Tapadh leibh airson tadhal air Nature.com.Tha taic CSS cuibhrichte aig an dreach den bhrobhsair a tha thu a’ cleachdadh.Airson na builean as fheàrr, tha sinn a’ moladh gun cleachd thu dreach nas ùire den bhrobhsair agad (no cuir dheth modh co-chòrdalachd ann an Internet Explorer).Anns an eadar-ama, gus dèanamh cinnteach à taic leantainneach, tha sinn a’ taisbeanadh na làraich gun stoidhle no JavaScript.
Tha ginseng dearg air a bhith air a chleachdadh ann an leigheas traidiseanta Àisianach airson ceudan de bhliadhnaichean.Anns an sgrùdadh seo, rinn sinn measadh air comas ceithir seòrsaichean ginseng dearg (ginseng dearg Sìneach, ginseng dearg Korean A, ginseng dearg Korean B, agus ginseng dearg Korean C) air fhàs ann an diofar roinnean gus casg a chuir air cruthachadh agus fàs sgamhain air a bhrosnachadh le carcinogen. tumhair.Chaidh deuchainn benzo (a) pyrene (B (a) P) a dhèanamh air luchagan A / J, agus chaidh a lorg gur e ginseng dearg Corea B an fheadhainn as èifeachdaiche ann a bhith a’ lughdachadh eallach tumhair am measg nan ceithir seòrsaichean ginseng dearg.A bharrachd air an sin, rinn sinn mion-sgrùdadh air susbaint diofar ginsenosides (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 agus Rg5) ann an ceithir earrannan ginseng dearg agus lorg sinn gu robh ginseng dearg Korean B aig na h-ìrean as àirde de ginsenoside Rg3 (G-Rg3), a’ moladh gum faodadh pàirt chudromach a bhith aig G-Rg3 ann an èifeachd teirpeach.Tha an obair seo a’ sealltainn gu bheil bith-ruigsinneachd coimeasach ìosal aig G-Rg3.Ach, nuair a chaidh G-Rg3 a cho-rianachd leis an inhibitor P-gp verapamil, chaidh an sgaoileadh de G-Rg3 a-steach do cheallan Caco-2 a lughdachadh, chaidh ìre in-ghabhail intestinal G-Rg3 àrdachadh ann am modail radan, agus G-Rg3 chaidh àrdachadh.Ann an ceallan Caco-2, tha an às-sruthadh de Rg3 a 'lùghdachadh, agus tha ìre co-chruinneachaidh Rg3 a' lùghdachadh.Tha G-Rg3 air a mheudachadh anns a’ bhroinn agus plasma, agus tha a chomas air tumors a chasg cuideachd air àrdachadh ann am modal radan de tumorigenesis air a bhrosnachadh le B (a) P.Lorg sinn cuideachd gun do lughdaich G-Rg3 cytotoxicity air a bhrosnachadh le B (a) P agus cruthachadh DNA addiction ann an ceallan sgamhain daonna, agus thug e air ais faireachdainn agus gnìomhachd enzyman ìre II tro shlighe Nrf2, a dh’ fhaodadh a bhith co-cheangailte ris an dòigh gnìomh a dh’ fhaodadh a bhith ann. de G casg -Rg3..Mu dheidhinn tumors sgamhain.Tha an sgrùdadh againn a’ sealltainn àite a dh’ fhaodadh a bhith cudromach dha G-Rg3 ann a bhith ag amas air tumors sgamhain ann am modalan luchag.Tha bith-ruigsinneachd beòil an ginsenoside seo air a neartachadh le bhith ag amas air P-glycoprotein, a’ leigeil leis a’ mholacile buaidh an aghaidh aillse a thoirt gu buil.
Is e an seòrsa aillse sgamhain as cumanta aillse sgamhain neo-bheag cealla (NSCLC), a tha mar aon de na prìomh adhbharan airson bàsan aillse ann an Sìona agus Ameireaga a Tuath1,2.Is e smocadh am prìomh fheart a tha a’ meudachadh chunnart aillse sgamhain neo-bheag cealla.Tha còrr air 60 carcinogens ann an ceò toitean, a’ gabhail a-steach benzo(a)pyrene (B(a)P), nitrosamines, agus isotopan rèidio-beò bho bhith a’ lobhadh radon.3 Is e hydrocarbons aromatic polycyclic B(a)P am prìomh adhbhar airson puinnseanta ann an toitean. deatach.Nuair a nochdas e do B(a)P, bidh cytochrome P450 ga thionndadh gu B(a)P-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide (BPDE), a bhios ag ath-fhreagairt le DNA gus BPDE-DNA adduct 4 a chruthachadh. ag adhbhrachadh tumorigenesis sgamhain ann an luchagan le ìre tumhair agus histopathology coltach ri tumors sgamhain daonna5.Tha am feart seo a’ dèanamh a’ mhodail aillse sgamhain air a bhrosnachadh le B(a) P mar shiostam iomchaidh airson measadh a dhèanamh air coimeasgaidhean le feartan a dh’ fhaodadh a bhith an aghaidh aillse.
Is e aon ro-innleachd a dh’ fhaodadh a bhith ann airson casg a chuir air leasachadh aillse sgamhain ann am buidhnean àrd-chunnart, gu sònraichte luchd-smocaidh, cleachdadh riochdairean chemopreventive gus casg a chuir air leasachadh leòintean neoplastic intraepithelial agus mar sin casg a chuir air an gluasad air adhart gu malignancy.Tha sgrùdaidhean bheathaichean a’ sealltainn gu bheil diofar riochdairean chemopreventive èifeachdach6.Chomharraich an aithisg roimhe againn7 na buaidhean bacaidh math a tha aig ginseng dearg air aillse sgamhain.Tha an luibh seo air a bhith air a chleachdadh airson linntean ann an leigheas traidiseanta Àisianach gus beatha agus slàinte a leudachadh, agus chaidh a chlàradh gu bheil buaidhean antitumor aige8.
Is e feart gnìomhach ginseng ginsenoside, a tha air a chleachdadh mar chomharradh co-dhèanta gus càileachd earrannan ginseng a mheasadh.Mar as trice bidh mion-sgrùdadh cainneachdail air earrannan ginseng amh a’ toirt a-steach cleachdadh grunn ginsenosides, nam measg RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5, agus Rc9,10.Chan eil mòran feum clionaigeach aig ginsenosides air sgàth cho dona sa tha iad beòil beòil11.Ged nach eil an dòigh-obrach airson an droch bhith-ruigsinneachd seo soilleir, is dòcha gur e sruthadh ginsenosides air adhbhrachadh le P-glycoprotein (P-gp)12 as coireach.Is e P-gp aon de na luchd-còmhdhail efflux as cudromaiche ann an superfamily còmhdhail cassette ceangailteach ATP, a bhios a’ cleachdadh lùth hydrolysis ATP gus stuthan intracellular a leigeil a-steach don àrainneachd a-muigh.Mar as trice bidh luchd-còmhdhail P-gp air an sgaoileadh gu farsaing anns a’ bhacadh caolan, dubhaig, grùthan agus fuil-eanchainn13.Tha àite deatamach aig P-gp ann an in-ghabhail intestinal, agus tha casg air P-gp a’ meudachadh gabhail a-steach beòil agus ruigsinneachd cuid de dhrogaichean an aghaidh aillse12,14.Is e eisimpleirean de luchd-dìon a chaidh a chleachdadh roimhe seo anns an litreachas verapamil agus cyclosporine A15.Tha an obair seo a’ toirt a-steach stèidheachadh siostam lucha airson a bhith a’ sgrùdadh aillse sgamhain air a bhrosnachadh le B(a) P gus measadh a dhèanamh air comas diofar earrannan ginseng dearg à Sìona agus Korea gus buaidh a thoirt air malignancies.Chaidh na h-earrannan a sgrùdadh leotha fhèin gus ginsenosides sònraichte a chomharrachadh a dh’ fhaodadh buaidh a thoirt air carcinogenesis.Chaidh Verapamil an uairsin a chleachdadh gus cuimseachadh air P-gp agus gus bith-ruigsinneachd beòil agus èifeachd teirpeach ginsenosides a tha ag amas air aillse a leasachadh.
Tha an dòigh anns am bi ginseng saponins a’ toirt buaidh therapach air carcinogenesis fhathast neo-shoilleir.Tha rannsachadh air sealltainn gum faod diofar ginsenosides milleadh DNA adhbhrachadh le carcinogens a lughdachadh le bhith a ’lughdachadh cuideam oxidative agus a’ cur an gnìomh enzyman detoxification ìre II, agus mar sin a ’cur casg air milleadh cealla.Tha Glutathione S-transferase (GST) na enzyme àbhaisteach ìre II a dh’ fheumar gus milleadh DNA air adhbhrachadh le carcinogens17 a lughdachadh.Tha factar 2 co-cheangailte ri erythroid niuclasach 2 (Nrf2) na fheart tar-sgrìobhaidh cudromach a bhios a’ riaghladh homeostasis redox agus a chuireas an cèill enzyman ìre II agus freagairtean antioxidant cytoprotective18.Rinn an sgrùdadh againn sgrùdadh cuideachd air buaidhean ginsenosides comharraichte air lughdachadh cytotoxicity air a bhrosnachadh le B (a) P agus cruthachadh uchd BPDE-DNA, a bharrachd air a bhith a’ toirt a-steach enzyman ìre II le bhith ag atharrachadh slighe Nrf2 ann an ceallan sgamhain àbhaisteach.
Tha stèidheachadh modail lucha de aillse brosnaichte B(a) P co-chòrdail ri obair roimhe5.Tha Figear 1A a’ sealltainn dealbhadh deuchainneach làimhseachadh 20-seachdain de mhodail aillse luchag air a bhrosnachadh le B(a)P, uisge (smachd), earrann ginseng dearg Sìneach (CRG), earrann ginseng dearg Korean A (KRGA), agus dearg Korean. ginseng.Earrann B (KRGB) agus Korean Red Ginseng Earrann C (KRGC).Às deidh 20 seachdainean de làimhseachadh ginseng dearg, chaidh luchagan a thoirt seachad le asphyxiation CO2.Tha Figear 1B a’ sealltainn tumors sgamhain macroscopach ann am beathaichean air an làimhseachadh le diofar sheòrsan ginseng dearg, agus tha Figear 1C a’ sealltainn micrograph aotrom riochdachail de shampall tumhair.Bha an eallach tumhair de bheathaichean le làimhseachadh KRGB (1.5 ± 0.35) nas ìsle na an fheadhainn a bha aig beathaichean smachd (0.82 ± 0.2, P <0.05), mar a chithear ann am Figear 1D.B’ e an ìre cuibheasach de bhacadh luchd tumhair 45%.Cha do sheall earrannan ginseng dearg eile a chaidh a dhearbhadh atharrachaidhean cho mòr ann an eallach tumhair (P> 0.05).Cha deach frith-bhuaidhean follaiseach fhaicinn ann am modail na luchaige rè 20 seachdainean de làimhseachadh ginseng dearg, a’ toirt a-steach atharrachadh sam bith ann an cuideam bodhaig (dàta nach deach a shealltainn) agus gun puinnseanta grùthan no dubhaig (Figear 1E, F).
Bidh earrann ginseng dearg a’ làimhseachadh leasachadh tumhair sgamhain ann an luchagan A / J.(A) Dealbhadh deuchainneach.(B) Tumaran mòra sgamhain ann am modail lucha.Tha tumors air an comharrachadh le saighdean.a: Buidheann ginseng dearg Sìneach.b: buidheann A de ginseng dearg Korean.c: Buidheann ginseng dearg Korean B. d: Buidheann ginseng dearg Korean C. d: Buidheann smachd.(C) Mion-dhealbh aotrom a’ sealltainn tumhair sgamhain.Meudachadh: 100. b: 400. (D) Tumor luchd anns a 'bhuidheann dearg ginseng earrann.(E) Ìrean plasma den enzym grùthan ALT.(F) Ìrean plasma den enzyme dubhaig Cr.Tha dàta air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach.*P <0.05.
Chaidh na h-earrannan ginseng dearga a chaidh an comharrachadh san sgrùdadh seo a sgrùdadh le speactrometry mòr tandem cromatagrafaidheachd lionn ultra-choileanadh (UPLC-MS/MS) gus na ginsenosides a leanas a thomhas: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3 , Rh2, F1, Rk1 agus Rg5.Chaidh iomradh a thoirt air na cumhaichean UPLC agus MS a chaidh a chleachdadh gus na mion-sgrùdaidhean a thomhas ann an aithisg roimhe19.Tha cromatagraman UPLC-MS/MS de cheithir earrannan ginseng dearg air an sealltainn ann am Figear 2A.Bha eadar-dhealachaidhean mòra ann an susbaint iomlan ginsenoside, leis an t-susbaint ginsenoside iomlan as àirde ann an CRG (590.27 ± 41.28 μmol / L) (Figear 2B).Nuair a chaidh ginsenosides fa leth a mheasadh (Figear 2C), sheall KRGB an ìre as àirde de G-Rg3 an coimeas ri ginsenosides eile (58.33 ± 3.81 μmol / L airson G-Rg3s agus 41.56 ± 2.88 μmol / L airson G -Rg3r).seòrsa ginseng dearg (P <0.001).Tha G-Rg3 a 'tachairt mar phaidhir de stereoisomers G-Rg3r agus G-Rg3s, a tha eadar-dhealaichte ann an suidheachadh na buidhne hydroxyl aig carbon 20 (Fig. 2D).Tha na co-dhùnaidhean a’ nochdadh gum faodadh comas mòr an aghaidh aillse a bhith aig G-Rg3r no G-Rg3 ann am modal luchag aillse air a bhrosnachadh le B (a) P.
Susbaint ginsenosides ann an grunn earrannan ginseng dearg.(A) Cromatograman UPLC-MS/MS de cheithir earrannan ginseng dearg.(B) Tomhas air susbaint iomlan ginsenoside anns na h-earrannan comharraichte.(C) A’ lorg ginsenosides fa leth ann an earrannan le bileagan.(D) Structar stereoisomers ginsenoside G-Rg3r agus G-Rg3s.Tha dàta air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach de cho-dhùnaidhean trì-fhillte.***P <0.001.
Dh'fheumadh an sgrùdadh UPLC-MS/MS tomhas ginsenosides ann an sampallan fala agus caolan an dèidh 20 seachdainean de làimhseachadh.Sheall làimhseachadh le KRGB nach robh ach 0.0063 ± 0.0005 μg/ml Rg5 san fhuil.Cha deach ginsenosides sam bith a lorg, a’ nochdadh droch bith-ruigsinneachd beòil agus mar sin lughdaich iad a bhith fosgailte do na ginsenosides sin.
Tha loidhne cealla colon adenocarcinoma Caco-2 coltach gu morphologach agus gu bith-cheimiceach ri ceallan epithelial intestinal daonna, a ’nochdadh a ghoireas ann a bhith a’ measadh còmhdhail enterocyte thairis air a ’chnap-starra epithelial intestinal.Bha am mion-sgrùdadh seo stèidhichte air sgrùdadh na bu thràithe 20 .Tha figearan 3A, B, C, D, E, F a’ sealltainn ìomhaighean riochdachail de chòmhdhail thar-ghnèitheach de G-Rg3r agus G-Rg3 a’ cleachdadh modal monolayer Caco-2.Bha còmhdhail tar-ghluasadach de G-Rg3r no G-Rg3 thairis air monolayers Caco-2 bhon taobh basolateral gu apical (Pb-a) gu math nas àirde na bhon taobh apical gu basolateral (Pa-b).Airson G-Rg3r, b ’e luach cuibheasach Pa-b 0.38 ± 0.06, a dh’ èirich gu 0.73 ± 0.06 às deidh làimhseachadh le 50 μmol / L verapamil agus gu 1.14 ± 0.09 às deidh làimhseachadh le 100 μmol / L verapamil (p,1 agus 0.0). fa leth; Figear 2).3A).Lean beachdan airson G-Rg3 pàtran coltach ris (Fig. 3B), agus sheall na toraidhean gun do chuir làimhseachadh verapamil ri còmhdhail G-Rg3r agus G-Rg3.Mar thoradh air làimhseachadh verapamil cuideachd thàinig lùghdachadh mòr ann an co-mheasan efflux cuibheasach Pb-a agus G-Rg3r agus G-Rg3s (Figear 3C, D, E, F), a’ nochdadh gu bheil làimhseachadh verapamil a’ lughdachadh susbaint ginsenoside ann an ceallan efflux Caco-2..
Còmhdhail tar-ghluasadach de G-Rg3 ann am monolayers Caco-2 agus in-ghabhail caolan ann am measadh perfusion radain.(A) Luach pa-b de bhuidheann G-Rg3r ann am monolayer Caco-2.(B) Luach pa-b de bhuidhnean G-Rg3s ann am monolayer Caco-2.(C) Luach Pb de bhuidheann G-Rg3r ann am monolayer Caco-2.(D) Luach Pb de bhuidhnean G-Rg3s ann am monolayer Caco-2.(E) Co-mheas toraidh de bhuidhnean G-Rg3r ann am monolayer Caco-2.(F) Co-mheas toraidh de bhuidhnean G-Rg3 ann am monolayer Caco-2.(G) An àireamh sa cheud de dh’ in-ghabhail intestinal G-Rg3r ann am measadh perfusion ann am radain.(H) An ìre sa cheud de sùghadh caolan G-Rg3 ann am measadh perfusion ann am radain.Chaidh coimeas a dhèanamh eadar permeability agus in-ghabhail gun a bhith a’ cur verapamil ris.Tha dàta air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach de chòig deuchainnean neo-eisimeileach.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Co-chòrdail ri obair na bu thràithe20, chaidh perfusion intestinal orthotopic de radain a dhèanamh gus faighinn a-mach a bheil in-ghabhail G-Rg3 anns a’ bhroinn ag àrdachadh às deidh làimhseachadh verapamil.Tha figearan 3G,H a’ sealltainn measaidhean perfusion riochdachail gus measadh a dhèanamh air an àireamh sa cheud de in-ghabhail intestinal G-Rg3r agus G-Rg3 ann am radain modail aillse anns na h-amannan ùine gu h-àrd.Mheudaich a’ chiad ceudad de ghabhail lag G-Rg3r de mu 10% gu còrr air 20% às deidh làimhseachadh le 50 μM verapamil agus gu còrr air 25% às deidh làimhseachadh le 100 μM verapamil.Mar an ceudna, sheall G-Rg3, aig an robh cleachdadh tùsail de 10%, cuideachd stùc de chòrr air 20% às deidh làimhseachadh le 50 μM verapamil agus faisg air 30% às deidh làimhseachadh le 100 μM verapamil, a’ moladh gu bheil casg air P-gp le verapamil ag àrdachadh G-absorption intestinal Rg3 ann am modail luchag de aillse sgamhain.
A rèir an dòigh gu h-àrd, chaidh luchagan modail aillse brosnaichte B(a) P a roinn air thuaiream ann an sia buidhnean, mar a chithear ann am Figear 4A.Cha deach call cuideim mòr no comharran clionaigeach de phuinnsean fhaicinn anns a’ bhuidheann làimhseachaidh G-Rg3 an coimeas ris a’ bhuidheann smachd (dàta nach deach a shealltainn).Às deidh 20 seachdainean de làimhseachadh, chaidh sgamhanan gach luchag a chruinneachadh.Tha Figear 4B a’ sealltainn tumors sgamhain macroscopach ann an luchagan anns na buidhnean làimhseachaidh gu h-àrd, agus tha Figear 4C a’ sealltainn micrograph aotrom riochdachail de tumhair riochdachail.A thaobh an eallach tumhair anns gach buidheann (Fig. 4D), b 'e na luachan airson luchainn a chaidh a làimhseachadh le G-Rg3r agus G-Rg3s 0.75 ± 0.29 mm3 agus 0.81 ± 0.30 mm3, fa leth, fhad' sa bha na luachan airson G luchainn air an làimhseachadh. le -Rg3s bha 1.63 fa leth ± 0.40 mm3.luchagan smachd (p <0.001), a’ nochdadh gun do lughdaich làimhseachadh G-Rg3 eallach tumhair ann an luchagan.Chuir rianachd verapamil ris an lùghdachadh seo tuilleadh: chaidh luachan ann an luchagan verapamil + G-Rg3r sìos bho 0.75 ± 0.29 mm3 gu 0.33 ± 0.25 mm3 (p <0.01), agus lughdaich luachan airson verapamil + bho 0.81 ± 0.30 mm.2 gu 0.81 ± 0.30 mm. mm3 ann an luchagan air an làimhseachadh le G. -Rg3s (p <0.05), a’ nochdadh gum faodadh verapamil buaidh bacaidh G-Rg3 air tumorigenesis a neartachadh.Cha do sheall eallach tumhair eadar-dhealachaidhean mòra eadar a ’bhuidheann smachd agus a’ bhuidheann verapamil, a ’bhuidheann G-Rg3r agus a’ bhuidheann G-Rg3s, agus a ’bhuidheann verapamil + G-Rg3r agus a’ bhuidheann verapamil + G-Rg3s.A bharrachd air an sin, cha robh puinnseanta grùthan no dubhaig cudromach sam bith co-cheangailte ris na leigheasan a chaidh a mheasadh (Figear 4E, F).
Uallach tumhair às deidh làimhseachadh G-Rg3 agus ìrean plasma no intestinal G-Rg3r agus G-Rg3 anns na buidhnean comharraichte.(A) Dealbhadh deuchainneach.(B) Tumaran macroscopic ann am modail luchag.Tha tumors air an comharrachadh le saighdean.a: G-Rg3r.b: G-Rg3s.c: G-Rg3r còmhla ri verapamil.d: G-Rg3 còmhla ri verapamil.d: Verapamil.e: smachd.(C) Micrograf optigeach den tumhair aig àrdachadh.Freagairt: 100x.b: 400X.(D) Buaidh làimhseachadh G-Rg3 + verapamil air eallach tumhair ann an luchagan A / J.(E) Ìrean plasma den enzym grùthan ALT.(F) Ìrean plasma den enzyme dubhaig Cr.(G) Ìrean plasma de G-Rg3r no G-Rg3 de na buidhnean comharraichte.(H) Ìrean G-Rg3r no G-Rg3s ann an caolan nam buidhnean comharraichte.Tha dàta air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach de cho-dhùnaidhean trì-fhillte.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Chaidh ìrean G-Rg3 anns na luchagan modail aillse brosnaichte B(a) P a mheasadh le UPLC-MS/MS às deidh ùine làimhseachaidh 20-seachdain a rèir an dòigh a chaidh a mhìneachadh anns an roinn Dòighean.Tha figearan 4G agus H a’ sealltainn ìrean plasma agus caolan G-Rg3, fa leth.Bha ìrean plasma G-Rg3r aig 0.44 ± 0.32 μmol / L agus chaidh iad suas gu 1.17 ± 0.47 μmol / L le rianachd concomitant de verapamil (p <0.001), fhad ‘s a bha ìrean G-Rg3r intestinal 0.53 ± 0.08.Nuair a chaidh a chur còmhla ri verapamil, mheudaich g gu 1.35 ± 0.13 μg/g (p <0.001).Airson G-Rg3, lean na toraidhean pàtran coltach ris, a’ nochdadh gun do mheudaich làimhseachadh verapamil bith-ruigsinneachd beòil G-Rg3 ann an luchagan A / J.
Chaidh measadh comas obrachaidh cealla a chleachdadh gus measadh a dhèanamh air cytotoxicity B(a)P agus G-Rg3 air ceallan hEL.Tha an cytotoxicity air adhbhrachadh le B (a) P ann an ceallan hEL air a shealltainn ann am Figear 5A, fhad ‘s a tha na feartan neo-phuinnseanta aig G-Rg3r agus G-Rg3 air an sealltainn ann am Figearan 5A agus 5B.5B, C. Gus measadh a dhèanamh air buaidh cytoprotective G-Rg3, chaidh B(a)P a cho-rianachd le diofar cho-chruinneachaidhean de G-Rg3r no G-Rg3 a-steach do cheallan hEL.Mar a chithear ann am Figear 5D, G-Rg3r aig dùmhlachdan de 5 μM, 10 μM, agus 20 μM ath-nuadhachadh comas obrachaidh cealla gu 58.3%, 79.3%, agus 77.3%, fa leth.Tha toraidhean co-chosmhail rim faicinn cuideachd anns a’ bhuidheann G-Rg3s.Nuair a bha na co-chruinneachaidhean de G-Rg3s 5 µM, 10 µM agus 20 µM, chaidh comas obrachaidh cealla ath-nuadhachadh gu 58.3%, 72.7% agus 76.7%, fa leth (Figear 5E).).Chaidh làthaireachd stuthan BPDE-DNA a thomhas a’ cleachdadh pasgan ELISA.Sheall na co-dhùnaidhean againn gun deach ìrean giùlain BPDE-DNA àrdachadh anns a’ bhuidheann B(a) P-làimhseachadh an coimeas ris a’ bhuidheann smachd, ach an coimeas ri co-làimhseachadh G-Rg3, ìrean giùlain BPDE-DNA anns a’ bhuidheann B(a)P B anns a 'bhuidheann a chaidh a làimhseachadh, chaidh ìrean DNA a lùghdachadh gu mòr.Tha toraidhean làimhseachaidh le B(a)P a-mhàin air an sealltainn ann am Figear 5F (1.87 ± 0.33 vs. 3.77 ± 0.42 airson G-Rg3r, 1.93 ± 0.48 vs 3.77 ± 0.42 airson G -Rg3s, p <0.001).
Gnìomhachd cealla agus cruthachadh BPDE-DNA adduct ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le G-Rg3 agus B(a)P.(A) Gnìomhachd cheallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P.(B) Gnìomhachd cheallan hEL air an làimhseachadh le G-Rg3r.(C) Gnìomhachd cheallan hEL air an làimhseachadh le G-Rg3.(D) Gnìomhachd cheallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3r.(E) Gnìomhachd cheallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3.(F) Ìrean BPDE-DNA adduct ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3.Tha dàta air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach de cho-dhùnaidhean trì-fhillte.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Chaidh abairt enzyme GST a lorg às deidh co-làimhseachadh le 10 μM B (a) P agus 10 μM G-Rg3r no G-Rg3s.Sheall na co-dhùnaidhean againn gun do chuir B(a)P stad air abairt GST (59.7 ± 8.2% anns a’ bhuidheann G-Rg3r agus 39 ± 4.5% anns a’ bhuidheann G-Rg3s), agus bha B(a)P co-cheangailte ris an dàrna cuid le G-Rg3r , no le G-Rg3r, no le G-Rg3r.Thug co-làimhseachadh le G-Rg3s air ais abairt GST.GST abairt (103.7 ± 15.5% anns a 'bhuidheann G-Rg3r agus 110 ± 11.1% anns a' bhuidheann G-Rg3s, p <0.05 agus p <0.001, fa leth, Fig. 6A, B, agus C).Chaidh gnìomhachd GST a mheasadh a’ cleachdadh pasgan measaidh gnìomhachd.Sheall na co-dhùnaidhean againn gu robh gnìomhachd GST nas àirde aig a’ bhuidheann làimhseachadh measgachadh an coimeas ris a’ bhuidheann B(a)P a-mhàin (96.3 ± 6.6% vs. 35.7 ± 7.8% anns a’ bhuidheann G-Rg3r vs. 92.3 ± 6.5 anns a’ bhuidheann G-Rg3r ).% vs 35.7 ± 7.8% anns a’ bhuidheann G-Rg3s, p <0.001, Figear 6D).
Cur an cèill GST agus Nrf2 ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3.(A) A’ lorg abairt GST le blotting an Iar.(B) Iomradh cainneachdail de GST ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3r.(C) Iomradh cainneachdail de GST ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3s.(D) Gnìomhachd GST ann an ceallan hEL air a làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3.(E) A’ lorg abairt Nrf2 le blotting an Iar.(F) abairt cainneachdail de Nrf2 ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3r.(G) abairt cainneachdail de Nrf2 ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B(a)P agus G-Rg3s.Tha dàta air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach de cho-dhùnaidhean trì-fhillte.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Gus soilleireachadh a dhèanamh air na slighean a tha an sàs ann an casg G-Rg3-meadhanaichte de tumorigenesis air a bhrosnachadh le B (a) P, chaidh abairt Nrf2 a mheasadh le blotting an Iar.Mar a chithear ann am Figearan 6E, F, G, an coimeas ris a’ bhuidheann smachd, cha deach ach an ìre de Nrf2 anns a’ bhuidheann làimhseachaidh B(a)P sìos;ge-tà, an coimeas ris a’ bhuidheann làimhseachaidh B(a)P, chaidh ìrean B(a) Nrf2 anns a’ bhuidheann PG-Rg3 àrdachadh (106 ± 9.5% airson G-Rg3r vs. 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% airson G-Rg3r vs. 41 ± 9.8% airson G-Rg3s, p < 0.01).
Dhaingnich sinn àite casg Nrf2 le bhith a’ cuir stad air abairt Nrf2 a’ cleachdadh RNA eadar-theachd beag sònraichte (siRNA).Chaidh leagail Nrf2 a dhearbhadh le blotting an Iar (Fig. 7A, B).Mar a chithear ann am Figearan 7C, D, lean co-làimhseachadh cheallan hEL le B(a)P agus G-Rg3 gu lùghdachadh anns an àireamh de luchd-cuir BPDE-DNA (1.47 ± 0.21) an coimeas ri làimhseachadh le B(a)P leis fhèin anns a’ bhuidheann siRNA smachd.) Bha G-Rg3r aig 4.13 ± 0.49, bha G-Rg3s 1.8 ± 0.32 agus 4.1 ± 0.57, p <0.01).Ach, chaidh cuir às do bhuaidh bacaidh G-Rg3 air cruthachadh BPDE-DNA le leagail Nrf2.Anns a 'bhuidheann siNrf2, cha robh eadar-dhealachadh mòr ann an cruthachadh BPDE-DNA adduct eadar co-làimhseachadh B(a)P agus G-Rg3 agus làimhseachadh B(a)P a-mhàin (3.0 ± 0.21 airson G-Rg3r vs. 3.56 ± 0.32 ).airson G-Rg3r an aghaidh 3.6 airson G-Rg3s an aghaidh ±0.45 an aghaidh 4.0±0.37, p> 0.05).
Buaidh leagail Nrf2 air cruthachadh BPDE-DNA adduct ann an ceallan hEL.(A) Chaidh leagail Nrf2 a dhearbhadh le blotting an Iar.(B) Tomhas air dian bann Nrf2.(C) Buaidh leagail Nrf2 air ìrean giùlain BPDE-DNA ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B (a) P agus G-Rg3r.(D) Buaidh leagail Nrf2 air ìrean giùlain BPDE-DNA ann an ceallan hEL air an làimhseachadh le B (a) P agus G-Rg3.Tha dàta air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach de cho-dhùnaidhean trì-fhillte.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Rinn an sgrùdadh seo measadh air na buaidhean casgach a bha aig diofar earrannan ginseng dearg air modal lucha de aillse sgamhain air a bhrosnachadh le B(a) P, agus lughdaich làimhseachadh KRGB eallach tumhair gu mòr.Leis gu bheil an susbaint as àirde aig G-Rg3 anns a’ chuibhreann ginseng seo, chaidh sgrùdadh a dhèanamh air àite cudromach an ginsenoside seo ann a bhith a’ cur bacadh air tumorigenesis.Lùghdaich an dà chuid G-Rg3r agus G-Rg3 (dà epimers de G-Rg3) eallach tumhair gu mòr ann am modail luchag de aillse air a bhrosnachadh le B(a) P.Bidh G-Rg3r agus G-Rg3 a’ toirt buaidh an aghaidh aillse le bhith a’ toirt a-steach apoptosis de cheallan tumhair21, a’ cur bacadh air fàs tumhair22, a’ cur an grèim cearcall cealla23 agus a’ toirt buaidh air angiogenesis24.Thathas cuideachd air sealltainn gu bheil G-Rg3 a’ bacadh metastasis ceallach25, agus chaidh comas G-Rg3 gus buaidhean chemotherapy agus radiotherapy a leasachadh a chlàradh26,27.Sheall Poon et al gum faodadh làimhseachadh G-Rg3 na buaidhean genotoxic aig B(a) P28 a lughdachadh.Tha an sgrùdadh seo a’ sealltainn comas teirpeach G-Rg3 ann a bhith ag amas air moileciuilean carcinogenic àrainneachd agus casg aillse.
A dh’ aindeoin an deagh chomas prophylactic, tha droch bhith-ruigsinneachd beòil ginsenosides na dhùbhlan airson cleachdadh clionaigeach de na moileciuilean sin.Sheall mion-sgrùdadh cungaidh-leigheis air rianachd beòil de ginsenosides ann am radain gu bheil a bhith-ruigsinneachd fhathast nas ìsle na 5%29.Sheall na deuchainnean sin, às deidh na h-ùine làimhseachaidh 20-seachdain, nach deach ach ìrean fala Rg5 sìos.Ged a tha an uidheamachd bunaiteach de dhroch bhith-ruigsinneachd fhathast ri shoilleireachadh, thathas den bheachd gu bheil P-gp an sàs ann an sruthadh ginsenosides.Sheall an obair seo airson a’ chiad uair gu bheil rianachd verapamil, neach-bacadh P-gp, a’ meudachadh bith-ruigsinneachd beòil G-Rg3r agus G-Rg3s.Mar sin, tha an co-dhùnadh seo a’ nochdadh gu bheil G-Rg3r agus G-Rg3s ag obair mar fho-stratan de P-gp gus an efflux aige a riaghladh.
Tha an obair seo a’ sealltainn gu bheil làimhseachadh measgachadh le verapamil a’ meudachadh bith-ruigsinneachd beòil G-Rg3 ann am modal lucha de aillse sgamhain.Tha an co-dhùnadh seo a’ faighinn taic bho bharrachd còmhdhail thar-ghnèitheach intestinal de G-Rg3 air bacadh P-gp, agus mar sin a’ meudachadh an in-ghabhail.Sheall measaidhean ann an ceallan Caco2 gun do lughdaich làimhseachadh verapamil an sruthadh G-Rg3r agus G-Rg3s fhad ‘s a bha e a’ leasachadh permeability membran.Tha sgrùdadh le Yang et al.Tha sgrùdaidhean air sealltainn gu bheil làimhseachadh le cyclosporine A (bacadh P-gp eile) ag àrdachadh bith-ruigsinneachd ginsenoside Rh2 bho luach bun-loidhne de 1% 20 gu còrr air 30%.Sheall coimeasgaidhean ginsenosides K agus Rg1 cuideachd toraidhean co-chosmhail30,31.Nuair a chaidh verapamil agus cyclosporin A a cho-rianachd, chaidh an sgaoileadh de K compound ann an ceallan Caco-2 a lughdachadh gu mòr bho 26.6 gu nas lugha na 3, fhad ‘s a chaidh na h-ìrean intracellular aige suas 40-fold30.Ann an làthaireachd verapamil, mheudaich ìrean Rg1 ann an ceallan epithelial sgamhain radan, a 'moladh àite airson P-gp ann an ginsenoside efflux, mar a chithear le Meng et al.31.Ach, cha robh an aon bhuaidh aig verapamil air sruthadh cuid de ginsenosides (leithid Rg1, F1, Rh1 agus Re), a’ nochdadh nach eil fo-stratan P-gp a’ toirt buaidh orra, mar a chithear le Liang et al.32.Dh’ fhaodadh an amharc seo a bhith co-cheangailte ri com-pàirt luchd-còmhdhail eile agus structaran ginsenoside eile.
Chan eil e soilleir dè an dòigh anns a bheil buaidh casg G-Rg3 air aillse.Tha sgrùdaidhean roimhe air sealltainn gu bheil G-Rg3 a’ cur casg air milleadh DNA agus apoptosis le bhith a’ lughdachadh cuideam oxidative agus sèid16,33, a dh’ fhaodadh a bhith mar an inneal bunaiteach airson casg a chuir air tumorigenesis air a bhrosnachadh le B (a) P.Tha cuid de na h-aithisgean a’ nochdadh gum faodar genotoxicity air adhbhrachadh le B(a)P a lughdachadh le bhith ag atharrachadh enzyman ìre II gus BPDE-DNA34 a chruthachadh.Is e einnsean àbhaisteach ìre II a th’ ann an GST a chuireas casg air cruthachadh BPDE-DNA le bhith a’ brosnachadh ceangal GSH ri BPDE, agus mar sin a’ lughdachadh milleadh DNA air adhbhrachadh le B (a) P35.Tha na co-dhùnaidhean againn a’ sealltainn gu bheil làimhseachadh G-Rg3 a’ lughdachadh cytotoxicity air a bhrosnachadh le B(a) P-agus cruthachadh adduct BPDE-DNA ann an ceallan hEL agus ag ath-nuadhachadh faireachdainn GST agus gnìomhachd in vitro.Ach, bha na buaidhean sin neo-làthaireach às aonais Nrf2, a 'moladh gu bheil G-Rg3 a' toirt buaidh cytoprotective tro shlighe Nrf2.Tha Nrf2 na phrìomh fheart tar-sgrìobhaidh airson einnseanan detoxification ìre II a bhrosnaicheas glanadh xenobiotics36.Bidh gnìomhachadh slighe Nrf2 ag adhbhrachadh cytoprotection agus a’ lughdachadh milleadh clò37.A bharrachd air an sin, tha grunn aithisgean air taic a thoirt do dhreuchd Nrf2 mar shùghadair tumhair ann an carcinogenesis38.Tha an sgrùdadh againn a’ sealltainn gu bheil àite riaghlaidh cudromach aig inntrigeadh slighe Nrf2 le G-Rg3 ann an genotoxicity air a bhrosnachadh le B (a) le bhith ag adhbhrachadh detoxification B (a) P le bhith a’ cur an gnìomh enzyman ìre II, agus mar sin a’ cur bacadh air a’ phròiseas tumorigenesis.
Tha an obair againn a’ nochdadh comas ginseng dearg ann a bhith a’ cur casg air aillse sgamhain air a bhrosnachadh le B(a)P ann an luchagan tro bhith an sàs cudromach aig ginsenoside G-Rg3.Tha droch bhith-ruigsinneachd beòil a’ mholacile seo a’ cur bacadh air a chleachdadh clionaigeach.Ach, tha an sgrùdadh seo a’ sealltainn airson a’ chiad uair gu bheil G-Rg3 na fho-strat de P-gp, agus tha rianachd neach-dìon P-gp a’ meudachadh bith-ruigsinneachd G-Rg3 in vitro agus in vivo.Bidh G-Rg3 a’ lughdachadh cytotoxicity air a bhrosnachadh le B(a) le bhith a’ riaghladh slighe Nrf2, a dh’ fhaodadh a bhith na inneal a dh’ fhaodadh a bhith na dhòigh dìon.Tha an sgrùdadh againn a’ dearbhadh comas ginsenoside G-Rg3 airson casg agus làimhseachadh aillse sgamhain.
Chaidh luchainn A/J boireann sia-seachdainean (20 ± 1 g) agus radain fireann Wistar fireann 7-seachdain (250 ± 20 g) fhaighinn bho The Jackson Laboratory (Bar Harbour, USA) agus bho Institiùd Ainmh-eòlais Wuhan.Oilthigh (Wuhan, Sìona).Thug Ionad Cruinneachadh Cultar Seòrsa Sìneach (Wuhan, Sìona) ceallan Caco-2 agus hEL dhuinn.Tha Sigma-Aldrich (St. Louis, USA) na thùs de B(a)P agus tricaprine.Chaidh ginsenosides purraichte G-Rg3r agus G-Rg3s, dimethyl sulfoxide (DMSO), pasgan measaidh iomadachaidh CellTiter-96 (MTS), verapamil, meadhan riatanach as ìsle (MEM), agus serum bò fetal (FBS) a cheannach bho Chengdu Must Bio-Technology .Co., Earr.(Chengdu, Sìona).Chaidh pasgan beag DNA QIAamp agus pasgan ELISA adduct BPDE-DNA a cheannach bho Qiagen (Stanford, CA, USA) agus Cell Biolabs (San Diego, CA, USA).Chaidh pasgan measaidh gnìomhachd GST agus pasgan measaidh pròtain iomlan (modh àbhaisteach BCA) a cheannach bho Solarbio (Beijing, Sìona).Tha a h-uile earrann ginseng dearg air a stòradh ann an obair-lann Mingyu 7. Tha Oilthigh Baistidh Hong Kong (Hong Kong, Sìona) agus Ionad Ailse Korea (Seoul, Korea) nan stòran malairteach de chuibhreann CRG agus diofar earrannan ginseng dearg de dhiofar thùsan Korean (a ’toirt a-steach KRGA, KRGB). agus KRGC).Tha ginseng dearg air a dhèanamh bho fhreumhan ginseng ùr 6-bliadhna.Gheibhear earrann ginseng dearg le bhith a’ nighe ginseng le uisge trì tursan, an uairsin a’ dìreadh an earrann uisgeach, agus mu dheireadh a’ tiormachadh aig teòthachd ìosal gus pùdar ginseng fhaighinn.Chaidh antibodies (anti-Nrf2, anti-GST, agus β-actin), immunoglobulin an-aghaidh coineanach peroxidase-conjugated G (IgG), inneal tar-chuir, siRNA smachd, agus siRNA Nrf2 a cheannach bho Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA). .), Na Stàitean Aonaichte).
Bha ceallan Caco2 agus hEL air an àiteachadh ann an soithichean cultar cealla 100 mm2 le MEM anns an robh 10% FBS aig 37 ° C ann an àile tais de 5% CO2.Gus buaidh suidheachaidhean làimhseachaidh a dhearbhadh, chaidh ceallan hEL a thoirt a-steach le diofar chruinneachaidhean de B (a) P agus G-Rg3 ann am MEM airson 48 h.Faodar ceallan a mhion-sgrùdadh no a chruinneachadh gus earrannan gun cheallan ullachadh.
Chaidh a h-uile deuchainn aontachadh le Comataidh Beusachd Bheathaichean Deuchainneach Colaiste Leigheil Tongji, Oilthigh Saidheans agus Teicneòlais Huazhong (Ceadachadh Àir. 2019; Clàradh Àireamh 4587TH).Chaidh a h-uile deuchainn a dhèanamh a rèir stiùiridhean agus riaghailtean buntainneach, agus chaidh an sgrùdadh a dhèanamh a rèir stiùiridhean Rannsachadh Bheathaichean: Aithris air Deuchainnean In Vivo (ARRIVE).Chaidh luchagan A / J ochd seachdainean a dh’ aois a thoirt a-steach an-toiseach le B (a) P ann am fuasgladh tricaprine (100 mg / kg, 0.2 ml).Às deidh seachdain, chaidh na luchagan a roinn air thuaiream ann am buidhnean smachd agus buidhnean làimhseachaidh eadar-dhealaichte, luchagan 15 anns gach buidheann, agus gan giùlan uair san latha.Às deidh 20 seachdainean de làimhseachadh, chaidh beathaichean a thoirt seachad le CO2 asphyxia.Chaidh na sgamhanan a chruinneachadh agus an suidheachadh airson 24 uairean.Chaidh an àireamh de tumhair uachdarach agus meudan tumhair fa leth a thomhas airson gach sgamhan fo mhiocroscop sgaoilidh.Chaidh tuairmsean meud tumhair (V) a thomhas a’ cleachdadh an abairt a leanas: V (mm3) = 4 / 3πr3, far a bheil r trast-thomhas an tumhair.Bha an t-suim lom de gach meud tumhair ann an sgamhanan luchainn a’ riochdachadh meud an tumhair iomlan, agus bha an tomhas tumhair iomlan cuibheasach anns gach buidheann a’ riochdachadh eallach an tumhair.Chaidh sampallan fala slàn agus caolan a chruinneachadh agus a stòradh aig −80 ° C airson dearbhadh UPLC-MS/MS.Chaidh serum a chruinneachadh agus chaidh anailisiche ceimigeachd fèin-ghluasadach a chleachdadh gus sgrùdadh a dhèanamh air ìrean alanine aminotransferase (ALT) agus serum creatinine (Cr) gus gnìomhachd grùthan is dubhagan a mheasadh.
Chaidh sampallan cruinnichte a thoirt air falbh bho stòradh fuar, air an leaghadh, air an tomhas agus air an cur ann am pìoban mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd.Chaidh 0.5 μM phlorizin (inbhe a-staigh) a chur ris ann am fuasgladh methanol 0.8 ml.Chaidh an clò an uairsin a cho-sheòrsachadh le bhith a’ cleachdadh Tissue-Tearor agus an uairsin chaidh an homogenate a ghluasad gu tiùb microcentrifuge 1.5 ml.Tha am measgachadh air a centrifuged aig 15500 rpm airson 15 mionaidean.An dèidh a bhith a 'toirt air falbh 1,0 ml de supernatant, tioram le naitridean.Chaidh dà cheud microliters de methanol a chleachdadh airson faighinn seachad air.Tha an fhuil air a chruinneachadh agus air a làimhseachadh air aon loidhne agus air a chleachdadh mar iomradh airson a h-uile tomhas.
Chaidh pleitean Transwell 24-tobar a shìolachadh le ceallan 1.0 × 105 Caco-2 gach tobar gus measadh a dhèanamh air an àrdachadh a dh’ fhaodadh a bhith aig còmhdhail G-Rg3 le bhith a ’cur verapamil ris.Às deidh 3 seachdainean de chultar, chaidh ceallan a nighe le HBSS agus an ro-innse aig 37 ° C.Chaidh 400 μL de 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s, no measgachadh le 50 no 100 μM verapamil) a chuir a-steach air taobh basolateral no apical an monolayer, agus chaidh 600 μL de fhuasgladh HBSS a chuir ris an fhear eile. taobh.Cruinnich 100 µl de mheadhan cultair aig na h-amannan ainmichte (0, 15, 30, 45, 60, 90 agus 120 mionaidean) agus cuir 100 µl de HBSS ris gus an leabhar seo a dhèanamh suas.Bha sampaill air an stòradh aig −4 ° C gus an lorgadh iad le UPLC-MS/MS.Tha an abairt Papp = dQ / (dT × A × C0) air a chleachdadh gus tomhas a dhèanamh air an permeability aon-stiùiridh apical agus basolateral agus a chaochladh (Pa-b agus Pb-a, fa leth);Is e dQ / dT an t-atharrachadh ann an dùmhlachd, is e A (0.6 cm2) farsaingeachd uachdar an monolayer, agus is e C0 a’ chiad chruinneachadh tabhartais.Tha an co-mheas efflux air a thomhas mar Pb-a/Pa-b, a tha a’ riochdachadh ìre efflux an druga sgrùdaidh.
Bha radain fireann Wistar air an fastadh airson 24 uair, ag òl uisge a-mhàin, agus air an anesthetized le in-stealladh intravenous de fhuasgladh pentobarbital 3.5%.Tha deireadh an duodenum aig an tiùb silicone intubated mar an t-slighe a-steach agus deireadh an ileum mar an t-slighe a-mach.Cleachd pumpa peristaltic gus an caolas a phumpadh le 10 µM G-Rg3r no G-Rg3s ann an HBSS isotonic aig ìre sruth de 0.1 ml / min.Chaidh buaidh verapamil a mheasadh le bhith a’ cur 50 μM no 100 μM den todhar gu 10 μM G-Rg3r no G-Rg3s.Chaidh UPLC-MS / MS a dhèanamh air earrannan perfusion a chaidh a chruinneachadh aig puingean ùine 60, 90, 120, agus 150 mionaidean às deidh tòiseachadh perfusion.Tha an àireamh sa cheud de neo-làthaireachd air a thomhas leis an fhoirmle % in-ghabhail = (1 – Cout/Cin) × 100%;tha an dùmhlachd de G-Rg3 aig an t-slighe a-mach agus a-steach air a chuir an cèill le Cout agus Cin, fa leth.
Chaidh ceallan hEL a shìolachadh ann am pleitean 96-tobar aig dùmhlachd de cheallan 1 × 104 gach tobar agus air an làimhseachadh le B (a) P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) no G-Rg3 air a sgaoileadh ann an DMSO .Chaidh na drogaichean an uairsin a lagachadh le meadhan cultair gu diofar chruinneachaidhean (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) thairis air 48 uairean.A’ cleachdadh pasgan measaidh MTS a bha ri fhaighinn gu malairteach, bha ceallan fo smachd protocol àbhaisteach agus an uairsin air an tomhas le bhith a’ cleachdadh leughadair microplate aig 490 nm.Chaidh ìre comas obrachaidh cealla nam buidhnean a chaidh a cho-làimhseachadh le B(a)P (10 μM) agus G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) a mheasadh a rèir an dòigh gu h-àrd agus an coimeas ris a’ bhuidheann gun làimhseachadh.
Chaidh ceallan hEL a shìolachadh ann am pleitean 6-tobar aig dùmhlachd de cheallan 1 × 105 / gu math agus air an làimhseachadh le 10 μMB (a) P an làthair no às aonais 10 μM G-Rg3.Às deidh 48 uair de làimhseachadh, chaidh DNA a thoirt a-mach à ceallan hEL a ’cleachdadh an QIAamp DNA Mini Kit a rèir protocol an neach-dèanamh.Chaidh cruthachadh BPDE-DNA adducts a lorg a’ cleachdadh pasgan ELISA adduct BPDE-DNA.Chaidh ìrean coimeasach de BPDE-DNA adduct a thomhas a’ cleachdadh leughadair microplate le bhith a’ tomhas sùghadh aig 450 nm.
Chaidh ceallan hEL a shìolachadh ann am pleitean 96-tobar aig dùmhlachd de cheallan 1 × 104 gach tobar agus air an làimhseachadh le 10 μMB (a) P às aonais no làthaireachd 10 μM G-Rg3 airson 48 h.Chaidh gnìomhachd GST a thomhas a’ cleachdadh pasgan measaidh gnìomhachd GST malairteach a rèir protocol an neach-dèanamh.Chaidh gnìomhachd GST coimeasach a thomhas le sùghadh aig 450 nm a’ cleachdadh leughadair microplate.
Chaidh ceallan hEL a nighe le PBS fuar-deighe agus an uairsin a chuir a-steach le bhith a’ cleachdadh bufair assay radioimmunoprecipitation anns an robh luchd-dìon protease agus luchd-dìon phosphatase.Às deidh tomhas pròtain a’ cleachdadh pasgan measaidh pròtain iomlan, chaidh 30 μg de phròtain anns gach sampall a sgaradh le 12% SDS-PAGE agus a ghluasad gu membran PVDF le electrophoresis.Chaidh bileagan a bhacadh le bainne sgith 5% agus an toirt a-steach le prìomh antibodies thar oidhche aig 4 ° C.Às deidh goir le antibodies àrd-sgoile le horseradish peroxidase-conjugated, chaidh ath-bheachdan chemiluminescence leasaichte a chuir ris gus an comharra ceangail fhaicinn.Chaidh dian gach còmhlan pròtain a thomhas a’ cleachdadh bathar-bog ImageJ.
Chaidh bathar-bog GraphPad Prism 7.0 a chleachdadh gus an dàta gu lèir a sgrùdadh, air a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach.Chaidh eadar-dhealachadh eadar buidhnean làimhseachaidh a mheasadh a’ cleachdadh deuchainn t Oileanach no mion-sgrùdadh aon-shligheach air caochlaidheachd, le luach P <0.05 a’ nochdadh cudromachd staitistigeil.
Tha a h-uile dàta a gheibhear no a chaidh a sgrùdadh tron sgrùdadh seo air a ghabhail a-steach san artaigil foillsichte seo agus faidhlichean fiosrachaidh leasachail.
Torre, LA, Siegel, RL agus Jemal, A. Staitistig aillse sgamhain.adverb.Dh'fhalbh.leigheas.bith-eòlas.893, 1–19 (2016).
Hecht, S. Carcinogens tombaca, na bith-chomharran aca agus aillse air a bhrosnachadh le tombaca.Nat.Seaplain aillse.3, 733–744 (2003).
Phillips, DH agus Venitt, S. Bidh DNA agus pròtain a’ giùlan ann am figheagan daonna mar thoradh air a bhith fosgailte do smoc tombaca.eadar-nàiseantachd.J. Ailse.131, 2733–2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA agus Yu M. Buaidh Houttuynia cordata agus silibinin air tumorigenesis sgamhain air a bhrosnachadh le benzo(a) pyrene ann an luchagan A/J.Ailse 7, 1053–1057 (2005).
Tang, W. et al.Toradh nàdarra anticancer air a sgaradh bho stuthan leigheis Sìneach.giallan.leigheas.6, 27 (2011).
Yang, Y. et al.Èifeachdas polyphenon E, ginseng dearg, agus rapamycin air tumorigenesis sgamhain benzo (a) pyrene ann an luchagan A / J.Ailse 8, 52–58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS agus Yuan, KS Red, an sàs ann an leigheas aillse.giallan.J. Nutt.leigheas.14, 7–16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS agus Gao, L. Ginsenosides ann am freumhan agus duilleagan ginseng Ameireaganach.J. Agric.Ceimigeachd bìdh.44, 717–720 (1996).
Attele AS, Wu JA agus Yuan KS Pharmacology of ginseng: mòran phàirtean agus mòran bhuaidhean.bith-cheimigeachd.pharmacology.58, 1685–1693 (1999).
Ùine puist: Sultain-17-2023