Éifeacht choisctheach de phúdar saponin dearg ginseng Rg3 Ginsenoside RG3 ar siadaí scamhóg spreagtha benzopyrene

Go raibh maith agat as cuairt a thabhairt ar Nature.com.Tá tacaíocht teoranta CSS ag an leagan den bhrabhsálaí atá in úsáid agat.Chun na torthaí is fearr a fháil, molaimid leagan níos nuaí de do bhrabhsálaí a úsáid (nó mód comhoiriúnachta a mhúchadh in Internet Explorer).Idir an dá linn, chun tacaíocht leanúnach a chinntiú, táimid ag taispeáint an tsuímh gan stíliú nó JavaScript.
Tá ginseng dearg in úsáid i leigheas traidisiúnta na hÁise leis na céadta bliain.Sa staidéar seo, rinneamar measúnú ar chumas ceithre chineál ginseng dearg (ginseng dearg na Síne, ginseng dearg na Cóiré A, ginseng dearg na Cóiré, agus ginseng dearg na Cóiré C) a fhástar i réigiúin éagsúla chun bac a chur ar fhoirmiú agus ar fhás scamhóg spreagtha carcanaigine. siadaí.Rinneadh tástáil benzo(a)piréin (B(a)P) ar lucha A/J, agus fuarthas amach gurb é ginseng dearg B na Cóiré an ceann is éifeachtaí chun ualach siadaí a laghdú i measc na gceithre chineál ginseng dearga.Ina theannta sin, rinneamar anailís ar inneachar ginsenosides éagsúla (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 agus Rg5) i gceithre sliocht ginseng dearg agus fuarthas amach go raibh ginseng dearg B na Cóiré. na leibhéil is airde de ginsenoside Rg3 (G-Rg3), rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh ról tábhachtach a bheith ag G-Rg3 ina éifeachtúlacht theiripeach.Léiríonn an obair seo go bhfuil bith-infhaighteacht réasúnta íseal ag G-Rg3.Mar sin féin, nuair a comhriaraíodh G-Rg3 leis an inhibitor P-gp verapamil, laghdaíodh eisreabhadh G-Rg3 isteach i gcealla Caco-2, méadaíodh ráta ionsú intestinal G-Rg3 i múnla francach, agus G-Rg3 méadaíodh.I gcealla Caco-2, laghdaítear eis-sreabhadh Rg3, agus laghdaítear leibhéal tiúchan Rg3.Méadaítear G-Rg3 sa stéig agus sa plasma, agus feabhsaítear a chumas siadaí a chosc freisin i múnla francach de tumorigenesis spreagtha B(a)P.Fuaireamar amach freisin gur laghdaigh G-Rg3 cíteatocsaineacht B(a) P-spreagtha agus foirmiú adduct DNA i gcealla scamhóg daonna, agus gur athchóirigh sé léiriú agus gníomhaíocht einsímí céim II tríd an gcosán Nrf2, a d’fhéadfadh a bheith bainteach leis an meicníocht gníomhaíochta féideartha. de G inchoisc -Rg3..Maidir leis an tharla siadaí scamhóg.Léiríonn ár staidéar go bhféadfadh ról tábhachtach a bheith ag G-Rg3 maidir le díriú ar thumaí scamhóg i múnlaí luiche.Cuirtear feabhas ar bhith-infhaighteacht béil an ginsenoside seo trí dhíriú ar P-glycoprotein, rud a ligeann don mhóilín éifeachtaí frith-ailse a chur i bhfeidhm.
Is é an cineál ailse scamhóg is coitianta ná ailse scamhóg neamh-bheag cille (NSCLC), atá ar cheann de na príomhchúiseanna le básanna ailse sa tSín agus i Meiriceá Thuaidh1,2.Is é an príomhfhachtóir a mhéadaíonn an baol ailse scamhóg neamh-bheag cille a fhorbairt ná caitheamh tobac.Tá níos mó ná 60 carcanaiginí i ndeatach toitíní, lena n-áirítear beinsó(a)piréin (B(a)P), nítreasaimíní, agus iseatóip radaighníomhacha ó mheath an radóin.3 Hidreacarbóin aramatacha iltimthriallacha B(a)P is mó is cúis leis an tocsaineacht i dtoitíní. deatach.Nuair a nochtar do B(a)P, tiontaíonn cíteochrome P450 é go B(a)P-7,8-dé-hidróil-9,10-epocsaíd (BPDE), a imoibríonn le DNA chun aduchtán BPDE-DNA 4 a fhoirmiú. go gcothaíonn adóg tumaí giniúna scamhóg i lucha a bhfuil céim siadaí agus histeapaiteolaíocht cosúil le siadaí scamhóg daonna5.Déanann an ghné seo an tsamhail B(a)P-spreagtha d'ailse scamhóg mar chóras oiriúnach chun comhdhúile a bhfuil airíonna frithailse a d'fhéadfadh a bheith acu a mheas.
Straitéis amháin a d’fhéadfadh a bheith ann chun forbairt ailse scamhóg a chosc i ngrúpaí ardriosca, go háirithe daoine a chaitheann tobac, is ea úsáid a bhaint as oibreáin chemo-choisctheacha chun forbairt loit neoplaisteacha intraepithelial a chosc agus a n-dul chun cinn ina dhiaidh sin chuig urchóideacht a chosc.Léiríonn staidéir ar ainmhithe go bhfuil oibreáin chemochoisctheacha éagsúla éifeachtach6.Leag ár dtuarascáil roimhe seo7 béim ar na héifeachtaí coisctheacha maithe a bhíonn ag ginseng dearg ar ailse scamhóg.Baineadh úsáid as an luibh seo leis na céadta bliain i leigheas traidisiúnta na hÁise chun saol agus sláinte a shíneadh, agus tá sé doiciméadaithe go bhfuil éifeachtaí antitumor aige8.
Is é fachtóir gníomhach ginseng ná ginsenoside, a úsáidtear mar mharcóir ilchodach chun cáilíocht sleachta ginseng a mheas.Is gnách go mbíonn úsáid roinnt ginsenosides i gceist le hanailís chainníochtúil ar eastóscáin ginseng amh, lena n-áirítear RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5, agus Rc9,10.Is beag úsáid chliniciúil atá ag ginsenosides mar gheall ar a mbith-infhaighteacht ó bhéal an-lag11.Cé nach bhfuil an mheicníocht maidir leis an mbith-infhaighteacht bhocht seo soiléir, b'fhéidir gurb é an sruth ginsenosides de bharr P-glycoprotein (P-gp)12 is cúis leis.Tá P-gp ar cheann de na hiompróirí eisilte is tábhachtaí sa supertheaghlach iompróra caiséad ATP-ceangailteach, a úsáideann fuinneamh hidrealú ATP chun substaintí intracellular a scaoileadh isteach sa timpeallacht sheachtrach.De ghnáth déantar iompróirí P-gp a dháileadh go forleathan i mbacainn an stéig, na nduán, an ae agus na fola-inchinn13.Tá ról ríthábhachtach ag P-gp in ionsú intestinal, agus méadaíonn cosc ​​P-gp ionsú béil agus infhaighteacht roinnt drugaí frith-ailse12,14.Samplaí de choscóirí a úsáideadh roimhe seo sa litríocht ná verapamil agus cyclosporine A15.Baineann an obair seo le córas luiche a bhunú chun staidéar a dhéanamh ar ailse scamhóige B(a)P-spreagtha chun measúnú a dhéanamh ar chumas eastóscáin éagsúla ginseng dearga ón tSín agus ón gCóiré dul i bhfeidhm ar urchóideacht.Rinneadh anailís ar na sleachta ina n-aonar chun ginsenosides sonracha a d'fhéadfadh tionchar a bheith acu ar charcinogenesis a aithint.Baineadh úsáid as Verapamil ansin chun díriú ar P-gp agus chun bith-infhaighteacht bhéil agus éifeachtúlacht theiripeach ginsenosides a dhíríonn ar ailse a fheabhsú.
Tá an mheicníocht trína gcuireann ginseng saponins éifeachtaí teiripeacha ar charcanaigineas i bhfeidhm fós doiléir.Tá sé léirithe ag taighde gur féidir le ginsenosides éagsúla damáiste DNA de bharr carcanaiginí a laghdú trí strus ocsaídiúcháin a laghdú agus einsímí díthocsainithe céim II a ghníomhachtú, rud a chosc damáiste cille.Is einsím tipiciúil chéim II é Glutathione S-transferase (GST) a theastaíonn chun damáiste DNA de bharr carcanaiginí a laghdú17.Is fachtóir trascríobh tábhachtach é erythroid 2-ghaolmhar 2 (Nrf2) a rialaíonn homeostasis redox agus a ghníomhaíonn léiriú einsímí céim II agus freagraí frithocsaídeacha cytoprotective18.Scrúdaigh ár staidéar freisin éifeachtaí ginsenosides sainaitheanta ar laghdú cíteatocsaineacht B(a) P-spreagtha agus foirmiú aiseach BPDE-DNA, chomh maith le heinsímí chéim II a aslú trí mhodhnú an chonair Nrf2 i ngnáthchealla scamhóg.
Tá bunú samhail luiche den ailse spreagtha B(a)P ag teacht leis an obair a rinneadh roimhe seo5.Taispeánann Figiúr 1A dearadh turgnamhach cóireáil 20 seachtaine ar mhúnla ailse luiche arna tharlú ag B(a)P, uisce (rialú), sliocht ginseng dearg na Síne (CRG), sliocht ginseng dearg na Cóiré A (KRGA), agus dearg na Cóiré. ginseng.Sliocht B (KRGB) agus Sliocht Ginseng Dearg na Cóiré C (KRGC).Tar éis 20 seachtaine de chóireáil ginseng dearg, íobairt asphyxiation CO2 lucha.Taispeánann Figiúr 1B tumaí scamhóg macrascópacha in ainmhithe atá cóireáilte le cineálacha éagsúla ginseng dearg, agus léiríonn Fíor 1C micreagraf éadrom ionadaíoch de shampla meall.Bhí ualach meall na n-ainmhithe cóireáilte KRGB (1.5 ± 0.35) níos ísle ná ualach na n-ainmhithe rialaithe (0.82 ± 0.2, P < 0.05), mar a thaispeántar i bhFíor 1D.Ba é meánchéim an chosc ar ualach siadaí ná 45%.Níor léirigh sleachta ginseng dearg eile a ndearnadh tástáil orthu athruithe suntasacha den sórt sin ar ualach meall (P> 0.05).Níor tugadh faoi deara aon fho-iarmhairtí soiléire i múnla na luiche le linn 20 seachtain de chóireáil ginseng dearg, lena n-áirítear gan aon athrú ar mheáchan coirp (sonraí nach bhfuil léirithe) agus gan aon tocsaineacht ae nó duáin (Fíor 1E,F).
Déileálann sliocht ginseng dearg le forbairt siadaí scamhóg i lucha A/J.(A) Dearadh turgnamhach.(B) Tumaí móra scamhóg i múnla luiche.Tumors in iúl ag saigheada.a: Grúpa ginseng dearg na Síne.b: grúpa A de ginseng dearg na Cóiré.c: Grúpa ginseng dearg na Cóiré B. d: Grúpa ginseng dearg na Cóiré C. d: Grúpa rialaithe.(C) Micreagraf éadrom a thaispeánann meall scamhóg.Formhéadú: 100. b: 400. (D) Ualach meall sa ghrúpa sliocht ginseng dearg.(E) Leibhéil plasma na heinsíme ae ALT.(F) Leibhéil plasma na heinsíme duánach Cr.Sloinntear sonraí mar mheán ± diall caighdeánach.*P <0.05.
Rinneadh anailís ar na sleachta ginseng dearga a aithníodh sa staidéar seo ag mais-speictriméadracht tandem crómatagrafaíocht leachta ultra-fheidhmíochta (UPLC-MS/MS) chun na ginsenosides seo a leanas a chainníochtú: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3 , Rh2, F1, Rk1 agus Rg5.Cuireadh síos i dtuarascáil roimhe seo ar na coinníollacha UPLC agus MS a úsáideadh chun na hanailítí a thomhas19.Léirítear crómatagram UPLC-MS/MS de cheithre eastóscán ginseng dearga i bhFíor 2A.Bhí difríochtaí suntasacha san ábhar ginsenoside iomlán, leis an ábhar ginsenoside iomlán is airde i CRG (590.27 ± 41.28 μmol/L) (Fíor 2B).Agus ginsenosides aonair á measúnú (Fíor 2C), léirigh KRGB an leibhéal is airde G-Rg3 i gcomparáid le ginsenosides eile (58.33 ± 3.81 μmol/L do G-Rg3s agus 41.56 ± 2.88 μmol/L le haghaidh G -Rg3r).cineál ginseng dearg (P < 0.001).Tarlaíonn G-Rg3 mar péire steiré-isiméirí G-Rg3r agus G-Rg3s, atá difriúil i suíomh an ghrúpa hiodrocsaile ag carbóin 20 (Fíor 2 D).Tugann na torthaí le fios go bhféadfadh poitéinseal frith-ailse tábhachtach a bheith ag G-Rg3r nó G-Rg3 i múnla luiche ailse B(a)P-spreagtha.
Ábhar ginsenosides i sleachta ginseng dearg éagsúla.(A) UPLC-MS/MS crómatagram de cheithre eastóscán ginseng dearg.(B) Meastachán ar ábhar ginsenoside iomlán sna sleachta sonraithe.(C) Ginsenosides aonair a bhrath i eastóscáin lipéadaithe.(D) Struchtúir steiré-isiméirí ginsenoside G-Rg3r agus G-Rg3s.Cuirtear sonraí in iúl mar mheán ± diall caighdeánach na gcinntí faoi thrí.***P <0.001.
Éilíonn staidéar UPLC-MS/MS cainníochtú ginsenosides i samplaí intestinal agus fola tar éis 20 seachtain de chóireáil.Léirigh cóireáil le KRGB nach raibh ach 0.0063 ± 0.0005 μg/ml Rg5 san fhuil.Níor aimsíodh aon ginsenosides a bhí fágtha, rud a léiríonn droch-bhith-infhaighteacht béil agus dá bhrí sin nochtadh laghdaithe do na ginsenosides sin.
Tá líne cille adenocarcinoma an colon Caco-2 cosúil go moirfeolaíoch agus go bithcheimiceach le cealla epithelial intestinal daonna, rud a léiríonn a fóntais maidir le hiompar enterocyte ar fud an bhacainn epithelial intestinal a mheasúnú.Bhí an anailís seo bunaithe ar staidéar níos luaithe 20 .Taispeánann Fíoracha 3A,B,C,D,E,F íomhánna ionadaíocha d'iompar trascheallach G-Rg3r agus G-Rg3 ag baint úsáide as samhail monashraith Caco-2.Bhí iompar trascheallach G-Rg3r nó G-Rg3 trasna monaraithe Caco-2 ón taobh basothaobhach go taobh apical (Pb-a) i bhfad níos airde ná ón taobh apical go basolateral (Pa-b).I gcás G-Rg3r, ba é an meánluach Pa-b ná 0.38 ± 0.06, a mhéadaigh go 0.73 ± 0.06 tar éis cóireála le 50 μmol/L verapamil agus go 1.14 ± 0.09 tar éis cóireála le 100 μmol/L verapamil (100,000) agus faoi ​​seach;3A).Lean tuairimí le haghaidh G-Rg3 patrún comhchosúil (Fíor 3 B), agus léirigh na torthaí gur chuir cóireáil verapamil feabhas ar iompar G-Rg3r agus G-Rg3.Mar thoradh ar chóireáil verapamil freisin tháinig laghdú suntasach ar mheánchóimheasa eisleachta Pb-a agus G-Rg3r agus G-Rg3s (Fíor 3C, D,E,F), rud a thugann le fios go laghdaíonn cóireáil verapamil ábhar ginsenoside i gcealla eisilte Caco-2..
Iompar trascheallach G-Rg3 i monaiteoirí Caco-2 agus ionsú intestinal i measúnacht perfusion francach.(A) Luach Pa-b an ghrúpa G-Rg3r i monolayer Caco-2.(B) Pa-b luach na ngrúpaí G-Rg3s i monalayer Caco-2.(C) Pb luach an ghrúpa G-Rg3r i monalayer Caco-2.(D) Pb luach na ngrúpaí G-Rg3s i monalayer Caco-2.(E) Cóimheas toraidh de ghrúpaí G-Rg3r i monaiteoir Caco-2.(F) Cóimheas toraidh de ghrúpaí G-Rg3 i monaiteoir Caco-2.(G) Céatadán d’ionsú intestinal G-Rg3r i measúnacht perfusion i bhfrancaigh.(H) Céatadán d’ionsú intestinal G-Rg3 i measúnacht perfusion i bhfrancaigh.Rinneadh comparáid idir tréscaoilteacht agus ionsú gan verapamil a chur leis.Cuirtear sonraí in iúl mar mheán ± diall caighdeánach cúig thurgnamh neamhspleácha.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Ag teacht le hobair níos luaithe20, rinneadh perfusion intestinal orthotopic de francaigh chun a chinneadh an bhfuil méadú ar ionsú G-Rg3 sa stéig tar éis cóireála verapamil.Léiríonn Fíoracha 3G,H measúnuithe perfusion ionadaíocha chun an céatadán d’ionsú intestinal G-Rg3r agus G-Rg3 i bhfrancaigh samhail ailse a mheas le linn na dtréimhsí ama thuas.Mhéadaigh an céatadán tosaigh d’tógáil lag G-Rg3r de thart ar 10% go dtí níos mó ná 20% tar éis cóireála le 50 μM verapamil agus go dtí níos mó ná 25% tar éis cóireála le 100 μM verapamil.Mar an gcéanna, léirigh G-Rg3, a raibh glacadh tosaigh de 10% aige, buaic de níos mó ná 20% tar éis cóireála le 50 μM verapamil agus beagnach 30% tar éis cóireála le 100 μM verapamil, rud a thugann le tuiscint go gcuirtear feabhas ar chosc ar P-gp ag verapamil. G-ionsú intestinal Rg3 i múnla luiche ailse scamhóg.
De réir an mhodha thuas, roinneadh lucha múnla ailse de chuid B(a)P-spreagtha go randamach i sé ghrúpa, mar a thaispeántar i bhFíor 4A.Níor tugadh faoi deara aon mheáchain caillteanas suntasach nó comharthaí cliniciúla tocsaineachta sa ghrúpa cóireála G-Rg3 i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (sonraí nach bhfuil léirithe).Tar éis 20 seachtaine de chóireáil, bailíodh na scamhóga de gach luch.Taispeánann Fíor 4B tumaí scamhóg macrascópacha i lucha sna grúpaí cóireála thuas, agus léiríonn Fíor 4C micreagraf éadrom ionadaíoch de mheall ionadaíoch.Maidir leis an ualach meall i ngach grúpa (Fíor 4D), ba iad na luachanna do lucha a ndearnadh cóireáil orthu le G-Rg3r agus G-Rg3s ná 0.75 ± 0.29 mm3 agus 0.81 ± 0.30 mm3, faoi seach, agus na luachanna do lucha G cóireáilte. le -Rg3s bhí 1.63 faoi seach ±0.40 mm3.lucha rialaithe (p < 0.001), rud a léiríonn gur laghdaigh cóireáil G-Rg3 ualach siadaí i lucha.Chuir riarachán verapamil tuilleadh leis an laghdú seo: laghdaigh luachanna i lucha verapamil + G-Rg3r ó 0.75 ± 0.29 mm3 go 0.33 ± 0.25 mm3 (p < 0.01), agus tháinig laghdú ar luachanna verapamil + ó 0.81 ± 0.30 mm.2 go ± 0.30 mm 3. mm3 i lucha cóireáilte G. -Rg3s (p < 0.05), rud a thugann le fios go bhféadfadh verapamil éifeacht coisctheach G-Rg3 ar tumorigenesis a fheabhsú.Níor léirigh an t-ualach meall aon difríochtaí suntasacha idir an grúpa rialaithe agus an grúpa verapamil, an grúpa G-Rg3r agus an grúpa G-Rg3s, agus an grúpa verapamil + G-Rg3r agus an grúpa verapamil + G-Rg3s.Ina theannta sin, ní raibh aon tocsaineachtaí suntasacha ae nó duáin bainteach leis na cóireálacha measúnaithe (Fíor 4E, F).
Ualach meall tar éis cóireála G-Rg3 agus plasma nó leibhéil G-Rg3r agus G-Rg3 intestinal sna grúpaí sonraithe.(A) Dearadh turgnamhach.(B) Siadaí macrascópacha i múnla luiche.Tumors in iúl ag saigheada.a: G-Rg3r.b: G-Rg3s.c: G-Rg3r i gcomhcheangal le verapamil.d: G-Rg3 i gcomhcheangal le verapamil.d: Verapamil.e: rialú.(C) Micreagraf optúil an meall ag formhéadú.Freagra: 100x.b: 400X.(D) Éifeacht cóireála G-Rg3 + verapamil ar ualach siadaí i lucha A/J.(E) Leibhéil plasma na heinsíme ae ALT.(F) Leibhéil plasma na heinsíme duánach Cr.(G) Leibhéil plasma de G-Rg3r nó G-Rg3 de na grúpaí sonraithe.(H) Leibhéil G-Rg3r nó G-Rg3 i intestines na ngrúpaí sonraithe.Sloinntear sonraí mar mheán ± diall caighdeánach na gcinntí faoi thrí.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Rinne UPLC-MS/MS measúnú ar leibhéil G-Rg3 i lucha samhail ailse B(a)P-spreagtha ag UPLC-MS/MS tar éis tréimhse cóireála 20 seachtaine de réir an mhodha a bhfuil cur síos air sa rannán Modhanna.Léiríonn figiúirí 4G agus H leibhéil plasma agus intestinal G-Rg3, faoi seach.Bhí leibhéil plasma G-Rg3r 0.44 ± 0.32 μmol/L agus mhéadaigh siad go 1.17 ± 0.47 μmol/L le riaradh comhchéimneach verapamil (p <0.001), agus bhí leibhéil G-Rg3r intestinal 0.53 ± 0.08.Nuair a bhí sé in éineacht le verapamil, mhéadaigh g go 1.35 ± 0.13 μg/g (p < 0.001).Maidir le G-Rg3, lean na torthaí patrún comhchosúil, rud a léirigh gur mhéadaigh cóireáil verapamil bith-infhaighteacht béil G-Rg3 i lucha A/J.
Baineadh úsáid as measúnacht inmharthanachta cille chun cíteatocsaineacht B(a)P agus G-Rg3 ar chealla hEL a mheas.Léirítear an cíteatocsaineacht a tharlódh B(a)P i gcealla hEL i bhFíor 5A, agus léirítear airíonna neamhthocsaineacha G-Rg3r agus G-Rg3 i bhFíoracha 5A agus 5B.5B, C. Chun éifeacht cíteachosanta G-Rg3 a mheas, rinneadh B(a)P a chomhriar le tiúchain éagsúla G-Rg3r nó G-Rg3 i gcealla hEL.Mar a thaispeántar i bhFíor 5D, rinne G-Rg3r ag tiúchan de 5 μM, 10 μM, agus 20 μM inmharthanacht cille a athchóiriú go 58.3%, 79.3%, agus 77.3%, faoi seach.Is féidir torthaí comhchosúla a fheiceáil freisin sa ghrúpa G-Rg3s.Nuair a bhí na comhchruinnithe G-Rg3s 5 µM, 10 µM agus 20 µM, athchóiríodh inmharthanacht na gceall go 58.3%, 72.7% agus 76.7%, faoi seach (Fíor 5E).).Tomhaiseadh láithreacht aschuir BPDE-DNA ag baint úsáide as trealamh ELISA.Thaispeáin ár dtorthaí gur méadaíodh leibhéil adduct BPDE-DNA sa ghrúpa cóireáilte B(a)P i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, ach i gcomparáid le comhchóireáil G-Rg3, leibhéil adduct BPDE-DNA sa ghrúpa B(a)P. B sa ghrúpa cóireáilte, laghdaíodh go suntasach leibhéil adídí DNA.Léirítear torthaí na cóireála le B(a)P amháin i bhFíor 5F (1.87 ± 0.33 vs. 3.77 ± 0.42 do G-Rg3r, 1.93 ± 0.48 vs. 3.77 ± 0.42 do G -Rg3s, p < 0.001).
Inmharthanacht cille agus foirmiú adduct BPDE-DNA i gcealla hEL cóireáilte le G-Rg3 agus B(a)P.(A) Inmharthanacht na gceall HEL cóireáilte le B(a)P.(B) Inmharthanacht na gceall HEL cóireáilte le G-Rg3r.(C) Inmharthanacht na gceall HEL cóireáilte le G-Rg3.(D) Inmharthanacht na gceall HEL cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3r.(E) Inmharthanacht na gceall HEL cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3.(F) Leibhéil BPDE-DNA adduct i gcealla hEL cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3.Cuirtear sonraí in iúl mar mheán ± diall caighdeánach na gcinntí faoi thrí.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Braitheadh ​​abairt einsím GST tar éis comhchóireála le 10 μM B(a)P agus 10 μM G-Rg3r nó G-Rg3s.Léirigh ár dtorthaí gur chuir B(a)P slonn GST faoi chois (59.7 ± 8.2% sa ghrúpa G-Rg3r agus 39 ± 4.5% sa ghrúpa G-Rg3s), agus bhain B(a)P le ceachtar acu le G-Rg3r , nó le G-Rg3r, nó le G-Rg3r.Athchóirigh comhchóireáil le G-Rg3s slonn GST.Sloinn GST (103.7 ± 15.5% sa ghrúpa G-Rg3r agus 110 ± 11.1% sa ghrúpa G-Rg3s, p < 0.05 agus p < 0.001, faoi seach, Fíor 6A, B, agus C).Rinneadh measúnú ar ghníomhaíocht GST ag baint úsáide as trealamh measúnaithe gníomhaíochta.Léirigh ár dtorthaí go raibh gníomhaíocht GST níos airde ag an ngrúpa cóireála teaglaim i gcomparáid leis an ngrúpa B(a)P amháin (96.3 ± 6.6% vs. 35.7 ± 7.8% sa ghrúpa G-Rg3r vs. 92.3 ± 6.5 sa ghrúpa G-Rg3r ).% vs 35.7 ± 7.8% sa ghrúpa G-Rg3s, p < 0.001, Fíor 6D).
Sloinneadh GST agus Nrf2 i gcealla hEL cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3.(A) Léiriú GST a bhrath trí bhlotáil an Iarthair.(B) Slonn cainníochtúil GST i gcealla hEL atá cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3r.(C) Slonn cainníochtúil GST i gcealla hEL atá cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3s.(D) Gníomhaíocht GST i gcealla HEL atá cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3.(E) Sloinn Nrf2 a bhrath trí bhlotáil an Iarthair.(F) Sloinn chainníochtúil Nrf2 i gcealla hEL cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3r.(G) Slonn cainníochtúil Nrf2 i gcealla hEL atá cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3s.Cuirtear sonraí in iúl mar mheán ± diall caighdeánach na gcinntí faoi thrí.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Chun na conairí a bhaineann le cosc ​​​​a chur ar tumorigenesis spreagtha B(a) P-spreagtha faoi chois G-Rg3 a shoiléiriú, rinneadh measúnú ar léiriú Nrf2 le blotting an Iarthair.Mar a léirítear i bhFíoracha 6E,F,G, i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, níor laghdaíodh ach an leibhéal Nrf2 sa ghrúpa cóireála B(a)P;áfach, i gcomparáid leis an ngrúpa cóireála B(a)P, méadaíodh leibhéil B(a) Nrf2 sa ghrúpa PG-Rg3 (106 ± 9.5% do G-Rg3r vs. 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% do G-Rg3r vs. 41 ± 9.8% do G-Rg3s, p < 0.01).
Dhearbhaíomar ról coisctheach Nrf2 trí léiriú Nrf2 a shochtadh ag baint úsáide as RNA cur isteach beag sonrach (siRNA).Deimhníodh cnag síos Nrf2 le blotáil an Iarthair (Fíor 7A,B).Mar a léirítear i bhFíoracha 7C,D, tháinig laghdú ar líon na n-adducts BPDE-DNA (1.47 ± 0.21) i gcomparáid le cóireáil le B(a)P mar thoradh ar chomhchóireáil cealla hEL le B(a)P agus G-Rg3 ina n-aonar sa ghrúpa siRNA rialaithe.) Bhí G-Rg3r 4.13 ± 0.49, bhí G-Rg3s 1.8 ± 0.32 agus 4.1 ± 0.57, p < 0.01).Mar sin féin, cuireadh deireadh le héifeacht coisctheach G-Rg3 ar fhoirmiú BPDE-DNA le cnag síos Nrf2.Sa ghrúpa siNrf2, ní raibh aon difríocht shuntasach i bhfoirmiú aduct BPDE-DNA idir cóireáil B(a)P agus G-Rg3 agus cóireáil B(a)P amháin (3.0 ± 0.21 do G-Rg3r vs. 3.56 ± 0.32 ).le haghaidh G-Rg3r i gcoinne 3.6 le haghaidh G-Rg3s i gcoinne ±0.45 i gcoinne 4.0±0.37, p > 0.05).
Éifeacht cniogbheartaíochta Nrf2 ar fhoirmiú adduct BPDE-DNA i gcealla hEL.(A) Deimhníodh cnagadh Nrf2 le blotáil an Iarthair.(B) Cainníochtú déine banna Nrf2.(C) An éifeacht atá ag titim Nrf2 ar leibhéil adduct BPDE-DNA i gcealla hEL cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3r.(D) Tionchar cniotála Nrf2 ar leibhéil adduct BPDE-DNA i gcealla hEL cóireáilte le B(a)P agus G-Rg3.Cuirtear sonraí in iúl mar mheán ± diall caighdeánach na gcinntí faoi thrí.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Rinne an staidéar seo measúnú ar éifeachtaí coisctheacha sleachta ginseng dearga éagsúla ar mhúnla luiche d’ailse scamhóg spreagtha B(a)P, agus laghdaigh cóireáil KRGB ualach siadaí go suntasach.Ag cur san áireamh go bhfuil an t-ábhar is airde ag G-Rg3 sa sliocht ginseng seo, rinneadh staidéar ar ról tábhachtach an ginsenoside seo maidir le tumorigenesis a chosc.Laghdaigh G-Rg3r agus G-Rg3 araon (dhá eipiméir de G-Rg3) ualach siadaí go suntasach i múnla luiche d’ailse spreagtha B(a)P.Cuireann G-Rg3r agus G-Rg3 éifeachtaí frith-ailse i bhfeidhm trí apoptosis na gceall meall a aslú21, ag cur bac ar fhás siadaí22, ag gabháil do thimthriall na gceall23 agus ag cur isteach ar angiogenesis24.Tá sé léirithe freisin go gcuireann G-Rg3 bac ar mheitastasis cheallacha25, agus tá cumas G-Rg3 chun éifeachtaí ceimiteiripe agus radaiteiripe a fheabhsú doiciméadaithe26,27.Léirigh Poon et al go bhféadfadh cóireáil G-Rg3 éifeachtaí géineatocsaineacha B(a)P28 a laghdú.Léiríonn an staidéar seo acmhainneacht theiripeach G-Rg3 maidir le díriú ar mhóilíní carcanaigineacha comhshaoil ​​agus ailse a chosc.
In ainneoin a ndea-acmhainneacht phróifiolacsach, cruthaíonn droch-infhaighteacht béil ginsenosides dúshlán d’úsáid chliniciúil na móilíní seo.Léirigh anailís chógaschinéiteach ar riarachán béil ginsenosides i bhfrancaigh go bhfuil a bhith-infhaighteacht fós níos lú ná 5%29.Léirigh na tástálacha seo, tar éis na tréimhse cóireála 20 seachtaine, nach laghdaigh ach leibhéil fola Rg5.Cé go bhfuil an mheicníocht bhunúsach maidir le droch-bhith-infhaighteacht fós le soiléiriú, meastar go bhfuil baint ag P-gp le heisilte ginsenosides.Léirigh an obair seo don chéad uair go méadaíonn riaradh verapamil, bacóir P-gp, bith-infhaighteacht bhéil G-Rg3r agus G-Rg3s.Mar sin, tugann an toradh seo le fios go bhfeidhmíonn G-Rg3r agus G-Rg3s mar fhoshraitheanna de P-gp chun a eisilteach a rialú.
Léiríonn an obair seo go méadaíonn cóireáil teaglaim le verapamil bith-infhaighteacht béil G-Rg3 i múnla luiche ailse scamhóg.Tá an toradh seo tacaithe ag iompar méadaithe trascheallach intestinal G-Rg3 tar éis imshuí P-gp, rud a mhéadaíonn a ionsú.Léirigh measúnuithe i gcealla Caco2 gur laghdaigh cóireáil verapamil an eisreabhadh G-Rg3r agus G-Rg3s agus feabhas á chur ar thréscaoilteacht membrane.Staidéar le Yang et al.Tá sé léirithe ag staidéir go méadaíonn cóireáil le cyclosporine A (bhacadóir P-gp eile) bith-infhaighteacht ginsenoside Rh2 ó luach bonnlíne 1%20 go dtí níos mó ná 30%.Léirigh comhdhúile ginsenosides K agus Rg1 torthaí comhchosúla30,31 freisin.Nuair a comh-riaraíodh verapamil agus cyclosporin A, laghdaíodh eisreabhadh cumaisc K i gcealla Caco-2 go suntasach ó 26.6 go níos lú ná 3, agus mhéadaigh a leibhéil intracellular 40-huaire30.I láthair verapamil, mhéadaigh leibhéil Rg1 i gcealla epithelial scamhóg francach, rud a thugann le tuiscint go raibh ról ag P-gp in efflux ginsenoside, mar a léirigh Meng et al.31.Mar sin féin, ní raibh an éifeacht chéanna ag verapamil ar efflux roinnt ginsenosides (cosúil le Rg1, F1, Rh1 agus Re), rud a léiríonn nach bhfuil tionchar ag foshraitheanna P-gp orthu, mar atá léirithe ag Liang et al.32 .D’fhéadfadh baint a bheith ag an tuairim seo le rannpháirtíocht iompróirí eile agus struchtúir mhalartacha ginsenoside.
Níl meicníocht éifeacht choisctheach G-Rg3 ar ailse soiléir.Léirigh staidéir roimhe seo go gcuireann G-Rg3 cosc ​​​​ar damáiste DNA agus apoptosis trí strus ocsaídiúcháin agus athlasadh16,33 a laghdú, rud a d'fhéadfadh a bheith mar an mheicníocht bhunúsach chun tumorigenesis spreagtha B(a)P a chosc.Tugann roinnt tuarascálacha le fios gur féidir géineatocsaineacht arna spreagadh ag B(a)P a laghdú trí einsímí chéim II a mhodhnú chun BPDE-DNA34 a fhoirmiú.Is gnáth-einsím céim II é GST a chuireann bac ar fhoirmiú aduct BPDE-DNA trí cheangal GSH le BPDE a chur chun cinn, rud a laghdaíonn damáiste DNA de bharr B(a)P35.Léiríonn ár dtorthaí go laghdaíonn cóireáil G-Rg3 cíteatocsaineacht B(a) P-spreagtha agus foirmiú adduct BPDE-DNA i gcealla hEL agus go n-athbhunaíonn sé slonn agus gníomhaíocht GST in vitro.Mar sin féin, bhí na héifeachtaí seo as láthair in éagmais Nrf2, rud a thugann le tuiscint go spreagann G-Rg3 éifeachtaí cytoprotective tríd an gcosán Nrf2.Is mórfhachtóir trascríobh é Nrf2 d’einsímí díthocsainithe céim II a chuireann imréiteach xenobiotics chun cinn36.Cothaíonn gníomhachtú chonair Nrf2 cítechosaint agus laghdaítear damáiste fíocháin37.Ina theannta sin, thacaigh roinnt tuarascálacha le ról Nrf2 mar shochtadh siadaí i carcanaigineas38.Léiríonn ár staidéar go bhfuil ról rialála tábhachtach ag ionduchtú cosán Nrf2 trí G-Rg3 i géineatocsaineacht B(a) P-spreagtha trí díthocsainithe B(a)P a dhéanamh trí einsímí céim II a ghníomhachtú, rud a chuireann cosc ​​ar an bpróiseas siadaígenesis.
Nochtann ár gcuid oibre an poitéinseal atá ag ginseng dearg maidir le hailse scamhóige B(a)P-spreagtha i lucha a chosc trí rannpháirtíocht thábhachtach ginsenoside G-Rg3.Cuireann droch-infhaighteacht bhéil an mhóilín seo bac ar a fheidhmiú cliniciúil.Mar sin féin, taispeánann an staidéar seo don chéad uair gur foshraith de P-gp é G-Rg3, agus méadaíonn riaradh coscaire P-gp bith-infhaighteacht G-Rg3 in vitro agus in vivo.Laghdaíonn G-Rg3 cíteatocsaineacht B(a)P-spreagtha trí chonair Nrf2 a rialáil, rud a d’fhéadfadh a bheith ina mheicníocht fhéideartha dá fheidhm choisctheach.Deimhníonn ár staidéar an acmhainneacht atá ag ginsenoside G-Rg3 chun ailse scamhóg a chosc agus a chóireáil.
Fuarthas lucha A/J baineann sé seachtaine d’aois (20 ± 1 g) agus francaigh Wistar fireann 7 seachtaine d’aois (250 ± 20 g) ó The Jackson Laboratory (Bar Harbor, SAM) agus ó Institiúid Zó-eolaíochta Wuhan.Ollscoil (Wuhan, an tSín).Chuir Ionad Bailiúcháin Cultúir Cineál na Síne (Wuhan, an tSín) cealla Caco-2 agus hEL ar fáil dúinn.Is foinse B(a)P agus tricaprine é Sigma-Aldrich (St. Louis, SAM).Ceannaíodh ginsenosides íonaithe G-Rg3r agus G-Rg3s, sulfoxide dimethyl (DMSO), trealamh measúnaithe iomadú CellTiter-96 (MTS), verapamil, meán riachtanach íosta (MEM), agus séiream bó féatais (FBS) ó Chengdu Must Bio-Teicneolaíocht .Co, Teo.(Chengdu, an tSín).Ceannaíodh mionfheisteán DNA QIAamp agus trealamh ELISA adduct BPDE-DNA ó Qiagen (Stanford, CA, SAM) agus Cell Biolabs (San Diego, CA, SAM).Ceannaíodh trealamh measúnaithe gníomhaíochta GST agus trealamh measúnaithe próitéin iomlán (modh caighdeánach BCA) ó Solarbio (Beijing, an tSín).Stóráiltear gach sliocht ginseng dearg i Saotharlann Mingyu 7. Is foinsí tráchtála de sliocht CRG iad Ollscoil Bhaiste Hong Cong (Hong Cong, an tSín) agus Ionad Ailse na Cóiré (Seoul, an Chóiré) agus sleachta ginseng dearg éagsúla de bhunadh Cóiréis éagsúla (lena n-áirítear KRGA, KRGB). agus KRGC).Tá ginseng dearg déanta as fréamhacha ginseng úr 6 bliana d'aois.Faightear sliocht ginseng dearg trí ginseng a ní le huisce trí huaire, ansin an sliocht uiscí a dhíriú, agus ar deireadh a thriomú ag teocht íseal chun púdar sliocht ginseng a fháil.Ceannaíodh antasubstaintí (frith-Nrf2, frith-GST, agus β-actin), immunoglobulin frith-coinín horseradish peroxidase-conjugated G (IgG), imoibrí aistrithe, siRNA rialaithe, agus siRNA Nrf2 ó Santa Cruz Biteicneolaíocht (Santa Cruz, CA). .), SAM).
Saothraíodh cealla Caco2 agus hEL i miasa saothraithe cille 100 mm2 le MEM ina raibh 10% FBS ag 37 °C in atmaisféar tais de 5% CO2.Chun éifeacht na gcoinníollacha cóireála a chinneadh, goraíodh cealla hEL le tiúchain éagsúla B(a)P agus G-Rg3 i MEM ar feadh 48 h.Is féidir tuilleadh anailíse a dhéanamh ar chealla nó iad a bhailiú chun sleachta saor ó chealla a ullmhú.
D'fhormheas Coiste Eitice Ainmhithe Turgnamhach Choláiste Leighis Tongji, Ollscoil Eolaíochta agus Teicneolaíochta Huazhong (Faomhadh Uimh. 2019; Clárúchán Uimh. 4587TH) na turgnaimh go léir.Rinneadh na turgnaimh go léir de réir treoirlínte agus rialacháin ábhartha, agus rinneadh an staidéar de réir na dtreoirlínte Taighde Ainmhithe: Tuairisciú Turgnaimh In Vivo (ARRIVE).Instealladh intraperitoneally do lucha A/J ocht seachtaine d'aois le B(a)P i dtuaslagán tricaprine (100 mg/kg, 0.2 ml).Tar éis seachtaine, roinneadh na lucha go randamach i ngrúpaí rialaithe agus grúpaí cóireála éagsúla, 15 lucha i ngach grúpa, agus gavaged uair amháin sa lá.Tar éis 20 seachtain de chóireáil, íobairt asphyxia CO2 ainmhithe.Bailíodh na scamhóga agus socraíodh iad ar feadh 24 uair an chloig.Rinneadh líon na siadaí superficial agus méideanna siadaí aonair a chainníochtú do gach scamhóg faoi mhicreascóp díscartha.Ríomhadh meastacháin toirte meall (V) ag baint úsáide as an slonn seo a leanas: V (mm3) = 4/3πr3, áit a bhfuil r trastomhas an meall.B’ionann glansuim gach toirt siadaí i scamhóga na lucha agus an toirt iomlán siadaí, agus b’ionann meánmhéid iomlán na meall i ngach grúpa agus an t-ualach meall.Bailíodh samplaí lánfhola agus stéigeach agus stóráladh iad ag −80°C le cinneadh UPLC-MS/MS.Bailíodh serum agus úsáideadh anailísí ceimice uathoibrithe chun anailís a dhéanamh ar leibhéil alanine aminotransferase (ALT) agus serum creatinine (Cr) chun feidhm ae agus duáin a mheasúnú.
Baineadh samplaí a bailíodh as fuarstóráil, leáite iad, meáitear iad, agus cuireadh i bhfeadáin iad mar a thuairiscítear thuas.Leis seo cuireadh 0.5 μM phlorizin (caighdeán inmheánach) i dtuaslagán meatánóil 0.8 ml.Rinneadh an fíochán a aonchineálú ansin ag baint úsáide as Tearsóir Fíocháin agus aistríodh an aonchineálach ina dhiaidh sin chuig feadán micrealártheifneoir 1.5 ml.Rinneadh an meascán a lártheifneoiriú ag 15500 rpm ar feadh 15 nóiméad.Tar éis 1.0 ml de sháithín a bhaint, tirim le nítrigin.Úsáideadh dhá chéad micrilítear meatánóil le haghaidh aisghabhála.Déantar an fhuil a bhailiú agus a phróiseáil ar líne amháin agus úsáidtear í mar thagairt do gach tomhas.
Síolaíodh plátaí Transwell 24-tobar le cealla 1.0 × 105 Caco-2 in aghaidh an tobair chun feabhsú féideartha iompair G-Rg3 a mheas trí verapamil a chur leis.Tar éis 3 seachtaine saothraithe, nite cealla le HBSS agus réamh-ghoirte ag 37 ° C.Instealladh 400 μL de 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s, nó meascán le 50 nó 100 μM verapamil) ar thaobh basolateral nó apical an monolayer, agus cuireadh 600 μL de thuaslagán HBSS leis an gceann eile. taobh.Bailigh 100 µl de mheán cultúir ag na hamanna sainithe (0, 15, 30, 45, 60, 90 agus 120 nóiméad) agus cuir 100 µl de HBSS leis mar chuid den imleabhar seo.Stóráladh samplaí ag −4 °C go dtí gur bhraith UPLC-MS/MS iad.Úsáidtear an slonn Papp = dQ/(dT × A × C0) chun an tréscaoilteacht dhealraitheach apical agus basthaobhach a chainníochtú agus vice versa (Pa-b agus Pb-a, faoi seach);Is é dQ/dT an t-athrú tiúchana, is é A (0.6 cm2) achar dromchla an monolayer, agus is é C0 an tiúchan tosaigh deontóra.Ríomhtar an cóimheas eisilte mar Pb-a/Pa-b, arb ionann é agus ráta eisilte an druga staidéir.
Rinneadh troscadh ar fhrancaigh fireann Wistar ar feadh 24 uair, níor ól siad ach uisce, agus rinneadh ainéistéiseach orthu le hinstealladh infhéitheach de thuaslagán peantobairbít 3.5%.Tá deireadh an duodenum ag an bhfeadán silicone intubated mar an mbealach isteach agus deireadh an ileum mar an slí amach.Úsáid caidéal peristaltach chun an inlet a phumpáil le 10 µM G-Rg3r nó G-Rg3s in HBSS iseatónach ag ráta sreafa 0.1 ml/nóim.Rinneadh measúnú ar éifeacht verapamil trí 50 μM nó 100 μM den chomhdhúil a chur le 10 μM G-Rg3r nó G-Rg3s.Rinneadh UPLC-MS/MS ar shleachta perfusion a bailíodh ag pointí ama 60, 90, 120, agus 150 nóiméad tar éis tús an phróiseála.Déantar céatadán an ionsúcháin a chainníochtú leis an bhfoirmle % ionsú = (1 – Cout/Cin) × 100%;cuirtear an tiúchan de G-Rg3 ag an asraon agus an inlet in iúl ag Cout agus Cin, faoi seach.
Síolaíodh cealla hEL i plátaí 96-tobar ag dlús 1 × 104 cealla in aghaidh an tobair agus déileáladh leo le B(a)P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) nó G-Rg3 tuaslagtha i DMSO .Caolaíodh na drugaí ansin le meán cultúir go tiúchan éagsúla (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) thar 48 uair an chloig.Ag baint úsáide as trealamh measúnaithe MTS atá ar fáil go tráchtála, cuireadh cealla faoi réir prótacal caighdeánach agus ansin tomhaiseadh iad ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta ag 490 nm.Rinneadh measúnú ar leibhéal inmharthanachta cille na ngrúpaí a comhchóireáladh le B(a)P (10 μM) agus G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) de réir an mhodha thuas agus cuireadh i gcomparáid é leis an ngrúpa gan chóireáil.
Síolaíodh cealla hEL i bplátaí 6-tobar ag dlús 1 × 105 ceall/tobar agus déileáladh leo le 10 μMB(a)P i láthair nó as láthair 10 μM G-Rg3.Tar éis 48 uair an chloig de chóireáil, baineadh DNA ó chealla hEL ag baint úsáide as Kit Mini DNA QIAamp de réir phrótacal an mhonaróra.Braitheadh ​​foirmiú adduct BPDE-DNA ag baint úsáide as trealamh BPDE-DNA adduct ELISA.Rinneadh leibhéil choibhneasta d'adduct BPDE-DNA a thomhas ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta trí ionsúchán a thomhas ag 450 nm.
Cuireadh síolta cealla hEL i plátaí 96-tobar ag dlús de 1 × 104 cealla in aghaidh an tobair agus cóireáilte le 10 μMB(a)P in éagmais nó láithreacht 10 μM G-Rg3 ar feadh 48 h.Rinneadh gníomhaíocht GST a thomhas ag baint úsáide as trealamh measúnaithe gníomhaíochta GST tráchtála de réir phrótacal an mhonaróra.Rinneadh gníomhachtú coibhneasta GST a thomhas trí ionsúchán ag 450 nm ag baint úsáide as léitheoir microplate.
Níodh cealla HEL le PBS fuar oighir agus ansin lísíodh iad ag baint úsáide as maolán measúnachta rada-imdhíon-réamhshamhlaithe ina raibh coscairí próitéáis agus coscairí fosfatase.Tar éis cainníochtú próitéine ag baint úsáide as trealamh measúnaithe próitéin iomlán, scartha 30 μg próitéine i ngach sampla le 12% SDS-PAGE agus aistríodh leictreafóiréis chuig membrane PVDF.Cuireadh bac ar na scannáin le bainne bearrtha 5% agus goradh iad le príomhantasubstaintí thar oíche ag 4°C.Tar éis gor le antasubstaintí tánaisteacha comhchuingeacha horseradish peroxidase, cuireadh imoibrithe cemiluminescence feabhsaithe leis chun an comhartha ceangailteach a léirshamhlú.Rinneadh déine gach banda próitéine a chainníochtú trí úsáid a bhaint as bogearraí ImageJ.
Baineadh úsáid as bogearraí GraphPad Prism 7.0 chun anailís a dhéanamh ar na sonraí go léir, arna shloinneadh mar mheán ± diall caighdeánach.Rinneadh measúnú ar éagsúlacht idir grúpaí cóireála trí úsáid a bhaint as tástáil t an Mhic Léinn nó anailís aontreo ar athraitheas, le luach P <0.05 ag léiriú tábhacht staitistiúil.
Tá na sonraí go léir a fhaightear nó a ndearnadh anailís orthu le linn an staidéir seo san áireamh san alt foilsithe seo agus i gcomhaid faisnéise forlíontacha.
Torre, LA, Siegel, RL agus Jemal, A. Staitisticí ailse scamhóg.dobhriathar.imithe in éag.cógas.bitheolaíocht.893, 1–19 (2016).
Hecht, S. Carcanaiginí tobac, a mbithmharcóirí agus ailse arna spreagadh ag tobac.Nat.Séiplíneach ailse.3, 733–744 (2003).
Phillips, DH agus Venitt, S. Adaíonn DNA agus próitéin i bhfíocháin dhaonna mar thoradh ar nochtadh do dheatach tobac.idirnáisiúntacht.J. Ailse.131, 2733–2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA agus Yu M. Éifeacht Houttuynia cordata agus silibinin ar siadaí giniúna scamhóg beinsó(a) piréin i lucha A/J.Ailse 7, 1053–1057 (2005).
Tang, W. et al.Táirge nádúrtha anticancer scoite amach ó ábhair leighis na Síne.fhód.cógas.6, 27 (2011).
Yang, Y. et al.Éifeachtúlacht polyphenon E, ginseng dearg, agus rapamycin ar tumorigenesis scamhóg benzo(a) piréin-spreagtha i lucha A/J.Ailse 8, 52–58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS agus Yuan, KS Red, rannpháirtíocht i teiripe ailse.fhód.J. Nutt.cógas.14, 7–16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS agus Gao, L. Ginsenosides i bhfréamhacha agus duilleoga ginseng Mheiriceá.J. Agric.Ceimic bia.44, 717–720 (1996).
Attele AS, Wu JA agus Yuan KS Cógaseolaíocht ginseng: go leor comhpháirteanna agus go leor éifeachtaí.bithcheimic.cógaseolaíocht.58, 1685–1693 (1999).


Am postála: Meán Fómhair-17-2023