Gratias tibi ago pro natura.com adire.Versio navigandi quam uteris habet subsidium CSS limitatum.Ad optimos eventus commendamus utendo recentiore versione navigatoris tui (vel de modo convenientiae in Internet Explorer convertendo).Interea, ut subsidia permanentia, situm sine graphide vel JavaScript ostendimus.
Red ginseng in medicina Asiatica tradita centum annis adhibita est.In hoc studio aestimavimus facultatem quattuor generum rubri ginseng (Sinensis rubri ginseng, Coreanica rubra ginseng A, Coreanica rubra ginseng B, Coreana rubra ginseng C) crevit in diversis regionibus ad prohibendum formationem et incrementum pulmonis carcinogenii effecerunt. tumores.Testa benzo (a)pyrene (B(a)P) in A/J gestata mures, et Coreanica rubra ginseng B inventa efficacissima est in minuendo tumore onus inter quattuor varietates rubrae ginseng.Praeterea contenta variarum ginsenosiderum (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 et Rg5) in quattuor excerptis rubris ginseng enucleavimus et invenimus Coreanum rubrum ginseng B habere. altissimos gradus ginsenoside Rg3 (G-Rg3), suggerens ut G-Rg3 in sua therapeutica efficacia primas partes agere possit.Hoc opus ostendit G-Rg3 relative humilis bioavailability habere.Attamen cum G-Rg3 cum inhibitore verapamil P-gp coadministrabatur, effluxus G-Rg3 in cellulas Caco-2 decrevit, rate intestinalis effusio G-Rg3 in rat exemplar aucta est, et G-Rg3 auctus est.In cellulis Caco-2, fluxus Rg3 decrescit, et gradus concentrationis Rg3 decrescit.G-Rg3 in intestino et plasmate augetur, eiusque facultas ad prohibendos tumores etiam aucta est in exemplari B(a)P tumorigenesis rats.Etiam invenimus G-Rg3 reduci B(a)P cytotoxicitatem et DNA formationem adductam in cellulis pulmonis humano, et expressionem actionemque Phase II enzymes per viam Nrf2 restituisse, quae ad potentiam actionis mechanismum referri potest. of G inhibitionis -Rg3..De tumoribus pulmonis eventu.Studium nostrum magnas partes pro G-Rg3 in nisl pulmonis tumoribus in mure exemplaribus demonstrat.Bioavailability oralis huius ginsenoside augetur per Nisl P-glycoprotein, sino moleculo ad anticancer effectus exerere.
Frequentissimum genus cancri pulmonis est non-parvus cellula pulmonis cancri (NSCLC), quae una e causis principalibus mortes cancri in Sinis et America Septentrionali est 1,2.Praecipuum elementum quod auget periculum promovendi cellulae pulmonis non parvae fumigans est.Fumus cigarette plus 60 carcinogenorum continet, inter benzo(a)pyrene(B(a)P), nitrosaminas, et isotopes radioactivos ex radon.3 Hydrocarbonum aromaticum polycyclicum B(a)P praecipue causa sunt toxicitatis in cigarette. fumum.Exposita ad B(a)P, cytochroma P450 convertit ad B(a)P-7,8-dihydrodiolum-9,10-epoxidum (BPDE), quod reagit cum DNA ad formandum BPDE-DNA adducunt 4. Accedit haec. adducit pulmonem tumorigenesis in muribus cum scaena tumore et histopathologia similia pulmonis humani tumores.Haec factura efficit B(a)P pulmonem cancrum adductum exemplar aptam rationem componendi cum proprietatibus anticanceribus possibilibus aestimandis.
Unum consilium fieri potest, ne progressionem cancri pulmonis in coetus summi periculi, praesertim smokers, est usus agentium chemopreventivorum ad progressionem laesionum intraepithelium neoplasticarum supprimendam, ac propterea subsequentem progressionem ad malignitatem impediendam.Studia animalium ostendunt varias agentes chemopreventivas efficacia esse.Nostra prior report7 movit effectus bonos praecavens rubri ginseng in cancro pulmonis.Haec herba per saecula in medicina ad vitam et sanitatem protrahendam in traditionalis Asiatica adhibita est, et documentum est effectus habere antitumorem.
Activum elementum ginseng ginsenoside est, quod ut compositi titulus ad qualitatem extractorum ginseng aestimandam adhibetur.Analysis quantitatis rudis extractorum ginsengorum typice involvit usum plurium ginsenosiderum, inter RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5, et Rc9,10.Ginsenosides parvam orci usum habent ob bioavailability oralis pauperrimae.Etsi mechanismus huius pauperis biovalilability non liquet, effluxus ginsenosiderum a P-glycoprotein (P-gp) 12 causa esse potest.P-gp unus e maximis transportatoribus effluxus est in cassette ATP ligaturae superfamilias transportator, qua energia ATP hydrolysis utitur ut substantias intracellulares in ambitum externum dimittat.P-gp portatores de more late distribuuntur in intestino, renibus, hepate et sanguine-cerebro obice13.P-gp partes criticas agit in effusio intestinali, et inhibitio P-gp auget effusio oralis et promptibilitas anticancri aliquorum medicamentorum 12,14.Exempla inhibitorum antea in litteris adhibita sunt verapamil et cyclosporinum A15.Hoc opus involvit systema murem condendo ad investigandum B(a)P-cancum pulmonem inductum, ad aestimandas facultates varias extractiones rubrae ginseng e Sinis et Corea ad malignitates afficiendas.Singula exposita sunt excerpta ad ginsenosides specificas quae carcinogenesis afficiunt.Verapamil tunc P-gp oppugnare solebat et bioavailability oralis et therapeuticae efficaciae ginsenosides cancri-machinae emendavit.
Mechanismus qua ginseng saponins operantur effectus medicinales in carcinogenesis lateat.Investigatio demonstravit varias ginsenosides DNA damnum carcinogenorum minuere posse, reducendo accentus oxidative et enzymes activum tempus II detoxificatione, quo minus damnum cell.Glutathione S-transferase (GST) phase II typicum enzyme est, quod damnum per carcinogens 17 DNA reducere requiritur.Erythroide 2 nuclei factoris actis 2 (Nrf2) maximus est factor transcriptionis qui redox homeostasim moderatur et expressionem Phase II enzymes et cytoprotective antioxidant responsa 18 facit.Studium nostrum etiam effectus ginsenosides identificandi in reducendo B(a)P cytotoxicitatem et BPDE-DNA formationem adducendam examinavit, necnon periodum II enzymes inducendo, tramitem Nrf2 modulans in cellulis normalibus pulmonis.
Instauratio muris exemplar B(a)P cancer inductum consentaneum est cum priore opere.Figura 1A ostendit experimentalem rationem tractationis muris cancri 20-hebdomadis exemplar inductum a B(a)P, aqua (imperium), extractum ginseng rubeum (CRG), extractum Coreanum rubrum ginseng A (KRGA), et Coreanum rubrum ginseng.Extract B (KRGB) et Coreanum Rubrum Ginseng Extract C (KRGC).Post 20 septimanas curationis rubrae ginseng, mures Suffocati CO2 immolabantur.Figura 1B tumores pulmonis macroscopicos ostendit in animalibus variis rubris ginsengis tractatis, et Figura 1C lumen repraesentativum ostendit micrograph tumoris exempli.Tumor onus animalium KRGB curatorum (1.5± 0.35) inferior erat quam animalium moderatio (0.82 ± 0.2, P < 0.05), ut in Figura 1D ostensum est.Mediocris gradus inhibitionis tumoris onus erat 45%.Aliae extractiones rubrae ginseng probatae non ostenderunt tam significantes mutationes in tumore oneris (P> 0.05).Nullae effectus laterales conspicui observati sunt in exemplari muris curationis ginseng rubentis per XX septimanas, nulla corporis mutatione (notitia not exhibita) nec toxicitas hepatis vel renis (Figura 1E,F).
Extractum rubrum ginseng progressionem pulmonis tractat in A/J murium.(a) Experimental design.(B) Magnae pulmonis tumores in muris exemplar.Indicati sagittis tumores.a: Chinese red ginseng group.b: group A of Coreanica rubra ginseng.c: Coreanica rubra ginseng coetus B. d: Coreanica rubra ginseng coetus C. d: Imperium coetus.(C) Levis micrographus pulmonis tumorem ostendens.Magnificatio: 100. b: 400. (D) Tumor onus in globus rubra ginseng extract.(e) Plasma gradus hepatis enzyme ALT.(F) Plasma gradus enzyme renalis Cr.Data sunt signa declinationis vexillum medium ±.*P <0.05.
Rubrae ginseng excerpta, quae in hoc studio notata sunt, per chromatographiam liquidam ultra-faciendi tandem massa spectrometriae (UPLC-MS/MS) explicantur ad quantitare sequentes ginsenosides: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3 , Rh2, F1, Rk1 et Rg5.Conditiones UPLC et MS ad analytas metiendas in relatione praecedenti descripta sunt.UPLC-MS/MS chromatogrammata quattuor extractorum rubri ginseng in Figura 2A monstrantur.Differentiae notabiles fuerunt in contentorum totali ginsenoside, cum summa ginsenoside contenta in CRG (590.27 ± 41.28 μmol/L) (Figura 2B).Cum singulas ginsenosides aestimare (Figura 2C), KRGB ostendit summum gradum G-Rg3 aliis ginsenosides comparari (58.33 ± 3.81 μmol/L pro G-Rg3s et 41.56 ± 2.88 μmol/L pro G-Rg3r).L).ginseng genus rubeum (P < 0.001).G-Rg3 occurrit ut par stereoisomersorum G-Rg3r et G-Rg3s, quae differunt positione globi hydroxyli in 20 carbonii (Fig. 2D).Eventus indicant G-Rg3r vel G-Rg3 potentiam magni momenti habere in B(a)P exemplar cancri mus.
Saginarium ginsenoside in variis rubicundis ginseng excerptis.(A) UPLC-MS/MS chromatogrammata quattuor extractorum rubri ginseng.(B) Aestimatio contentorum totali ginsenoside in excerptis indicatis.(C) Deprehensio singularum ginsenosiderum in excerptis intitulatis.(D) Structures ginsenoside stereoisomers G-Rg3r et G-Rg3s.Data exprimuntur ut mensurae mediae ± declinationis determinationum triplicatae.***P <0.001.
In UPLC-MS/MS studiorum quantitatem ginsenosiderum in intestinalibus et sanguineis exemplis post XX septimanas curationis requirebat.Curatio cum KRGB praesentiam tantum 0.0063 ± 0.0005 μg/ml Rg5 in sanguine ostendit.Nullae reliquiae ginsenoside detectae sunt, significans bioavailbilitatem oris pauperem et ideo detectionem ad has ginsenosides redactas.
Colonia adenocarcinoma linea cellula Caco-2 est morphologice et biochemice similis cellulis epithelialibus intestinalibus humanis, demonstrans utilitatem suam in perpendendis enterocytis transvehendis trans claustrum intestinalem epithelialem.Haec analysis in priori studio 20 fundata est.Figurae 3A, B, C, D, E, F repraesentativas imagines transcellulares G-Rg3r et G-Rg3 exhibentes usus exemplaris Caco-2 monolayi.Transcellular oneraria G-Rg3r seu G-Rg3 trans Caco-2 monolayers e basolateral ad latus apicale (Pb-a) erat insigniter altior quam ab apicali ad latus basolateralis (Pa-b).Pro G-Rg3r, medium Pa-b valor erat 0.38 ± 0.06, qui auctus est ad 0.73 ± 0.06 post curationem cum 50 μmol/L verapamil et ad 1.14 ± 0.09 post curationem cum 100 μmol/L verapamil (p <0.01 et 0.001; respectively;3A).Animadversiones pro G-Rg3 secutae sunt simile exemplar (Fig. 3B), et eventus demonstraverunt tractationem verapamil auctam onerariam G-Rg3r et G-Rg3.Curatio Verapamil etiam consecuta est in diminutione significativa in mediis Pb-a et G-Rg3r et G-Rg3s effluxis rationibus (Figura 3C, D, E, F), significans curatio verapamil ginsenoside contentum in cellulis Caco-2 effluxis reducere..
Transcellularium G-Rg3 in Caco-2 monolayers et intestinalis effusio in perfusionis ratae primordium.(a) Pa-b valor globi G-Rg3r in Caco-2 monolayer.(b) Pa-b valor G-Rg3s circulorum in Caco-2 monolayer.(c) Pb value of G-Rg3r group in Caco-2 monolayer.(d) Pb valor G-Rg3s circulorum in Caco-2 monolayer.(e) Rationem cede G-Rg3r circulorum in Caco-2 monolayer.(F) Rationem cede circulorum G-Rg3 in Caco-2 monolayer.(G) Recipis effusio intestinorum G-Rg3r in perfusione primordium in muribus.(H) Recipis effusio intestinorum G-Rg3 in perfusione primordium in muribus.Permeabilitas et effusio sine verapamil additamento comparata sunt.Data sunt signa media ± deviationis vexillum quinque experimentorum independentium.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Congruunt cum priore work20, orthotopica perfusio intestinorum muribus fiebat ut determinaret utrum effusio G-Rg3 in intestino post curationem verapamil augeatur.Figurae 3G, H ostendunt perfusionem repraesentativam pertentare ad aestimandas recipis effusio intestinalis G-Rg3r et G-Rg3 in muribus exemplaribus cancri infra tempora superiora.Recipis initialis debilium G-Rg3r susceptio circiter 10% aucta ad plus quam 20% post curationem cum 50 µM verapamil et plus quam 25% post curationem cum 100 μM verapamili.Item, G-Rg3, qui initialem uptationem 10% habuit, apicem plus quam 20% ostendit post curationem cum 50 µM verapamil et fere 30% post curationem cum 100 μM verapamil, suggerens inhibitionem P-gp per verapamil augere. intestinorum effusio G-Rg3 in museis exemplar cancri pulmonis.
Secundum methodum superiorem, B(a)P exemplum cancri mures effecerunt passim in sex circulos divisi, ut in Figura 4A ostensum est.Nulla significant pondus damnum vel signa toxicitatis clinicae observata sunt in tractatione coetus G-Rg3 comparati ad regimen coetus (notitia not exhibita).Post 20 septimanas curationis pulmonis cuiusque muris collecti sunt.Figura 4B tumores pulmonis macroscopicos in muribus in coetus supra tractandi ostendit, et figura 4C lumen repraesentativum tumoris repraesentativi ostendit.Quoad onus tumoris in utroque coetu (fig. 4D), valores mures cum G-Rg3r et G-Rg3s tractati fuerunt 0.75 ± 0,29 mm3 et 0.81 ± 0,30 mm3, respective, dum valores pro G Muribus tractati sunt. cum -Rg3s erant 1.63 respective ± 0.40 mm3.mures regere (p < 0.001), significans curationem G-Rg3 in murium tumorem redegisse.Administratio verapamili ulterius hanc reductionem auxit: valores in verapamil+ G-Rg3r mures decreverunt ab 0.75 ± 0,29 mm3 ad 0.33 ± 0.25 mm3 (p < 0.01), et valores pro verapamil+ ab 0.81 ± 0,30 mm3 ad 0.29 ± 0.21 decrescentes. mm3 in G. -Rg3s-mures affectos (p < 0.05), significans verapamilum augere effectum inhibitorium G-Rg3 super tumorigenesis.Tumor onus nullas differentias significantes ostendit inter coetus moderamen et coetus verapamil, coetus G-Rg3r et coetus G-Rg3s, ac verapamil+G-Rg3r coetus et verapamil+G-Rg3s coetus.Praeterea notabilis toxicitates iecoris vel renis non erant cum curationibus aestimandis (Figura 4E,F).
Tumor onus post curationem G-Rg3 et plasma vel intestinorum G-Rg3r et G-Rg3 gradus in coetibus indicatis.(a) Experimental design.(B) Macroscopic tumores in museis exemplaribus.Indicati sagittis tumores.a: G-Rg3r.b: G-Rg3s.c: G-Rg3r in compositione cum verapamil.d: G-Rg3 in compositione cum verapamil.d: Verapamil.-e: imperium.(C) Micrographium opticum tumoris ad magnificationem.Responsio: 100x.b: 400X.(D) Effectus G-Rg3 + verapamil curationis onus tumoris in A/J murium.(e) Plasma gradus hepatis enzyme ALT.(F) Plasma gradus enzyme renalis Cr.(G) Plasma gradus G-Rg3r vel G-Rg3 indicatarum sodalitatum.(H) Gradus G-Rg3r seu G-Rg3s in intestinis sodalitatum indicatarum.Data exprimuntur ut mensurae mediae ± declinationis determinationum triplicatae.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
G-Rg3 gradus in B(a)P exemplar cancri murium inducti aestimati sunt ab UPLC-MS/MS post tempus curationum XX hebdomadarum secundum modum sectionis Methodi descriptum.Figurae 4G et H plasma et intestinalia G-Rg3 ostendunt, respective.Plasma G-Rg3r gradus 0.44 ± 0.32 μmol/L erant et ad 1.17 ± 0.47 μmol/L aucti sunt administratio verapamili (p < 0.001), intestinorum G-Rg3r gradus 0.53 ± 0.08 µg/l erant.Composita cum verapamil, g augetur ad 1.35 ± 0.13 μg/g (p < 0.001).Pro G-Rg3, eventus exemplum simile secutus est, significans verapamil curationem bioavailability oralis G-Rg3 in muribus A/J augere.
Cellula viability primordium adhibita est aestimare cytotoxicitatem B(a)P et G-Rg3 in cellulis HEL.Cytotoxicitas inducta B(a)P in hEL cellulis ostenditur in Figura 5A, dum proprietates nontoxicae G-Rg3r et G-Rg3 in figuris 5A et 5B ostenduntur.5B, C. Ad cytoprotectivum effectum G-Rg3, B(a)P aestimandum, variis concentrationis G-Rg3r vel G-Rg3 in cellulas HEL administratum est.Ut ostenditur in Figura 5D, G-Rg3r ad collectiones 5 μM, 10 μM, et 20 µM restituta cellula viability ad 58.3%, 79.3%, et 77.3%, respective.Similes eventus etiam in Circulo G-Rg3s videri possunt.Cum concentratione G-Rg3s essent 5 µM, 10 µM et 20 µM, cellula viability restituta est ad 58.3%, 72.7% et 76.7% respective (Figura 5E).).Praesentia adductorum BPDE-DNA metiri ornamentum ELISA mensuratum est.Proventus nostri demonstraverunt gradus adductos BPDE-DNA in B(a)P coetus affectos auctos esse cum globo moderante, sed comparari cum G-Rg3 co-tractatione, BPDE-DNA gradus adductos in B(a)P coetus B in circulo tractato, DNA gradus adductorum signanter reducti sunt.Eventus curationis cum B(a)P in Figura 5F sola monstrantur (1.87 ± 0.33 vs. 3.77 ± 0.42 pro G-Rg3r, 1.93 ± 0.48 vs. 3.77 ± 0.42 pro G-Rg3s, p < 0.001).
Cellula viability et BPDE-DNA formationem adducam in hEL cellulis cum G-Rg3 et B(a)P tractatis.(a) Viability heL cellulae B(a)P tractatae.(b) Viability hEL cellularum cum G-Rg3r tractata.(c) Viability hEL cellularum G-Rg3 tractatarum.(d) Viability hEL cellularum tractatarum B (a) P et G-Rg3r.(e) Viability hEL cellularum tractatarum B (a) P et G-Rg3.(F) Gradus adducendi BPDE-DNA in cellulis HEL tractatis cum B (a) P et G-Rg3.Data expressa sunt ut vexillum medium deviationis determinationum triplicatorum.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
GST expressio enzyma deprehensa est post co-curationem cum 10 μM B(a)P et 10 μM G-Rg3r seu G-Rg3s.Eventus noster ostendit B(a)P expressionem GST suppressam (59.7 ± 8.2% in circulo G-Rg3r et 39± 4.5% in circulo G-Rg3s), et B(a)P vel cum G-Rg3r sociatum esse. aut G-Rg3r, aut cum G-Rg3r.Co-curatio cum G-Rg3s restituta GST expressio est.GST expressio (103.7 ± 15.5% in circulo G-Rg3r et 110±11.1% in circulo G-Rg3s, p <0.05 et p < 0.001, respective Fig. 6A, B, C).GST actio aestimata est utens activitatem primordium ornamentum.Proventus noster ostendit iuncturam tractandi coetus maiorem GST activitatem comparatam cum B(a)P globus tantum (96.3± 6.6% vs. 35.7± 7.8% in G-Rg3r globi vs. 92.3± 6.5 in circulo G-Rg3r ).% vs 35.7 ± 7.8% in circulo G-Rg3, p < 0.001, Figura 6D).
Expressio GST et Nrf2 in hEL cellulis tractatis cum B(a)P et G-Rg3.(A) Deprehensio GST expressionis per deletionem occidentalem.(b) Quantitatis expressio GST in hEL cellulis tractatis cum B (a) P & G-Rg3r.(C) Expressio quantitatis GST in hEL cellulis tractatis cum B (a) P et G-Rg3s.(d) GST actio in hEL cellulis tractata cum B(a)P et G-Rg3.(E) Deprehensio vocis Nrf2 per deletionem occidentalem.(F) Expressio quantitatis Nrf2 in hEL cellulis tractatis cum B (a) P et G-Rg3r.(G) Expressio quantitatis Nrf2 in hEL cellulis tractatis cum B (a) P et G-Rg3s.Data exprimuntur ut mensurae mediae ± declinationis determinationum triplicatae.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Ad elucidandas vias quae in G-Rg3 mediatae suppressionis B(a)P tumorigenesis inducta est, expressio Nrf2 per deletionem occidentalem aestimata est.Ut in figuris 6E, F, G, cum globo regimine comparato, solum gradus Nrf2 in B(a)P curationis coetus diminutus est;attamen, cum B(a)P curationis coetus, B(a) Nrf2 gradus in PG-Rg3 auctae sunt, (106 ± 9.5% pro G-Rg3r vs. 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% pro G-Rg3r vs. 41 ± 9.8% pro G-Rg3s, p < 0.01).
Confirmavimus munus praeventivum Nrf2 suppressis expressionis Nrf2 adhibitis certis parvis impedimentis RNA (siRNA).Nrf2 colaphum Occidentis deletione confirmatum est (Fig. 7A,B).Ut in figuris 7C, D, curationis cellularum HEL cum B(a)P, G-Rg3 ostensa est, in numero adductorum BPDE-DNA consecuta diminutione (1.47 ± 0.21) comparata curationi cum B(a)P solus in dicione sirnae globi.) G-Rg3r erat 4.13± 0.49, G-Rg3s erat 1.8± 0.32 et 4.1± 0.57, p < 0.01).Nihilominus, inhibendi effectus G-Rg3 in formatio BPDE-DNA a colaphis Nrf2 sublata est.In circulo siNrf2 nulla notabilis differentia fuit in formatione adductae BPDE-DNA inter B(a)P et G-Rg3 co-tractationis et B(a)P curationis solae (3.0 ± 0.21 pro G-Rg3r vs. 3.56 ± 0.32 ).pro G-Rg3r versus 3.6 pro G-Rg3s versus ±0.45 versus 4.0±0.37, p > 0.05).
Effectus colaphorum Nrf2 in BPDE-DNA formationis adductae in hEL cellulis.(A) Nrf2 colaphum Occidentis deletionem confirmatum est.(B) Quantitas cohortis intensio Nrf2.(C) Effectus colaphorum Nrf2 in BPDE-DNA graduum adductorum in hEL cellulis tractatis cum B (a) P et G-Rg3r.(D) Effectus Nrf2 colaphorum in BPDE-DNA gradus adductorum in hEL cellulis cum B (a) P et G-Rg3 tractatis.Data exprimuntur ut mensurae mediae ± declinationis determinationum triplicatae.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
Hoc studium praecavendum effectus praecaventiae variarum extractorum rubri ginseng in exemplar muris B(a)P-cancri pulmonis inductus, et curationis KRGB tumorem oneris insigniter imminutum.Cum G-Rg3 summam in hoc extracto ginseng contentam habere, partes magni momenti huius ginsenoside in tumorigenesi inhibendo pervestigatum est.Ambo G-Rg3r et G-Rg3 (duo epimerorum G-Rg3) signanter onus tumoris reducuntur in exemplar muris B(a)P-cancri inducti.G-Rg3r et G-Rg3 effectus anticancros exercent, inducendo apoptosin cellularum tumoris21, tumorem augmenti 22 inhibentes, cellulam cycli comprehendentes et angiogenesis24 afficientes.G-Rg3 etiam ostensum est metastasis cellulares inhibere, et facultas G-Rg3 augendi effectus chemotherapy et radiotherapiae, documentum est 26,27.Poon et al demonstravit curatio G-Rg3 posse effectus genotoxicos ipsius B(a)P28 reducere.Hoc studium potentiam therapeuticam G-Rg3 demonstrat in moleculis environmentalibus carcinogenicis et cancer praeveniens.
Quamvis bona eorum potentia prophylactica, pauper bioavailability oris ginsenosides provocationem ponit pro usu clinico harum moleculorum.Analysis pharmacokinetica oralis administrationis ginsenosiderum in muribus ostendit suam bioavailability adhuc minorem esse quam 5%29.Hae probationes demonstraverunt post tempus curationum XX hebdomadarum tantum sanguinis gradus Rg5 minui.Etsi subiecta mechanisma pauperum bioavailability elucidandum manet, P-gp in effluxu ginsenosides implicari putatur.Hoc opus primum demonstratum est administrationem verapamil, obstructore P-gp, bioavailability oralis G-Rg3r et G-Rg3s augere.Haec igitur inventio suggerit G-Rg3r et G-Rg3s substrationes agere P-gp ad ejus effluxum ordinandum.
Hoc opus demonstrat compositionem treatment cum verapamil augere bioavailability oris G-Rg3 in exemplar muris cancri pulmonis.Haec inventio augetur intestinorum transcellularium G-Rg3 in obsidionem P-gp auctam, eoque augendo absorptionem.Assays in Caco2 cellularum ostendit tractationem verapamilum reducere effluxum G-Rg3r et G-Rg3s dum in melius membrana permeabilitatem redegit.A studio Yang et al.Studia docuerunt tractationem cyclosporini A (obstructoris P-gp alius) bioavailability ginsenoside Rh2 augere a valore baseline 1% 20 ad plus quam 30%.Componit Ginsenosides K et Rg1 similes eventus etiam ostendit 30, 31.Cum verapamil et cyclosporin A cooperati sunt, effluxus compositorum K in cellulis Caco-2 signanter deminutus est ab 26.6 ad minus quam 3, dum gradus intracellulares eius 40-fold0 aucti sunt.Coram verapamil, gradus Rg1 in rat pulmone cellulis epithelialibus auctus, munus suggerens pro P-gp in effluxu ginsenoside, ut Meng et al.31 demonstratur.Nihilominus verapamil idem effectum non habuit in effluxu quorundam ginsenosiderum (ut Rg1, F1, Rh1 et Re), significans non esse subiectas P-gp subiectas, ut patet Liang et al.[32].Haec animadversio referri potest ad implicationem aliorum onerariorum et structurarum alternativarum ginsenosiderum.
Mechanismus praecavens effectus G-Rg3 in cancro latens est.Studia priora ostenderunt G-Rg3 impedire damnum DNA et apoptosin reducere accentus oxidativa et inflammationes 16,33, quae fortasse mechanismum subesse possunt ad tumorigenesis impediendam B(a)P inductam.Quaedam relationes indicant genotoxicitatem inducta B(a)P modulando periodum II enzymes reduci posse ad formandum BPDE-DNA34.GST periodus typica II enzyma est quae formationem adductam BPDE-DNA vetat, ligationem GSH ad BPDE promovendo, reducendo DNA damnum inductum B(a)P35.Proventus nostri ostendunt curationem G-Rg3 reducere B(a)P cytotoxicitatem et BPDE-DNA formationem adductam in hEL cellulis ac GST expressionem et actionem in vitro restaurare.Sed hi effectus absentia Nrf2 aberant, suggerentes effectus cytoprotectivos per Nrf2 viam inducere.Nrf2 maior transcriptio factor est ad phase II detoxification enzymes quae alvi xenobioticorum promovet.Activa viae Nrf2 cytoprotection inducit et detrimentum textus minuit.Plures autem relationes partes Nrf2 quasi tumor suppressoris in carcinogenesis38 sustentarunt.Studium nostrum ostendit inductionem itineris Nrf2 a G-Rg3 in B(a)P magni ponderis partes moderatrices inductum esse, causando B(a)P detoxificatione per Phase II enzymes activum, inhibendo processum tumorigenesis.
Nostrum opus potentialem ginseng rubrae sculpsit in prohibendo B(a)P cancrum pulmonis inducto in muribus per magnum implicationem ginsenoside G-Rg3.Bioavailability oralis pauper huius moleculi impedit applicationem clinicam.Attamen, hoc studium primum G-Rg3 subiectum est P-gp, et administratio inhibitoris P-gp in vitro et vivo auget bioavabilitatem G-Rg3.G-Rg3 reducet B(a)P cytotoxicitatem moderans iter Nrf2, quod potest esse potentia mechanismus ad suum munus praecavendum.Studium nostrum confirmat potentialem ginsenoside G-Rg3 ad praecavendam et curationem cancri pulmonis.
Sex-septimana foemina A/J mures (20 ± 1 g) et 7 septimana-vetus mures Wistar masculi (250 ± 20 g) consecuti sunt ab The Jackson Laboratorio (Bar Harbour, USA) et Wuhan Instituto Zoologiae.University (Wuhan, China).Chinese Type Culture Collection Center (Wuhan, China) nobis praebebat Caco-2 et hEL cellulis.Sigma-Aldrich (St. Louis, USA) fons est B(a)P et tricaprinae.G-Rg3r et G-Rg3s, dimethyl sulfoxidum (DMSO), CellTiter-96 proliferation ornamentum (MTS), verapamil, medium essentiale minimum (MEM), et foetus bovinum serum (FBS) empti sunt a Chengdu Must Bio-Technologia. .Co.,Ltd.(Chengdu, China).The QIAamp DNA ornamentum mini et BPDE-DNA ornamentum adducunt ELISA empti sunt ex Qiagen (Stanford, CA, USA) et Cell Biolabs (San Diego, CA, USA).GST activitatem primordium ornamentum ac dapibus summa tentamentum ornamentum (modum BCA vexillum) empti sunt a Solarbio (Beijing, China).Omnia extracta rubra ginseng in Mingyu Laboratorio condita sunt 7. Hong Kong Baptistæ Universitas (Hong Kong, China) et Corea Centrum Cancer (Seoul, Corea) sunt fontes commerciales extracti CRG et varii rubri ginseng excerpta variarum originum Coreanorum (including KRGA, KRGB et KRGC).Red ginseng fit ex radicibus 6 annorum recentium ginseng.Red ginseng extractum obtinetur per lavationem ginseng cum aqua ter, deinde contracto aqueo extracto, et tandem in siccitate humilitatis ad obtinendum ginseng extractum pulverem.elementorum (anti-Nrf2, anti-GST, et β-actin), peroxidase-conjugata anti- leporis immunoglobulin G (IgG), transfectio reagens, imperium siRNA, et Nrf2 siRNA empta sunt e Santa Cruz Biotechnologia (Santa Cruz, CA ) .) USA).
Caco2 et hEL cellulae excultae sunt in cellulis culturae 100 mm2 mm cum MEM continentibus 10% FBS ad 37 °C in atmosphaera humidificata 5% CO2.Ad condiciones curationis effectum determinare, hEL cellulae diversis concentrationibus B(a)P et G-Rg3 in MEM incubatae sunt pro 48 h.Cellulae ulterius resolvi vel colligi possunt ad extractiones cellulas liberas praeparandas.
Omnia experimenta probata sunt ab Experimentalibus Animalibus Ethicis Committee of Tongji Collegium Medical, Huazhong University of Science and Technology (Approbatio No. 2019; Registration No. 4587TH).Omnia experimenta facta sunt secundum normas et normas pertinentes, et studium gestum est secundum Inquisitionem Animalium: Reporting of In Vivo Experimenta (ADVENIO) guidelines.Mures octo-septimana A/J primum intraperitonealiter injecti sunt cum B(a)P in solutione tricaprina (100 mg/kg, 0.2 ml).Post septimanam, mures passim in coetus et curationes diversae divisae sunt, et mures 15 in unaquaque sima, et semel in die gavisi sunt.Post 20 septimanas curationis animalia asphyxia CO2 immolata sunt.Pulmo collectus et fixus per 24 horas.Numerus tumorum superficialium et magnitudinum uniuscuiusque tumoris in quolibet pulmone sub microscopio dissecto quantae sunt.Tumor voluminis aestimat (V) calculi hanc expressionem utentes: V (mm3) = 4/3πr3, ubi r est tumor diametri.Rete summa omnium tumorum voluminum in pulmone murium totum volumen tumoris repraesentabat, et mediocris summa tumoris in singulis globus tumorem oneris repraesentabat.Sanguis integer et exempla intestinorum collecta et condita in -80°C pro determinatione UPLC-MS/MS.Serum collectum et analysrium chemisticum automatum adhibitum ad analysim alaninum aminotransferasis (ALT) et serum creatinine (Cr) gradus ad munus iecoris et renis aestimandum.
Exempla collecta ex frigida repositione remota, dilapsa, ponderata, in fistulas ut supra dictum est posita sunt.Huc accedebat 0.5 µM phlorizin (vexillum internum) in solutione methanoli 0.8 ml.TEXTUS tunc homogenized utens Tissue-Tearor et homogenatus postea ad tubum microcentrifugium 1.5 ml translatum est.Mixtio centrifuga ad 15500 rpm per 15 minutas erat.Remota 1.0 ml supernatant, in nitrogen sicca.Ducenta microlitera methanoli adhibita ad sanitatem.Sanguis in unam lineam colligitur et discursum est et ad omnes mensuras refertur.
Laminae Transwellae 24-bene seminatae cum 1.0 × 105 Caco-2 cellulis per bene aestimandis amplificationem potentialem transporti G-Rg3 addito verapamil.Post 3 septimanas culturae, cellae HBSS ablutae sunt et preincubatae 37°C.400 µL ex 10 µM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s, vel mixtum cum 50 vel 100 μM verapamil) injectum est in latera basolateralis vel apicalis monolayeri, et 600 µL solutionis HBSS alteri addita est. latus.Collecta 100 µl culturae mediae temporibus designatis (0, 15, 30, 45, 60, 90 et 120 minuta) et 100 µl HBSS adde ut hoc volumen componas.Exemplaria in 4°C reposita sunt usque ad detectionem ab UPLC-MS/MS.Locutio Papp = dQ/(dT A C0) adhibita est quantitare apparentem unidirectionem apicalem et basolateralem permeabilitatis et vice versa (Pa-b et Pb-a respective);dQ/dT est mutatio concentrationis, A (0.6 cm2) est superficies monolayoris, et C0 est donatoris concentratio initialis.Ratio effluxus computatur ut Pb-a/Pa-b, quae effluxum rate studii pharmaci repraesentat.
Mures Wistar masculi per 24 horas ieiunaverunt, aquam tantum biberunt, et anesthetizata cum injectione 3.5% solutionis pentobarbitalis intravenae.Tubus silicone intubatus finem duodeni habet introitum et finem ilei ut exitus.Sentina peristaltica utere ad sentinam limbum cum 10 µM G-Rg3r seu G-Rg3s in isotonicis HBSS ad rate of 0.1 ml/min.Effectus verapamil aestimatus est addendo 50 μM vel 100 µM compositi ad 10 μM G-Rg3r vel G-Rg3s.UPLC-MS/MS fiebat de perfusionibus excerptis ad tempus collectis puncta LX, 90, 120, et 150 minuta post initium perfusionis.Recipis effusionis quantitatem per formulam % effusionis = (1 – Cout/Cin) × 100%;intentio G-Rg3 ad exitum et diverticulum exprimitur per Cout et Cin respective.
hEL cellulae 96-bene seminatae in laminarum densitate 1 104 cellulae per bene et curatae cum B(a)P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 µM) vel G-Rg3 in DMSO dissolutae. .Medicamenta tum mediae culturae mixtae variis concentratione (0, 1, 2, 5, 10, 20 µM) per 48 horas diluuntur.Utens commercium in promptu MTS ornamentum primordium, cellulae protocollo normae subiectae sunt et deinde lectori microplato ad 490 nm mensurati sunt.Cellula viability planities circulorum co-tractatorum cum B(a)P (10 μM) et G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 µM) aestimata est secundum modum supra modum et cum increato coetu comparati.
hEL cellulae in 6-bene bracteis ad densitatem 1 105 cellulae/bene defixae sunt et curata cum 10 μMB(a)P praesente vel absente 10 μM G-Rg3.Post 48 horas curationis, DNA ex hEL cellulis extractum est utens QIAamp DNA Mini Kit secundum protocollum fabrica.Formatio adductorum BPDE-DNA detecta est utens ornamentum adductum ELISA BPDE-DNA.Relativi gradus adductorum BPDE-DNA mensurati sunt lectori microplato utentes absorbancem ad 450 nm mensur.
hEL cellulae 96-bene in laminas densitatis 1 104 cellulae per bene deseminatae et tractatae cum 10 μMB(a)P in absentia vel praesentia 10 μM G-Rg3 pro 48 h.Actio GST mensurata est utens commercii GST activitatem primordium ornamentum secundum protocollum fabricationis.Relativum GST activum mensuratum est absorbance ad 450 nm per lectorem microplatum.
hEL cellulae glaciei-frigidae PBS ablutae sunt ac deinde utentes radioimmunopraecipitationis lysedentes temptant quiddam continens inhibitores protease et inhibitores phosphatasi.Post quantitatem dapibus utens ornamentum totalem dapibus primordium, 30 μg dapibus in unoquoque exemplo separatum est ab 12% SDS-PAGE et in membranam PVDF ab electrophoresi translata est.Membranae cum 5% hauriendae lactis saeptae sunt et incubatis primis elementis pernoctare in 4°C.Post incubationem cum peroxidase-conjugato elementorum secundarum secundarum, auctae reagentia chemiluminentiae additae sunt ut signum ligaturae visualise adiciatur.Quisque dapibus cohortis intensio quanta fuit utens programmate ImageJ.
GraphPad Prism 7.0 programmata ad omnes notitias analyses adhibita, pro media ± norma declinationis expressa.Variatio inter coetus curationis aestimata est per experimentum studentis vel unius modi analysi dissidentes, cum P valore <0.05 significatu statistica indicato.
Omnes notitiae consecutae vel enucleatae in hoc studio comprehenduntur in hoc articulo et in documentis supplementariis.
Torre, LA, Siegel, RL et Jemal, A. Lung cancer mutant.adverbium.Exspiravit.medicamentum.biologia.893, 1-19 (2016).
Hecht, S. Tobacco carcinogens, eorum biomarks et cancer tobacco-inducti.Nat.Cancri capellanus.3, 733–744 (2003).
Phillips, DH et Venitt, S. DNA et interdum adducta in fibris humanis ex expositione ad fumum tabaci provenientium.internationalitas.J. Cancer.131, 2733-2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA, Yu M. Effectum Houttuynia cordata et silibinin in benzo (a) pyrene inducto pulmonis tumorigenesis in murium A/J.Cancer 7, 1053–1057 (2005).
Tang, W. et al.Anticancer productum naturale a materiis medicinalibus Sinensium separatim.excurrit.medicamentum.6, 27 (2011).
Yang, Y. et al.Efficacia polyphenon E, ginseng rubra, et rapamycin in benzo(a) pyrene inducto pulmonis tumorigenesis in murium A/J.Cancer 8, 52–58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., Ipse, TS et Yuan, KS Rubrum, implicatio in cancer justo.excurrit.J. Nutt.medicamentum.14, 7–16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS, Gao, L. Ginsenosides in radicibus et foliis Americanae ginseng.J. Agric.Cibus chemiae.44, 717-720 (1996).
Attele AS, Wu JA et Yuan KS, Pharmacologia ginseng: plures partes et multi effectus.diam.pharmacologia.58, 1685-1693 (1999).
Post tempus: Sep-17-2023