsenoside G-Rg3.Ang dili maayo nga oral bioavailability sa kini nga molekula nakababag sa klinikal nga aplikasyon niini.Bisan pa, kini nga pagtuon nagpakita sa unang higayon nga ang G-Rg3 usa ka substrate sa P-gp, ug ang pagdumala sa usa ka P-gp inhibitor nagdugang sa bioavailability sa G-Rg3 sa vitro ug sa vivo.Ang G-Rg3 nagpamenos sa B (a) P-induced cytotoxicity pinaagi sa pag-regulate sa Nrf2 nga agianan, nga mahimong usa ka potensyal nga mekanismo alang sa preventive function niini.Gipamatud-an sa among pagtuon ang potensyal sa ginsenoside G-Rg3 alang sa pagpugong ug pagtambal sa kanser sa baga.
Ang unom ka semana nga babaye nga A/J nga mga ilaga (20 ± 1 g) ug 7-ka-semana nga laki nga Wistar nga mga ilaga (250 ± 20 g) nakuha gikan sa The Jackson Laboratory (Bar Harbor, USA) ug sa Wuhan Institute of Zoology.Unibersidad (Wuhan, China).Ang Chinese Type Culture Collection Center (Wuhan, China) naghatag kanamo og Caco-2 ug hEL cells.Ang Sigma-Aldrich (St. Louis, USA) maoy tinubdan sa B(a)P ug tricaprine.Ang purified ginsenosides G-Rg3r ug G-Rg3s, dimethyl sulfoxide (DMSO), CellTiter-96 proliferation assay kit (MTS), verapamil, minimal essential medium (MEM), ug fetal bovine serum (FBS) gipalit gikan sa Chengdu Must Bio-Technology .Co., Ltd.(Chengdu, China).Ang QIAamp DNA mini kit ug BPDE-DNA addduct ELISA kit gipalit gikan sa Qiagen (Stanford, CA, USA) ug Cell Biolabs (San Diego, CA, USA).GST activity assay kit ug total protein assay kit (standard BCA method) gipalit gikan sa Solarbio (Beijing, China).Ang tanan nga red ginseng extracts gitipigan sa Mingyu Laboratory 7. Ang Hong Kong Baptist University (Hong Kong, China) ug Korea Cancer Center (Seoul, Korea) mga komersyal nga tinubdan sa CRG extract ug nagkalain-laing red ginseng extracts sa nagkalain-laing Korean nga gigikanan (lakip ang KRGA, KRGB ug KRGC).Ang pula nga ginseng gihimo gikan sa mga gamot sa 6-anyos nga presko nga ginseng.Ang pula nga ginseng extract makuha pinaagi sa paghugas sa ginseng sa tubig sa tulo ka beses, dayon pagkonsentrar sa tubig nga kinuha, ug sa katapusan pagpauga sa ubos nga temperatura aron makakuha og ginseng extract powder.Ang mga antibodies (anti-Nrf2, anti-GST, ug β-actin), horseradish peroxidase-conjugated anti-rabbit immunoglobulin G (IgG), transfection reagent, control siRNA, ug Nrf2 siRNA gipalit gikan sa Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA) .), USA).
Ang mga selula sa Caco2 ug hEL gi-kultura sa 100 mm2 nga mga pinggan sa kultura sa cell nga adunay MEM nga adunay sulud nga 10% FBS sa 37 ° C sa usa ka humidified nga atmospera nga 5% CO2.Aron mahibal-an ang epekto sa mga kondisyon sa pagtambal, ang mga selula sa hEL gilumlum sa lainlaing mga konsentrasyon sa B (a) P ug G-Rg3 sa MEM sa 48 h.Ang mga selyula mahimong dugang tukion o kolektahon aron sa pag-andam sa cell-free extracts.
Ang tanan nga mga eksperimento giaprobahan sa Experimental Animal Ethics Committee sa Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology (Approval No. 2019; Registration No. 4587TH).Ang tanan nga mga eksperimento gihimo subay sa may kalabutan nga mga giya ug regulasyon, ug ang pagtuon gihimo subay sa Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments (ARRIVE) nga mga giya.Ang walo ka semana nga A / J nga mga ilaga una nga intraperitoneally gi-injected sa B (a) P sa tricaprine solution (100 mg / kg, 0.2 ml).Pagkahuman sa usa ka semana, ang mga ilaga random nga gibahin sa mga grupo sa pagkontrol ug lainlaing mga grupo sa pagtambal, 15 nga mga ilaga sa matag grupo, ug gigavaged kausa sa usa ka adlaw.Human sa 20 ka semana nga pagtambal, ang mga mananap gisakripisyo sa CO2 asphyxia.Ang mga baga gikolekta ug giayo sulod sa 24 ka oras.Ang gidaghanon sa mga taphaw nga tumor ug indibidwal nga mga gidak-on sa tumor gi-quantified alang sa matag baga ubos sa usa ka dissecting microscope.Ang mga banabana sa gidaghanon sa tumor (V) gikalkulo gamit ang mosunod nga ekspresyon: V (mm3) = 4/3πr3, diin ang r mao ang diyametro sa tumor.Ang net sum sa tanan nga tumor volume sa baga sa mga ilaga nagrepresentar sa kinatibuk-ang gidaghanon sa tumor, ug ang average nga kinatibuk-ang gidaghanon sa tumor sa matag grupo nagrepresentar sa tumor load.Ang tibuok dugo ug mga sampol sa tinai gikolekta ug gitipigan sa −80°C para sa pagdeterminar sa UPLC-MS/MS.Ang serum gikolekta ug ang usa ka automated chemistry analyzer gigamit sa pag-analisar sa alanine aminotransferase (ALT) ug serum creatinine (Cr) nga lebel aron masusi ang atay ug kidney function.
Ang mga nakolekta nga sample gikuha gikan sa bugnaw nga pagtipig, gitunaw, gitimbang, ug gibutang sa mga tubo sama sa gihulagway sa ibabaw.Niini gidugang ang 0.5 μM phlorizin (internal nga sumbanan) sa 0.8 ml nga solusyon sa methanol.Ang tisyu dayon homogenized gamit ang Tissue-Tearor ug ang homogenate dayon gibalhin ngadto sa 1.5 ml microcentrifuge tube.Ang sagol nga centrifuge sa 15500 rpm sulod sa 15 minutos.Human sa pagkuha sa 1.0 ml sa supernatant, uga uban sa nitrogen.Duha ka gatos ka microliter sa methanol ang gigamit alang sa pagkaayo.Ang dugo gikolekta ug giproseso sa usa ka linya ug gigamit ingon usa ka pakisayran sa tanan nga mga pagsukod.
Ang 24-well Transwell nga mga plato gipugas sa 1.0 × 105 nga Caco-2 nga mga selula matag atabay aron sa pagtimbang-timbang sa potensyal nga pagpalambo sa transportasyon sa G-Rg3 pinaagi sa pagdugang sa verapamil.Human sa 3 ka semana sa kultura, ang mga selula gihugasan sa HBSS ug preincubated sa 37 ° C.Ang 400 μL sa 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s, o usa ka sinagol nga 50 o 100 μM verapamil) gi-injected ngadto sa basolateral o apikal nga bahin sa monolayer, ug 600 μL sa HBSS nga solusyon ang gidugang sa lain. kilid.Pagkolekta ug 100 µl nga medium nga kultura sa gitakdang oras (0, 15, 30, 45, 60, 90 ug 120 ka minuto) ug idugang ang 100 µl sa HBSS aron mahuman kini nga volume.Ang mga sample gitipigan sa −4 ° C hangtod nga makit-an sa UPLC-MS / MS.Ang ekspresyong Papp = dQ/(dT × A × C0) gigamit sa pag-ihap sa dayag nga unidirectional apical ug basolateral permeability ug vice versa (Pa-b ug Pb-a, matag usa);Ang dQ/dT mao ang pagbag-o sa konsentrasyon, ang A (0.6 cm2) mao ang surface area sa monolayer, ug ang C0 mao ang inisyal nga konsentrasyon sa donor.Ang efflux ratio gikalkula isip Pb-a/Pa-b, nga nagrepresentar sa efflux rate sa pagtuon nga tambal.
Ang mga laki nga Wistar nga ilaga gipuasa sulod sa 24 ka oras, nag-inom lamang og tubig, ug gi-anesthetize sa intravenous injection nga 3.5% pentobarbital solution.Ang intubated silicone tube adunay tumoy sa duodenum isip entrada ug ang tumoy sa ileum isip exit.Gamit ug peristaltic pump para ibomba ang inlet gamit ang 10 µM G-Rg3r o G-Rg3s sa isotonic HBSS sa flow rate nga 0.1 ml/min.Ang epekto sa verapamil gisusi pinaagi sa pagdugang sa 50 μM o 100 μM sa compound sa 10 μM G-Rg3r o G-Rg3s.Ang UPLC-MS/MS gihimo sa perfusion extracts nga nakolekta sa time points 60, 90, 120, ug 150 minutos human sa pagsugod sa perfusion.Ang porsyento sa pagsuyup giihap sa pormula % pagsuyup = (1 – Cout/Cin) × 100%;ang konsentrasyon sa G-Rg3 sa outlet ug inlet gipahayag sa Cout ug Cin, matag usa.
Ang mga selula sa hEL gipugas sa 96-well nga mga plato sa densidad nga 1 × 104 nga mga selula matag atabay ug gitambalan sa B (a) P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) o G-Rg3 nga natunaw sa DMSO .Ang mga tambal dayon lasaw sa medium nga kultura sa lainlaing mga konsentrasyon (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) sa 48 ka oras.Gamit ang usa ka komersyal nga magamit nga MTS assay kit, ang mga cell gipailalom sa usa ka standard nga protocol ug dayon gisukod gamit ang usa ka microplate reader sa 490 nm.Ang lebel sa cell viability sa mga grupo nga gitambalan sa B (a) P (10 μM) ug G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) gisusi sumala sa pamaagi sa ibabaw ug itandi sa wala matambalan nga grupo.
Ang mga selula sa hEL gipugas sa 6-well nga mga plato sa densidad nga 1 × 105 nga mga selula / atabay ug gitambalan nga adunay 10 μMB (a) P sa presensya o pagkawala sa 10 μM G-Rg3.Human sa 48 ka oras nga pagtambal, ang DNA gikuha gikan sa mga selula sa hEL gamit ang QIAamp DNA Mini Kit sumala sa protocol sa tiggama.Ang pagporma sa BPDE-DNA adducts nakita gamit ang BPDE-DNA addduct ELISA kit.Ang mga paryente nga lebel sa BPDE-DNA adduct gisukod gamit ang microplate reader pinaagi sa pagsukod sa absorbance sa 450 nm.
Ang mga selula sa hEL gipugas sa 96-well plate sa density nga 1 × 104 nga mga cell matag atabay ug gitambalan nga adunay 10 μMB (a) P kung wala o presensya sa 10 μM G-Rg3 sa 48 h.Ang kalihokan sa GST gisukod gamit ang komersyal nga GST activity assay kit sumala sa protocol sa tiggama.Relative GST activation gisukod pinaagi sa absorbance sa 450 nm gamit ang microplate reader.
Ang mga selula sa hEL gihugasan sa bugnaw nga yelo nga PBS ug dayon gi-lysed gamit ang radioimmunoprecipitation assay buffer nga adunay sulod nga protease inhibitors ug phosphatase inhibitors.Human sa quantification sa protina gamit ang total protein assay kit, ang 30 μg nga protina sa matag sample gibulag sa 12% SDS-PAGE ug gibalhin ngadto sa PVDF membrane pinaagi sa electrophoresis.Ang mga lamad gibabagan sa 5% nga skim nga gatas ug gilumlom sa panguna nga mga antibodies sa tibuok gabii sa 4 ° C.Human sa paglumlum sa horseradish peroxidase-conjugated secondary antibodies, gipalambo nga chemiluminescence reagents gidugang aron mahanduraw ang nagbugkos nga signal.Ang intensity sa matag protina band gi-quantified gamit ang ImageJ software.
Ang GraphPad Prism 7.0 software gigamit sa pag-analisar sa tanang datos, nga gipahayag isip mean ± standard deviation.Ang kalainan tali sa mga grupo sa pagtambal gisusi gamit ang Student's t test o one-way analysis sa variance, nga adunay P value <0.05 nga nagpakita sa statistical significance.
Ang tanan nga datos nga nakuha o gisusi sa panahon sa kini nga pagtuon gilakip sa kini nga gipatik nga artikulo ug mga file sa dugang nga impormasyon.
Torre, LA, Siegel, RL ug Jemal, A. estadistika sa kanser sa baga.adverbio.Na-expire na.tambal.biology.893, 1–19 (2016).
Hecht, S. Tobacco carcinogens, ilang mga biomarker ug kanser nga gipahinabo sa tabako.Si Nat.Cancer chaplain.3, 733–744 (2003).
Phillips, DH ug Venitt, S. DNA ug protina nga pagdugang sa mga tisyu sa tawo nga resulta sa pagkaladlad sa aso sa tabako.internasyonalidad.J. Kanser.131, 2733–2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA ug Yu M. Epekto sa Houttuynia cordata ug silibinin sa benzo (a) pyrene-induced lung tumorigenesis sa A / J nga mga ilaga.Kanser 7, 1053–1057 (2005).
Tang, W. ug uban pa.Anticancer natural nga produkto nga nahimulag gikan sa Chinese medicinal materials.apapangig.tambal.6, 27 (2011).
Yang, Y. et al.Ang pagka-epektibo sa polyphenon E, pula nga ginseng, ug rapamycin sa benzo (a) pyrene-induced lung tumorigenesis sa A / J nga mga ilaga.Kanser 8, 52–58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS ug Yuan, KS Red, pagkalambigit sa therapy sa kanser.apapangig.J. Nutt.tambal.14, 7–16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS ug Gao, L. Ginsenosides sa mga gamot ug dahon sa American ginseng.J. Agric.Kemistriya sa pagkaon.44, 717–720 (1996).
Attele AS, Wu JA ug Yuan KS Pharmacology sa ginseng: daghang mga sangkap ug daghang mga epekto.biochemistry.pharmacology.58, 1685–1693 (1999).
Panahon sa pag-post: Sep-17-2023