ຂໍຂອບໃຈທ່ານສໍາລັບການຢ້ຽມຢາມ Nature.com.ເວີຊັນຂອງຕົວທ່ອງເວັບທີ່ທ່ານກໍາລັງໃຊ້ມີການສະຫນັບສະຫນູນ CSS ຈໍາກັດ.ເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຜົນດີທີ່ສຸດ, ພວກເຮົາແນະນຳໃຫ້ໃຊ້ໂປຣແກຣມທ່ອງເວັບຂອງທ່ານລຸ້ນໃໝ່ກວ່າ (ຫຼືປິດໂໝດເຂົ້າກັນໄດ້ໃນ Internet Explorer).ໃນເວລານີ້, ເພື່ອຮັບປະກັນການສະຫນັບສະຫນູນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ, ພວກເຮົາກໍາລັງສະແດງເວັບໄຊທ໌ໂດຍບໍ່ມີຮູບແບບຫຼື JavaScript.
ໂສມແດງໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ໃນຢາພື້ນເມືອງອາຊີຫຼາຍຮ້ອຍປີ.ໃນການສຶກສາຄັ້ງນີ້, ພວກເຮົາໄດ້ປະເມີນຄວາມສາມາດຂອງໂສມແດງ 4 ຊະນິດ (ໂສມແດງຈີນ, ໂສມແດງເກົາຫຼີ A, ໂສມແດງເກົາຫຼີ B, ແລະ ໂສມແດງເກົາຫຼີ C) ທີ່ປູກຢູ່ໃນເຂດຕ່າງໆເພື່ອຍັບຍັ້ງການສ້າງ ແລະ ຈະເລີນເຕີບໂຕຂອງປອດທີ່ເກີດຈາກການເກີດມະເຮັງ. ເນື້ອງອກ.ການທົດສອບ benzo(a)pyrene (B(a)P) ໄດ້ດໍາເນີນຢູ່ໃນຫນູ A/J, ແລະ ginseng B ສີແດງຂອງເກົາຫຼີໄດ້ຖືກພົບເຫັນວ່າມີປະສິດຕິຜົນທີ່ສຸດໃນການຫຼຸດຜ່ອນພາລະຂອງເນື້ອງອກໃນສີ່ແນວພັນໂສມແດງ.ນອກຈາກນັ້ນ, ພວກເຮົາໄດ້ວິເຄາະເນື້ອໃນຂອງ ginsenosides ຕ່າງໆ (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 ແລະ Rg5) ໃນສີ່ສານສະກັດຈາກໂສມແດງແລະພົບວ່າໂສມແດງເກົາຫຼີ B ມີ ລະດັບສູງທີ່ສຸດຂອງ ginsenoside Rg3 (G-Rg3), ແນະນໍາວ່າ G-Rg3 ອາດຈະມີບົດບາດສໍາຄັນໃນປະສິດທິພາບການປິ່ນປົວຂອງມັນ.ວຽກງານນີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ G-Rg3 ມີ bioavailability ຂ້ອນຂ້າງຕໍ່າ.ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເມື່ອ G-Rg3 ຖືກປະຕິບັດກັບ P-gp inhibitor verapamil, ການປ່ອຍຕົວຂອງ G-Rg3 ເຂົ້າໄປໃນຈຸລັງ Caco-2 ໄດ້ຫຼຸດລົງ, ອັດຕາການດູດຊຶມຂອງລໍາໄສ້ຂອງ G-Rg3 ເພີ່ມຂຶ້ນໃນຕົວແບບຫນູ, ແລະ G-Rg3. ໄດ້ເພີ່ມຂຶ້ນ.ໃນຈຸລັງ Caco-2, ການໄຫຼອອກຂອງ Rg3 ຫຼຸດລົງ, ແລະລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Rg3 ຫຼຸດລົງ.G-Rg3 ແມ່ນເພີ່ມຂຶ້ນໃນລໍາໄສ້ແລະ plasma, ແລະຄວາມສາມາດໃນການປ້ອງກັນເນື້ອງອກຂອງມັນຍັງຖືກປັບປຸງຢູ່ໃນຮູບແບບຫນູຂອງ B(a)P-induced tumorigenesis.ພວກເຮົາຍັງໄດ້ພົບເຫັນວ່າ G-Rg3 ຫຼຸດລົງ B(a) P-induced cytotoxicity ແລະການສ້າງ adduct DNA ໃນຈຸລັງປອດຂອງມະນຸດ, ແລະຟື້ນຟູການສະແດງອອກແລະກິດຈະກໍາຂອງ enzymes ໄລຍະ II ໂດຍຜ່ານເສັ້ນທາງ Nrf2, ເຊິ່ງອາດຈະກ່ຽວຂ້ອງກັບກົນໄກການປະຕິບັດທີ່ເປັນໄປໄດ້. ຂອງ G inhibition -Rg3..ກ່ຽວກັບການປະກົດຕົວຂອງເນື້ອງອກໃນປອດ.ການສຶກສາຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງບົດບາດສໍາຄັນທີ່ມີທ່າແຮງສໍາລັບ G-Rg3 ໃນການກໍານົດເປົ້າຫມາຍເນື້ອງອກໃນປອດໃນຕົວແບບຫນູ.ຊີວະພາບທາງປາກຂອງ ginsenoside ນີ້ໄດ້ຖືກປັບປຸງໂດຍການກໍາຫນົດເປົ້າຫມາຍ P-glycoprotein, ອະນຸຍາດໃຫ້ໂມເລກຸນອອກຜົນກະທົບຕ້ານມະເຮັງ.
ປະເພດຂອງມະເຮັງປອດທີ່ພົບເລື້ອຍທີ່ສຸດແມ່ນມະເຮັງປອດທີ່ບໍ່ແມ່ນຈຸລັງຂະຫນາດນ້ອຍ (NSCLC), ເຊິ່ງເປັນຫນຶ່ງໃນສາເຫດຂອງການເສຍຊີວິດຂອງມະເຮັງໃນປະເທດຈີນແລະອາເມລິກາເຫນືອ 1,2.ປັດໄຈຕົ້ນຕໍທີ່ເພີ່ມຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການເປັນມະເຮັງປອດຂອງຈຸລັງຂະຫນາດນ້ອຍແມ່ນການສູບຢາ.ຄວັນຢາສູບມີຫຼາຍກວ່າ 60 ສານກໍ່ມະເຮັງ, ລວມທັງ benzo(a)pyrene (B(a)P), nitrosamines, ແລະ radioactive isotopes ຈາກການເສື່ອມຂອງ radon.3 polycyclic aromatic hydrocarbons B(a)P ແມ່ນສາເຫດຕົ້ນຕໍຂອງຄວາມເປັນພິດໃນຢາສູບ. ຄວັນຢາສູບ.ເມື່ອໄດ້ຮັບສານ B(a)P, cytochrome P450 ຈະປ່ຽນເປັນ B(a)P-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide (BPDE), ເຊິ່ງປະຕິກິລິຍາກັບ DNA ເພື່ອສ້າງເປັນ adduct BPDE-DNA 4. ນອກຈາກນັ້ນ, ສິ່ງເຫຼົ່ານີ້ adducts induce tumorigenesis ປອດໃນຫນູທີ່ມີ tumor ຂັ້ນຕອນແລະ histopathology ຄ້າຍຄືກັນກັບ tumors ປອດຂອງມະນຸດ5.ຄຸນສົມບັດນີ້ເຮັດໃຫ້ຕົວແບບມະເຮັງປອດ B(a)P-induced ເປັນລະບົບທີ່ເໝາະສົມສໍາລັບການປະເມີນທາດປະສົມທີ່ມີຄຸນສົມບັດຕ້ານມະເຮັງທີ່ເປັນໄປໄດ້.
ຍຸດທະສາດທີ່ເປັນໄປໄດ້ຫນຶ່ງເພື່ອປ້ອງກັນການພັດທະນາຂອງມະເຮັງປອດໃນກຸ່ມທີ່ມີຄວາມສ່ຽງສູງ, ໂດຍສະເພາະແມ່ນຜູ້ສູບຢາ, ແມ່ນການໃຊ້ສານຕ້ານອະນຸມູນອິສະລະເພື່ອສະກັດກັ້ນການພັດທະນາຂອງ lesions neoplastic intraepithelial ແລະດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ຄວາມຄືບຫນ້າຂອງເຂົາເຈົ້າຕໍ່ມາເປັນ malignancy.ການສຶກສາກ່ຽວກັບສັດສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຢາຕ້ານເຄມີຕ່າງໆມີປະສິດທິພາບ6.ບົດລາຍງານທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາໄດ້ຍົກໃຫ້ເຫັນຜົນກະທົບການປ້ອງກັນທີ່ດີຂອງໂສມແດງຕໍ່ມະເຮັງປອດ.ສະໝຸນໄພຊະນິດນີ້ໄດ້ຖືກ ນຳ ໃຊ້ມາເປັນເວລາຫຼາຍສັດຕະວັດແລ້ວໃນຢາພື້ນເມືອງອາຊີເພື່ອຍືດອາຍຸຊີວິດແລະສຸຂະພາບ, ແລະໄດ້ຖືກບັນທຶກໄວ້ວ່າມີຜົນຕ້ານ tumor8.
ປັດໄຈທີ່ຫ້າວຫັນຂອງໂສມແມ່ນ ginsenoside, ເຊິ່ງຖືກນໍາໃຊ້ເປັນເຄື່ອງຫມາຍປະສົມເພື່ອປະເມີນຄຸນນະພາບຂອງສານສະກັດຈາກໂສມ.ການວິເຄາະປະລິມານຂອງສານສະກັດຈາກໂສມດິບໂດຍປົກກະຕິກ່ຽວຂ້ອງກັບການໃຊ້ ginsenosides ຫຼາຍຊະນິດ, ລວມທັງ RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5, ແລະ Rc9,10.Ginsenosides ມີການນຳໃຊ້ທາງຄລີນິກໜ້ອຍ ເນື່ອງຈາກການມີຊີວະພາບທາງປາກບໍ່ດີຫຼາຍ.ເຖິງແມ່ນວ່າກົນໄກສໍາລັບ bioavailability ທີ່ບໍ່ດີນີ້ແມ່ນບໍ່ຊັດເຈນ, ການໄຫຼອອກຂອງ ginsenosides ທີ່ເກີດຈາກ P-glycoprotein (P-gp)12 ອາດຈະເປັນສາເຫດ.P-gp ເປັນຫນຶ່ງໃນການຂົນສົ່ງ efflux ທີ່ສໍາຄັນທີ່ສຸດໃນ superfamily ATP-binding cassette transporter, ເຊິ່ງໃຊ້ພະລັງງານຂອງ ATP hydrolysis ເພື່ອປ່ອຍສານ intracellular ໄປສູ່ສະພາບແວດລ້ອມພາຍນອກ.ການຂົນສົ່ງ P-gp ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນແຈກຢາຍຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນລໍາໄສ້, ຫມາກໄຂ່ຫຼັງ, ຕັບແລະອຸປະສັກເລືອດສະຫມອງ13.P-gp ມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການດູດຊຶມຂອງລໍາໄສ້, ແລະການຍັບຍັ້ງ P-gp ເພີ່ມການດູດຊຶມທາງປາກແລະການມີຢາຕ້ານມະເຮັງບາງຊະນິດ12,14.ຕົວຢ່າງຂອງຢາຍັບຍັ້ງທີ່ໃຊ້ໃນວັນນະຄະດີໃນເມື່ອກ່ອນແມ່ນ verapamil ແລະ cyclosporine A15.ວຽກງານນີ້ປະກອບມີການສ້າງລະບົບຫນູສໍາລັບການສຶກສາມະເຮັງປອດ B(a)P-induced ເພື່ອປະເມີນຄວາມສາມາດຂອງສານສະກັດຈາກໂສມແດງທີ່ແຕກຕ່າງກັນຈາກຈີນແລະເກົາຫຼີທີ່ຈະສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ມະເຮັງ.ສານສະກັດຈາກໄດ້ຖືກວິເຄາະສ່ວນບຸກຄົນເພື່ອກໍານົດ ginsenosides ສະເພາະທີ່ອາດຈະສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ການເກີດມະເຮັງ.ຫຼັງຈາກນັ້ນ, Verapamil ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອເປົ້າຫມາຍ P-gp ແລະປັບປຸງການມີຊີວະພາບທາງປາກແລະປະສິດທິພາບການປິ່ນປົວຂອງ ginsenosides ທີ່ເປັນມະເຮັງ.
ກົນໄກທີ່ ginseng saponins ສົ່ງຜົນກະທົບດ້ານການປິ່ນປົວຕໍ່ການເກີດມະເຮັງຍັງບໍ່ຈະແຈ້ງ.ການຄົ້ນຄວ້າໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ ginsenosides ຕ່າງໆສາມາດຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA ທີ່ເກີດຈາກສານ carcinogens ໂດຍການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມກົດດັນ oxidative ແລະກະຕຸ້ນ enzymes detoxification ໄລຍະ II, ດັ່ງນັ້ນການປ້ອງກັນຄວາມເສຍຫາຍຂອງເຊນ.Glutathione S-transferase (GST) ແມ່ນ enzyme ໄລຍະ II ປົກກະຕິທີ່ຕ້ອງການເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA ທີ່ເກີດຈາກ carcinogens17.Nuclear erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) ແມ່ນປັດໄຈການຖ່າຍທອດທີ່ສໍາຄັນທີ່ຄວບຄຸມ homeostasis redox ແລະກະຕຸ້ນການສະແດງອອກຂອງ enzymes ໄລຍະ II ແລະ cytoprotective antioxidant ຕອບສະຫນອງ18.ການສຶກສາຂອງພວກເຮົາຍັງໄດ້ກວດເບິ່ງຜົນກະທົບຂອງ ginsenosides ທີ່ໄດ້ລະບຸໄວ້ໃນການຫຼຸດຜ່ອນ B(a) P-induced cytotoxicity ແລະການສ້າງສານເສບຕິດ BPDE-DNA, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການກະຕຸ້ນ enzymes ໄລຍະ II ໂດຍ modulating ເສັ້ນທາງ Nrf2 ໃນຈຸລັງປອດປົກກະຕິ.
ການສ້າງແບບຈໍາລອງຫນູຂອງມະເຮັງ B(a)P-induced ແມ່ນສອດຄ່ອງກັບວຽກງານທີ່ຜ່ານມາ5.ຮູບ 1A ສະແດງໃຫ້ເຫັນການອອກແບບທົດລອງຂອງການປິ່ນປົວ 20 ອາທິດຂອງຮູບແບບມະເຮັງຫນູທີ່ກະຕຸ້ນໂດຍ B(a)P, ນ້ໍາ (ການຄວບຄຸມ), ສານສະກັດຈາກໂສມແດງຈີນ (CRG), ສານສະກັດຈາກໂສມແດງເກົາຫຼີ A (KRGA), ແລະສີແດງເກົາຫຼີ. ໂສມ.ສານສະກັດຈາກ B (KRGB) ແລະສານສະກັດຈາກໂສມແດງເກົາຫຼີ C (KRGC).ຫຼັງຈາກ 20 ອາທິດຂອງການປິ່ນປົວໂສມແດງ, ຫນູໄດ້ຖືກເສຍສະລະໂດຍການຫາຍໃຈ CO2.ຮູບທີ 1B ສະແດງເນື້ອງອກໃນປອດໃນສັດທີ່ປິ່ນປົວດ້ວຍໂສມແດງປະເພດຕ່າງໆ, ແລະຮູບທີ 1C ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຈຸນລະພາກແສງສະຫວ່າງຂອງຕົວຢ່າງເນື້ອງອກ.ພາລະ tumor ຂອງສັດທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ KRGB (1.5 ± 0.35) ຕ່ໍາກວ່າສັດຄວບຄຸມ (0.82 ± 0.2, P < 0.05), ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 1D.ລະດັບສະເລ່ຍຂອງການຍັບຍັ້ງການໂຫຼດ tumor ແມ່ນ 45%.ສານສະກັດຈາກໂສມແດງອື່ນໆທີ່ທົດສອບບໍ່ໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນການປ່ຽນແປງທີ່ສໍາຄັນດັ່ງກ່າວໃນພາລະເນື້ອງອກ (P> 0.05).ບໍ່ມີຜົນຂ້າງຄຽງທີ່ຊັດເຈນໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນໃນແບບຈໍາລອງຫນູໃນໄລຍະ 20 ອາທິດຂອງການປິ່ນປົວໂສມແດງ, ລວມທັງບໍ່ມີການປ່ຽນແປງນ້ໍາຫນັກຕົວ (ຂໍ້ມູນບໍ່ໄດ້ສະແດງ) ແລະບໍ່ມີສານພິດໃນຕັບຫຼືຫມາກໄຂ່ຫຼັງ (ຮູບ 1E,F).
ສານສະກັດຈາກໂສມແດງປິ່ນປົວພະຍາດມະເຮັງປອດໃນໜູ A/J.(A) ການທົດລອງອອກແບບ.(B) tumors ປອດຂະຫນາດໃຫຍ່ຢູ່ໃນຕົວແບບຫນູ.tumors ແມ່ນຊີ້ບອກດ້ວຍລູກສອນ.a: ກຸ່ມໂສມແດງຈີນ.b: ກຸ່ມ A ຂອງໂສມແດງເກົາຫຼີ.c: ກຸ່ມໂສມແດງເກົາຫຼີ B. d: ກຸ່ມໂສມແດງເກົາຫຼີ C. d: ກຸ່ມຄວບຄຸມ.(C) ກ້ອງຈຸລະທັດທີ່ສະແດງເຖິງເນື້ອງອກໃນປອດ.Magnification: 100. b: 400. (D) tumor load ໃນກຸ່ມສານສະກັດຈາກໂສມແດງ.(E) ລະດັບ plasma ຂອງ enzyme ຕັບ ALT.(F) ລະດັບ Plasma ຂອງ enzyme renal Cr.ຂໍ້ມູນແມ່ນສະແດງອອກເປັນສະເລ່ຍ ± deviation ມາດຕະຖານ.*P <0.05.
ສານສະກັດຈາກໂສມແດງທີ່ໄດ້ລະບຸໄວ້ໃນການສຶກສານີ້ໄດ້ຖືກວິເຄາະໂດຍການວິເຄາະຂອງແຫຼວ chromatography tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) ເພື່ອປະເມີນປະລິມານ ginsenosides ຕໍ່ໄປນີ້: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3 , Rh2, F1, Rk1 ແລະ Rg5.ເງື່ອນໄຂ UPLC ແລະ MS ທີ່ໃຊ້ໃນການວັດແທກການວິເຄາະໄດ້ຖືກອະທິບາຍໄວ້ໃນບົດລາຍງານທີ່ຜ່ານມາ19.UPLC-MS/MS chromatograms ຂອງສີ່ສານສະກັດຈາກໂສມແດງແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 2A.ມີຄວາມແຕກຕ່າງກັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຂອງເນື້ອໃນ ginsenoside ທັງຫມົດ, ທີ່ມີເນື້ອໃນ ginsenoside ທັງຫມົດສູງສຸດໃນ CRG (590.27 ± 41.28 μmol / L) (ຮູບ 2B).ເມື່ອປະເມີນ ginsenosides ສ່ວນບຸກຄົນ (ຮູບ 2C), KRGB ສະແດງໃຫ້ເຫັນລະດັບສູງສຸດຂອງ G-Rg3 ເມື່ອທຽບກັບ ginsenosides ອື່ນໆ (58.33 ± 3.81 μmol / L ສໍາລັບ G-Rg3s ແລະ 41.56 ± 2.88 μmol / L ສໍາລັບ G -Rg3r).ປະເພດໂສມແດງ (P < 0.001).G-Rg3 ເກີດຂື້ນເປັນຄູ່ຂອງ stereoisomers G-Rg3r ແລະ G-Rg3s, ເຊິ່ງແຕກຕ່າງກັນໃນຕໍາແຫນ່ງຂອງກຸ່ມ hydroxyl ທີ່ຄາບອນ 20 (ຮູບ 2D).ຜົນໄດ້ຮັບຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າ G-Rg3r ຫຼື G-Rg3 ອາດຈະມີທ່າແຮງຕ້ານມະເຮັງທີ່ສໍາຄັນໃນຕົວແບບຫນູທີ່ເປັນມະເຮັງ B(a) P-induced.
ເນື້ອໃນຂອງ ginsenosides ໃນສານສະກັດຈາກໂສມແດງຕ່າງໆ.(A) UPLC-MS/MS chromatograms ຂອງສີ່ສານສະກັດຈາກໂສມແດງ.(B) ການຄາດຄະເນຂອງເນື້ອໃນ ginsenoside ທັງຫມົດໃນສານສະກັດຈາກທີ່ລະບຸໄວ້.(C) ການກວດຫາ ginsenosides ສ່ວນບຸກຄົນໃນສານສະກັດທີ່ຕິດສະຫຼາກ.(D) ໂຄງສ້າງຂອງ ginsenoside stereoisomers G-Rg3r ແລະ G-Rg3s.ຂໍ້ມູນແມ່ນສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation ຂອງການກໍານົດ triplicate.***P <0.001.
ການສຶກສາ UPLC-MS/MS ຕ້ອງການປະລິມານຂອງ ginsenosides ໃນລໍາໄສ້ແລະຕົວຢ່າງເລືອດຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວ 20 ອາທິດ.ການປິ່ນປົວດ້ວຍ KRGB ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າມີພຽງ 0.0063 ± 0.0005 μg/ml Rg5 ໃນເລືອດ.ບໍ່ມີ ginsenosides ທີ່ຍັງເຫຼືອຖືກກວດພົບ, ຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງການມີຊີວະພາບຂອງປາກທີ່ບໍ່ດີແລະດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງຫຼຸດລົງການສໍາຜັດກັບ ginsenosides ເຫຼົ່ານີ້.
ເສັ້ນຈຸລັງ adenocarcinoma ຈໍ້າສອງເມັດ Caco-2 ແມ່ນ morphologically ແລະ biochemically ຄ້າຍຄືກັນກັບຈຸລັງ epithelial ລໍາໄສ້ຂອງມະນຸດ, ສະແດງໃຫ້ເຫັນຜົນປະໂຫຍດຂອງຕົນໃນການປະເມີນການຂົນສົ່ງ enterocyte ໃນທົ່ວອຸປະສັກ epithelial ລໍາໄສ້.ການວິເຄາະນີ້ແມ່ນອີງໃສ່ການສຶກສາກ່ອນຫນ້າ 20 .ຕົວເລກ 3A,B,C,D,E,F ສະແດງຮູບພາບຕົວແທນຂອງການຂົນສົ່ງ transcellular ຂອງ G-Rg3r ແລະ G-Rg3 ໂດຍໃຊ້ຕົວແບບ monolayer Caco-2.ການຂົນສົ່ງ transcellular ຂອງ G-Rg3r ຫຼື G-Rg3 ໃນທົ່ວ Caco-2 monolayers ຈາກ basolateral ກັບ apical side (Pb-a) ແມ່ນສູງຫຼາຍກ່ວາຈາກ apical ກັບ basolateral side (Pa-b).ສໍາລັບ G-Rg3r, ຄ່າສະເລ່ຍ Pa-b ແມ່ນ 0.38 ± 0.06, ເຊິ່ງເພີ່ມຂຶ້ນເປັນ 0.73 ± 0.06 ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍ 50 μmol/L verapamil ແລະເປັນ 1.14 ± 0.09 ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍ 100 μmol/L verapamil (p <0.01, ແລະ ຕາມລໍາດັບ;3A).ການສັງເກດການສໍາລັບ G-Rg3 ປະຕິບັດຕາມຮູບແບບທີ່ຄ້າຍຄືກັນ (ຮູບ 3B), ແລະຜົນໄດ້ຮັບສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວ verapamil ປັບປຸງການຂົນສົ່ງຂອງ G-Rg3r ແລະ G-Rg3.ການປິ່ນປົວ Verapamil ຍັງເຮັດໃຫ້ມີການຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນອັດຕາສ່ວນ efflux Pb-a ແລະ G-Rg3r ແລະ G-Rg3s (ຮູບ 3C, D, E, F), ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວ verapamil ຫຼຸດຜ່ອນເນື້ອໃນ ginsenoside ໃນຈຸລັງ Caco-2 efflux..
ການຂົນສົ່ງ transcellular ຂອງ G-Rg3 ໃນ monolayers Caco-2 ແລະການດູດຊຶມຂອງລໍາໄສ້ໃນການກວດຫາຫນູ perfusion.(A) ຄ່າ Pa-b ຂອງກຸ່ມ G-Rg3r ໃນ Caco-2 monolayer.(B) ຄ່າ Pa-b ຂອງກຸ່ມ G-Rg3s ໃນ Caco-2 monolayer.(C) ຄ່າ Pb ຂອງກຸ່ມ G-Rg3r ໃນ Caco-2 monolayer.(D) ຄ່າ Pb ຂອງກຸ່ມ G-Rg3s ໃນ Caco-2 monolayer.(E) ອັດຕາສ່ວນຜົນຜະລິດຂອງກຸ່ມ G-Rg3r ໃນ monolayer Caco-2.(F) ອັດຕາສ່ວນຜົນຜະລິດຂອງກຸ່ມ G-Rg3 ໃນ monolayer Caco-2.(G) ອັດຕາສ່ວນການດູດຊຶມຂອງກະເພາະລໍາໄສ້ຂອງ G-Rg3r ໃນການກວດສອບ perfusion ໃນຫນູ.(H) ອັດຕາສ່ວນການດູດຊຶມຂອງກະເພາະລໍາໄສ້ຂອງ G-Rg3 ໃນການກວດສອບ perfusion ໃນຫນູ.ການດູດຊຶມແລະການດູດຊຶມໄດ້ຖືກປຽບທຽບໂດຍບໍ່ມີການເພີ່ມ verapamil.ຂໍ້ມູນແມ່ນສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation ຂອງຫ້າການທົດລອງເອກະລາດ.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
ສອດຄ່ອງກັບການເຮັດວຽກ 20 ກ່ອນຫນ້ານີ້, ການດູດຊຶມລໍາໄສ້ orthotopic ຂອງຫນູໄດ້ຖືກປະຕິບັດເພື່ອກໍານົດວ່າການດູດຊຶມ G-Rg3 ໃນລໍາໄສ້ເພີ່ມຂຶ້ນຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວ verapamil.ຕົວເລກ 3G,H ສະແດງໃຫ້ເຫັນຕົວແທນ perfusion ການວິເຄາະເພື່ອປະເມີນອັດຕາສ່ວນການດູດຊຶມຂອງລໍາໄສ້ຂອງ G-Rg3r ແລະ G-Rg3 ໃນຫນູຕົວແບບມະເຮັງໃນໄລຍະເວລາຂ້າງເທິງ.ອັດຕາສ່ວນເບື້ອງຕົ້ນຂອງການດູດຊຶມ G-Rg3r ທີ່ອ່ອນແອປະມານ 10% ເພີ່ມຂຶ້ນເປັນຫຼາຍກວ່າ 20% ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍ 50 μM verapamil ແລະຫຼາຍກວ່າ 25% ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍ 100 μM verapamil.ເຊັ່ນດຽວກັນ, G-Rg3, ເຊິ່ງມີການດູດຊືມໃນເບື້ອງຕົ້ນຂອງ 10%, ຍັງສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຈຸດສູງສຸດຂອງ 20% ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍ 50 μM verapamil ແລະເກືອບ 30% ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍ 100 μM verapamil, ແນະນໍາວ່າການຍັບຍັ້ງ P-gp ໂດຍ verapamil ເສີມຂະຫຍາຍ. G-absorption Rg3 ໃນລໍາໄສ້ໃນຮູບແບບຫນູຂອງມະເຮັງປອດ.
ອີງຕາມວິທີການຂ້າງເທິງ, B(a) ຫນູຕົວແບບມະເຮັງທີ່ກະຕຸ້ນ P-induced ໄດ້ຖືກແບ່ງອອກຢ່າງສຸ່ມເປັນຫົກກຸ່ມ, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 4A.ບໍ່ມີການສູນເສຍນ້ໍາຫນັກທີ່ສໍາຄັນຫຼືອາການທາງຄລີນິກຂອງຄວາມເປັນພິດໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນໃນກຸ່ມການປິ່ນປົວ G-Rg3 ເມື່ອທຽບກັບກຸ່ມຄວບຄຸມ (ຂໍ້ມູນບໍ່ໄດ້ສະແດງ).ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວ 20 ອາທິດ, ປອດຂອງຫນູແຕ່ລະຄົນໄດ້ຖືກເກັບກໍາ.ຮູບທີ 4B ສະແດງໃຫ້ເຫັນເນື້ອງອກໃນປອດ macroscopic ໃນຫນູໃນກຸ່ມການປິ່ນປົວຂ້າງເທິງ, ແລະຮູບ 4C ສະແດງ micrograph ແສງສະຫວ່າງຕົວແທນຂອງ tumor ຕົວແທນ.ກ່ຽວກັບພາລະຂອງເນື້ອງອກໃນແຕ່ລະກຸ່ມ (ຮູບ 4D), ຄ່າສໍາລັບຫນູທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ G-Rg3r ແລະ G-Rg3s ແມ່ນ 0.75 ± 0.29 mm3 ແລະ 0.81 ± 0.30 mm3 ຕາມລໍາດັບ, ໃນຂະນະທີ່ຄ່າສໍາລັບ G ຫນູທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ. ກັບ -Rg3s ແມ່ນ 1.63 ຕາມລໍາດັບ ±0.40 mm3.ຄວບຄຸມຫນູ (p <0.001), ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວ G-Rg3 ຫຼຸດຜ່ອນພາລະເນື້ອງອກໃນຫນູ.ການບໍລິຫານຂອງ verapamil ປັບປຸງການຫຼຸດຜ່ອນນີ້ຕື່ມອີກ: ຄ່າໃນຫນູ verapamil + G-Rg3r ຫຼຸດລົງຈາກ 0.75 ± 0.29 mm3 ຫາ 0.33 ± 0.25 mm3 (p < 0.01), ແລະຄ່າ verapamil+ ຈາກ 0.81 ± 2.9 ± 0.30 ຫຼຸດລົງ. mm3 ໃນຫນູທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ G. -Rg3s (p < 0.05), ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າ verapamil ອາດຈະເສີມຂະຫຍາຍຜົນກະທົບ inhibitory ຂອງ G-Rg3 ກ່ຽວກັບ tumorigenesis.ພາລະຂອງເນື້ອງອກບໍ່ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ສໍາຄັນລະຫວ່າງກຸ່ມຄວບຄຸມແລະກຸ່ມ verapamil, ກຸ່ມ G-Rg3r ແລະກຸ່ມ G-Rg3s, ແລະກຸ່ມ verapamil + G-Rg3r ແລະກຸ່ມ verapamil + G-Rg3s.ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ບໍ່ມີສານພິດຕັບຫຼືຫມາກໄຂ່ຫຼັງທີ່ສໍາຄັນທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການປິ່ນປົວທີ່ຖືກປະເມີນ (ຮູບ 4E,F).
ພາລະຂອງເນື້ອງອກຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວ G-Rg3 ແລະລະດັບ plasma ຫຼືລໍາໄສ້ G-Rg3r ແລະ G-Rg3 ໃນກຸ່ມທີ່ລະບຸ.(A) ການທົດລອງອອກແບບ.(B) tumors Macroscopic ໃນແບບຈໍາລອງຫນູ.tumors ແມ່ນຊີ້ບອກດ້ວຍລູກສອນ.a: G-Rg3r.b: G-Rg3s.c: G-Rg3r ປະສົມປະສານກັບ verapamil.d: G-Rg3 ປະສົມປະສານກັບ verapamil.d: Verapamil.e: ການຄວບຄຸມ.(C) Optical micrograph ຂອງ tumor ໃນການຂະຫຍາຍຕົວ.ຄໍາຕອບ: 100x.b: 400X.(D) ຜົນກະທົບຂອງການປິ່ນປົວ G-Rg3 + verapamil ຕໍ່ກັບພາລະເນື້ອງອກໃນໜູ A/J.(E) ລະດັບ plasma ຂອງ enzyme ຕັບ ALT.(F) ລະດັບ Plasma ຂອງ enzyme renal Cr.(G) ລະດັບ Plasma ຂອງ G-Rg3r ຫຼື G-Rg3 ຂອງກຸ່ມທີ່ລະບຸ.(H) ລະດັບຂອງ G-Rg3r ຫຼື G-Rg3s ໃນລໍາໄສ້ຂອງກຸ່ມທີ່ລະບຸ.ຂໍ້ມູນແມ່ນສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation ຂອງການກໍານົດ triplicate.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
ລະດັບ G-Rg3 ໃນຫນູຕົວແບບມະເຮັງ B(a) P-induced ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍ UPLC-MS/MS ຫຼັງຈາກໄລຍະເວລາການປິ່ນປົວ 20 ອາທິດຕາມວິທີການທີ່ອະທິບາຍໄວ້ໃນພາກວິທີການ.ຕົວເລກ 4G ແລະ H ສະແດງໃຫ້ເຫັນລະດັບ plasma ແລະລໍາໄສ້ G-Rg3, ຕາມລໍາດັບ.ລະດັບ plasma G-Rg3r ແມ່ນ 0.44 ± 0.32 μmol / L ແລະເພີ່ມຂຶ້ນເປັນ 1.17 ± 0.47 μmol / L ດ້ວຍການບໍລິຫານປະສົມປະສານຂອງ verapamil (p < 0.001), ໃນຂະນະທີ່ລະດັບ G-Rg3r ລໍາໄສ້ແມ່ນ 0.53 ± 0.08 μg / l.ເມື່ອປະສົມກັບ verapamil, g ເພີ່ມຂຶ້ນເປັນ 1.35 ± 0.13 μg / g (p < 0.001).ສໍາລັບ G-Rg3, ຜົນໄດ້ຮັບປະຕິບັດຕາມຮູບແບບທີ່ຄ້າຍຄືກັນ, ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວ verapamil ໄດ້ເພີ່ມຊີວະພາບທາງປາກຂອງ G-Rg3 ໃນຫນູ A / J.
ການວິເຄາະຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງເຊນໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອປະເມີນຄວາມເປັນພິດຂອງ cytotoxic ຂອງ B(a)P ແລະ G-Rg3 ໃນຈຸລັງ hEL.cytotoxicity induced ໂດຍ B(a)P ໃນຈຸລັງ hEL ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 5A, ໃນຂະນະທີ່ຄຸນສົມບັດທີ່ບໍ່ມີພິດຂອງ G-Rg3r ແລະ G-Rg3 ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 5A ແລະ 5B.5B, C. ເພື່ອປະເມີນຜົນກະທົບ cytoprotective ຂອງ G-Rg3, B(a)P ໄດ້ຖືກປະຕິບັດຮ່ວມກັນກັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕ່າງໆຂອງ G-Rg3r ຫຼື G-Rg3 ເຂົ້າໄປໃນຈຸລັງ hEL.ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 5D, G-Rg3r ຢູ່ທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ 5 μM, 10 μM, ແລະ 20 μM ການຟື້ນຟູການມີຊີວິດຂອງເຊນເປັນ 58,3%, 79,3%, ແລະ 77,3%, ຕາມລໍາດັບ.ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຄ້າຍຄືກັນຍັງສາມາດເຫັນໄດ້ໃນກຸ່ມ G-Rg3s.ເມື່ອຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ G-Rg3s ແມ່ນ 5 µM, 10 µM ແລະ 20 µM, ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງເຊນຖືກຟື້ນຟູເປັນ 58.3%, 72.7% ແລະ 76.7%, ຕາມລໍາດັບ (ຮູບ 5E).).ການປະກົດຕົວຂອງສານເສບຕິດ BPDE-DNA ໄດ້ຖືກວັດແທກໂດຍໃຊ້ຊຸດ ELISA.ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ BPDE-DNA adduct ເພີ່ມຂຶ້ນໃນກຸ່ມ B(a)P-treated ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມຄວບຄຸມ, ແຕ່ເມື່ອປຽບທຽບກັບ G-Rg3, ລະດັບ adduct BPDE-DNA ໃນກຸ່ມ B(a)P. B ໃນກຸ່ມທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ, ລະດັບການຕິດພັນຂອງ DNA ໄດ້ຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.ຜົນໄດ້ຮັບຂອງການປິ່ນປົວ B(a)P ດຽວແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 5F (1.87 ± 0.33 ທຽບກັບ 3.77 ± 0.42 ສໍາລັບ G-Rg3r, 1.93 ± 0.48 ທຽບກັບ 3.77 ± 0.42 ສໍາລັບ G -Rg3s, p < 0.001).
ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງເຊລ ແລະການສ້າງຕົວຜະສົມຂອງ BPDE-DNA ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ G-Rg3 ແລະ B(a)P.(A) ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P.(B) ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ G-Rg3r.(C) ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ G-Rg3.(D) ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງເຊລ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3r.(E) ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງເຊລ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3.(F) ລະດັບຂອງສານເສບຕິດ BPDE-DNA ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3.ຂໍ້ມູນແມ່ນສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation ຂອງການກໍານົດ triplicate.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
ການສະແດງອອກຂອງເອນໄຊ GST ໄດ້ຖືກກວດພົບຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວຮ່ວມກັນກັບ 10 μM B(a)P ແລະ 10 μM G-Rg3r ຫຼື G-Rg3s.ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ B(a)P ສະກັດກັ້ນການສະແດງອອກ GST (59.7 ± 8.2% ໃນກຸ່ມ G-Rg3r ແລະ 39 ± 4.5% ໃນກຸ່ມ G-Rg3s), ແລະ B(a)P ແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບບໍ່ວ່າຈະກັບ G-Rg3r. , ຫຼືກັບ G-Rg3r, ຫຼືກັບ G-Rg3r.ການປິ່ນປົວຮ່ວມກັນກັບ G-Rg3s ການຟື້ນຟູການສະແດງອອກ GST.ການສະແດງອອກ GST (103.7 ± 15.5% ໃນກຸ່ມ G-Rg3r ແລະ 110 ± 11.1% ໃນກຸ່ມ G-Rg3s, p < 0.05 ແລະ p < 0.001, ຕາມລໍາດັບ, ຮູບ 6A, B, ແລະ C).ກິດຈະກໍາ GST ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ຊຸດທົດສອບກິດຈະກໍາ.ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າກຸ່ມການປິ່ນປົວແບບປະສົມປະສານມີກິດຈະກໍາ GST ສູງກວ່າເມື່ອທຽບກັບກຸ່ມ B(a)P ເທົ່ານັ້ນ (96.3 ± 6.6% ທຽບກັບ 35.7 ± 7.8% ໃນກຸ່ມ G-Rg3r ທຽບກັບ 92.3 ± 6.5 ໃນກຸ່ມ G-Rg3r. ).% vs 35.7 ± 7.8% ໃນກຸ່ມ G-Rg3s, p < 0.001, ຮູບ 6D).
ການສະແດງອອກຂອງ GST ແລະ Nrf2 ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3.(A) ການກວດຫາການສະແດງອອກ GST ໂດຍ blotting ຕາເວັນຕົກ.(B) ການສະແດງອອກທາງດ້ານປະລິມານຂອງ GST ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3r.(C) ການສະແດງອອກທາງດ້ານປະລິມານຂອງ GST ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3s.(D) ການເຄື່ອນໄຫວ GST ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3.(E) ການກວດສອບການສະແດງອອກ Nrf2 ໂດຍ blotting ຕາເວັນຕົກ.(F) ການສະແດງອອກທາງດ້ານປະລິມານຂອງ Nrf2 ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3r.(G) ການສະແດງອອກທາງດ້ານປະລິມານຂອງ Nrf2 ໃນຈຸລັງ hEL ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3s.ຂໍ້ມູນແມ່ນສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation ຂອງການກໍານົດ triplicate.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
ເພື່ອອະທິບາຍເສັ້ນທາງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການສະກັດກັ້ນ G-Rg3-mediated ຂອງ B(a) P-induced tumorigenesis, ການສະແດງອອກ Nrf2 ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍການ blotting ຕາເວັນຕົກ.ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 6E,F,G, ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມຄວບຄຸມ, ພຽງແຕ່ລະດັບຂອງ Nrf2 ໃນກຸ່ມການປິ່ນປົວ B(a)P ແມ່ນຫຼຸດລົງ;ແນວໃດກໍ່ຕາມ, ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມການປິ່ນປົວ B(a)P, ລະດັບ B(a) Nrf2 ໃນກຸ່ມ PG-Rg3 ແມ່ນເພີ່ມຂຶ້ນ (106 ± 9.5% ສໍາລັບ G-Rg3r ທຽບກັບ 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% ສໍາລັບ G-Rg3r ທຽບກັບ 41 ± 9.8% ສໍາລັບ G-Rg3s, p < 0.01).
ພວກເຮົາໄດ້ຢືນຢັນບົດບາດປ້ອງກັນຂອງ Nrf2 ໂດຍການສະກັດກັ້ນການສະແດງອອກ Nrf2 ໂດຍໃຊ້ RNA ແຊກແຊງຂະຫນາດນ້ອຍສະເພາະ (siRNA).Nrf2 knockdown ໄດ້ຮັບການຢືນຢັນໂດຍການ blotting ຕາເວັນຕົກ (ຮູບ 7A,B).ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 7C,D, ການປິ່ນປົວຮ່ວມກັນຂອງຈຸລັງ hEL ກັບ B(a)P ແລະ G-Rg3 ເຮັດໃຫ້ຈໍານວນ BPDE-DNA adducts ຫຼຸດລົງ (1.47 ± 0.21) ເມື່ອທຽບກັບການປິ່ນປົວ B(a)P. ດຽວຢູ່ໃນກຸ່ມ siRNA ຄວບຄຸມ.) G-Rg3r ແມ່ນ 4.13 ± 0.49, G-Rg3s ແມ່ນ 1.8 ± 0.32 ແລະ 4.1 ± 0.57, p < 0.01).ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຜົນກະທົບ inhibitory ຂອງ G-Rg3 ກ່ຽວກັບການສ້າງ BPDE-DNA ໄດ້ຖືກຍົກເລີກໂດຍ Nrf2 knockdown.ໃນກຸ່ມ siNrf2, ບໍ່ມີຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ສໍາຄັນໃນການສ້າງສານເສບຕິດ BPDE-DNA ລະຫວ່າງ B(a)P ແລະ G-Rg3 co-treatment ແລະ B(a)P treatment ຢ່າງດຽວ (3.0 ± 0.21 ສໍາລັບ G-Rg3r ທຽບກັບ 3.56 ± 0.32. ).ສໍາລັບ G-Rg3r ທຽບກັບ 3.6 ສໍາລັບ G-Rg3s ທຽບກັບ ±0.45 ທຽບກັບ 4.0±0.37, p > 0.05).
ຜົນກະທົບຂອງ Nrf2 knockdown ກ່ຽວກັບການສ້າງ BPDE-DNA adduct ໃນຈຸລັງ hEL.(A) Nrf2 knockdown ໄດ້ຮັບການຢືນຢັນໂດຍການ blotting ຕາເວັນຕົກ.(B) ປະລິມານຄວາມເຂັ້ມຂອງແຖບ Nrf2.(C) ຜົນກະທົບຂອງ Nrf2 ຫຼຸດລົງກ່ຽວກັບລະດັບ BPDE-DNA adduct ໃນຈຸລັງ hEL ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3r.(D) ຜົນກະທົບຂອງ Nrf2 ຫຼຸດລົງກ່ຽວກັບລະດັບ BPDE-DNA adduct ໃນເຊລ hEL ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P ແລະ G-Rg3.ຂໍ້ມູນແມ່ນສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation ຂອງການກໍານົດ triplicate.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
ການສຶກສານີ້ໄດ້ປະເມີນຜົນກະທົບປ້ອງກັນຂອງສານສະກັດຈາກໂສມແດງຕ່າງໆໃນແບບຈໍາລອງຫນູຂອງມະເຮັງປອດ B(a)P-induced, ແລະການປິ່ນປົວ KRGB ຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຂອງເນື້ອງອກ.ພິຈາລະນາວ່າ G-Rg3 ມີເນື້ອໃນສູງສຸດໃນສານສະກັດຈາກໂສມນີ້, ບົດບາດສໍາຄັນຂອງ ginsenoside ນີ້ໃນການຍັບຍັ້ງ tumorigenesis ໄດ້ຖືກສຶກສາ.ທັງ G-Rg3r ແລະ G-Rg3 (ສອງ epimers ຂອງ G-Rg3) ຫຼຸດຜ່ອນພາລະເນື້ອງອກຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນຮູບແບບຫນູຂອງມະເຮັງ B(a) P-induced.G-Rg3r ແລະ G-Rg3 ອອກຜົນຕ້ານມະເຮັງໂດຍການກະຕຸ້ນໃຫ້ເກີດ apoptosis ຂອງຈຸລັງ tumor21, ຍັບຍັ້ງການຈະເລີນເຕີບໂຕຂອງເນື້ອງອກ22, ການຈັບກຸມວົງຈອນຂອງເຊນ23 ແລະຜົນກະທົບຕໍ່ angiogenesis24.G-Rg3 ຍັງໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງການຍັບຍັ້ງການແຜ່ກະຈາຍຂອງຈຸລັງ cellular metastasis25, ແລະຄວາມສາມາດຂອງ G-Rg3 ເພື່ອເສີມຂະຫຍາຍຜົນກະທົບຂອງການປິ່ນປົວດ້ວຍທາງເຄມີແລະການປິ່ນປົວດ້ວຍທາງວິທະຍຸໄດ້ຖືກບັນທຶກໄວ້ໃນເອກະສານ 26,27.Poon et al ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວ G-Rg3 ສາມາດຫຼຸດຜ່ອນຜົນກະທົບ genotoxic ຂອງ B(a)P28.ການສຶກສານີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນທ່າແຮງການປິ່ນປົວຂອງ G-Rg3 ໃນການກໍາຫນົດເປົ້າຫມາຍຂອງໂມເລກຸນ carcinogenic ສິ່ງແວດລ້ອມແລະປ້ອງກັນມະເຮັງ.
ເຖິງວ່າຈະມີທ່າແຮງ prophylactic ທີ່ດີຂອງພວກເຂົາ, ການຂາດຊີວະພາບທາງປາກຂອງ ginsenosides ເຮັດໃຫ້ເກີດສິ່ງທ້າທາຍສໍາລັບການນໍາໃຊ້ທາງດ້ານການຊ່ວຍຂອງໂມເລກຸນເຫຼົ່ານີ້.ການວິເຄາະທາງ pharmacokinetic ຂອງການບໍລິຫານທາງປາກຂອງ ginsenosides ໃນຫນູໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ bioavailability ຂອງມັນຍັງຫນ້ອຍກວ່າ 5% 29.ການທົດສອບເຫຼົ່ານີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຫຼັງຈາກໄລຍະເວລາການປິ່ນປົວ 20 ອາທິດ, ພຽງແຕ່ລະດັບເລືອດຂອງ Rg5 ຫຼຸດລົງ.ເຖິງແມ່ນວ່າກົນໄກພື້ນຖານຂອງ bioavailability ທີ່ບໍ່ດີແມ່ນຍັງຖືກອະທິບາຍ, P-gp ໄດ້ຖືກຄິດວ່າມີສ່ວນຮ່ວມໃນການໄຫຼອອກຂອງ ginsenosides.ວຽກງານນີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນເປັນຄັ້ງທໍາອິດວ່າການບໍລິຫານຂອງ verapamil, P-gp blocker, ເພີ່ມທະວີການ bioavailability ປາກຂອງ G-Rg3r ແລະ G-Rg3s.ດັ່ງນັ້ນ, ການຄົ້ນພົບນີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າ G-Rg3r ແລະ G-Rg3s ເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນຊັ້ນຍ່ອຍຂອງ P-gp ເພື່ອຄວບຄຸມການໄຫຼອອກຂອງມັນ.
ວຽກງານນີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວແບບປະສົມປະສານກັບ verapamil ເພີ່ມການມີຊີວະພາບທາງປາກຂອງ G-Rg3 ໃນຮູບແບບຫນູຂອງມະເຮັງປອດ.ການຄົ້ນພົບນີ້ແມ່ນໄດ້ຮັບການສະຫນັບສະຫນູນໂດຍການຂົນສົ່ງ transcellular ລໍາໄສ້ເພີ່ມຂຶ້ນຂອງ G-Rg3 ຕາມການສະກັດ P-gp, ດັ່ງນັ້ນການເພີ່ມການດູດຊຶມຂອງມັນ.ການວິເຄາະໃນຈຸລັງ Caco2 ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວ verapamil ຫຼຸດລົງການໄຫຼຂອງ G-Rg3r ແລະ G-Rg3s ໃນຂະນະທີ່ປັບປຸງການ permeability ຂອງເຍື່ອ.ການສຶກສາໂດຍ Yang et al.ການສຶກສາໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວດ້ວຍ cyclosporine A (ຕົວສະກັດກັ້ນ P-gp ອື່ນ) ເພີ່ມຊີວະພາບຂອງ ginsenoside Rh2 ຈາກມູນຄ່າພື້ນຖານຂອງ 1% 20 ເປັນຫຼາຍກ່ວາ 30%.ທາດປະສົມ Ginsenosides K ແລະ Rg1 ຍັງສະແດງໃຫ້ເຫັນຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຄ້າຍຄືກັນ30,31.ເມື່ອ verapamil ແລະ cyclosporin A ໄດ້ຖືກປະຕິບັດຮ່ວມກັນ, ການຫຼຸດລົງຂອງສານປະສົມ K ໃນເຊນ Caco-2 ໄດ້ຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຈາກ 26.6 ຫາຫນ້ອຍກວ່າ 3, ໃນຂະນະທີ່ລະດັບ intracellular ຂອງມັນເພີ່ມຂຶ້ນ 40-fold30.ໃນທີ່ປະທັບຂອງ verapamil, ລະດັບ Rg1 ເພີ່ມຂຶ້ນໃນຈຸລັງ epithelial ປອດຂອງຫນູ, ແນະນໍາບົດບາດສໍາລັບ P-gp ໃນ ginsenoside efflux, ດັ່ງທີ່ສະແດງໂດຍ Meng et al.31.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, verapamil ບໍ່ມີຜົນກະທົບດຽວກັນກັບ efflux ຂອງບາງ ginsenosides (ເຊັ່ນ: Rg1, F1, Rh1 ແລະ Re), ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າພວກເຂົາບໍ່ໄດ້ຮັບຜົນກະທົບຈາກ P-gp substrates, ດັ່ງທີ່ສະແດງໂດຍ Liang et al.32 .ການສັງເກດການນີ້ອາດຈະກ່ຽວຂ້ອງກັບການມີສ່ວນຮ່ວມຂອງການຂົນສົ່ງອື່ນໆແລະໂຄງສ້າງ ginsenoside ທາງເລືອກ.
ກົນໄກຂອງຜົນກະທົບປ້ອງກັນຂອງ G-Rg3 ກ່ຽວກັບມະເຮັງແມ່ນບໍ່ຈະແຈ້ງ.ການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ G-Rg3 ປ້ອງກັນຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA ແລະ apoptosis ໂດຍການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມກົດດັນ oxidative ແລະການອັກເສບ 16,33, ເຊິ່ງອາດຈະເປັນກົນໄກພື້ນຖານໃນການປ້ອງກັນການເກີດ tumorigenesis B(a) P-induced.ບົດລາຍງານບາງຢ່າງຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າຄວາມເປັນພິດທາງພັນທຸກໍາທີ່ກະຕຸ້ນໂດຍ B(a)P ສາມາດຫຼຸດລົງໂດຍການດັດແປງ enzymes ໄລຍະ II ເພື່ອສ້າງ BPDE-DNA34.GST ເປັນ enzyme ໄລຍະ II ປົກກະຕິທີ່ຍັບຍັ້ງການສ້າງສານເສບຕິດ BPDE-DNA ໂດຍການສົ່ງເສີມການຜູກມັດຂອງ GSH ກັບ BPDE, ດັ່ງນັ້ນການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA ທີ່ກະຕຸ້ນໂດຍ B(a)P35.ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວ G-Rg3 ຫຼຸດຜ່ອນ B(a) P-induced cytotoxicity ແລະການສ້າງສານເສບຕິດ BPDE-DNA ໃນຈຸລັງ hEL ແລະຟື້ນຟູການສະແດງອອກຂອງ GST ແລະກິດຈະກໍາໃນ vitro.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ຜົນກະທົບເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນບໍ່ມີຢູ່ໃນການຂາດ Nrf2, ແນະນໍາວ່າ G-Rg3 ເຮັດໃຫ້ເກີດຜົນກະທົບ cytoprotective ຜ່ານເສັ້ນທາງ Nrf2.Nrf2 ເປັນປັດໄຈການຖ່າຍທອດທີ່ສໍາຄັນສໍາລັບ enzymes detoxification ໄລຍະ II ທີ່ສົ່ງເສີມການລ້າງຂອງ xenobiotics36.ການເປີດໃຊ້ເສັ້ນທາງ Nrf2 ເຮັດໃຫ້ເກີດ cytoprotection ແລະຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເສຍຫາຍຂອງເນື້ອເຍື່ອ37.ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ບົດລາຍງານຈໍານວນຫນຶ່ງໄດ້ສະຫນັບສະຫນູນບົດບາດຂອງ Nrf2 ເປັນຜູ້ສະກັດກັ້ນ tumor ໃນ carcinogenesis38.ການສຶກສາຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການກະຕຸ້ນຂອງເສັ້ນທາງ Nrf2 ໂດຍ G-Rg3 ມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການຄວບຄຸມການເກີດ B(a)P-induced genotoxicity ໂດຍການເຮັດໃຫ້ B(a)P detoxification ໂດຍການກະຕຸ້ນ enzymes ໄລຍະ II, ດັ່ງນັ້ນການຍັບຍັ້ງຂະບວນການ tumorigenesis.
ວຽກງານຂອງພວກເຮົາເປີດເຜີຍທ່າແຮງຂອງໂສມແດງໃນການປ້ອງກັນມະເຮັງປອດ B(a)P-induced ໃນຫນູໂດຍຜ່ານການມີສ່ວນຮ່ວມທີ່ສໍາຄັນຂອງ ginsenoside G-Rg3.ການມີຊີວະພາບທາງປາກທີ່ບໍ່ດີຂອງໂມເລກຸນນີ້ຂັດຂວາງການປະຕິບັດທາງດ້ານການຊ່ວຍຂອງມັນ.ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ການສຶກສານີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄັ້ງທໍາອິດວ່າ G-Rg3 ເປັນ substrate ຂອງ P-gp, ແລະການບໍລິຫານຂອງ P-gp inhibitor ເພີ່ມທະວີການ bioavailability ຂອງ G-Rg3 ໃນ vitro ແລະໃນ vivo.G-Rg3 ຫຼຸດຜ່ອນ B(a) P-induced cytotoxicity ໂດຍການຄວບຄຸມເສັ້ນທາງ Nrf2, ເຊິ່ງອາດຈະເປັນກົນໄກທີ່ມີທ່າແຮງສໍາລັບຫນ້າທີ່ປ້ອງກັນຂອງມັນ.ການສຶກສາຂອງພວກເຮົາຢືນຢັນທ່າແຮງຂອງ ginsenoside G-Rg3 ສໍາລັບການປ້ອງກັນແລະການປິ່ນປົວມະເຮັງປອດ.
ໜູ A/J ອາຍຸ 6 ອາທິດ (20 ± 1 g) ແລະ ໜູ Wistar ເພດຊາຍ ອາຍຸ 7 ອາທິດ (250 ± 20 g) ແມ່ນໄດ້ມາຈາກຫ້ອງທົດລອງ Jackson (Bar Harbor, USA) ແລະ ສະຖາບັນສັດວິທະຍາ Wuhan.ມະຫາວິທະຍາໄລ (Wuhan, ຈີນ).ສູນເກັບກຳວັດທະນະທຳປະເພດຂອງຈີນ (Wuhan, ຈີນ) ໄດ້ໃຫ້ພວກເຮົາມີເຊລ Caco-2 ແລະ hEL.Sigma-Aldrich (St. Louis, USA) ແມ່ນແຫຼ່ງຂອງ B(a)P ແລະ tricaprine.Purified ginsenosides G-Rg3r ແລະ G-Rg3s, dimethyl sulfoxide (DMSO), CellTiter-96 proliferation assay kit (MTS), verapamil, ຂະຫນາດກາງທີ່ຈໍາເປັນຫນ້ອຍ (MEM), ແລະ serum bovine fetal (FBS) ໄດ້ຊື້ຈາກ Chengdu Must Bio-Technology. .Co., Ltd.(ເມືອງ Chengdu, ຈີນ).ຊຸດ QIAamp DNA mini ແລະ BPDE-DNA adduct ELISA ຊຸດໄດ້ຖືກຊື້ຈາກ Qiagen (Stanford, CA, USA) ແລະ Cell Biolabs (San Diego, CA, USA).ຊຸດທົດສອບກິດຈະກໍາ GST ແລະຊຸດກວດທາດໂປຼຕີນທັງໝົດ (ວິທີ BCA ມາດຕະຖານ) ໄດ້ຊື້ຈາກ Solarbio (ປັກກິ່ງ, ຈີນ).ສານສະກັດຈາກໂສມແດງທັງໝົດຖືກເກັບໄວ້ໃນຫ້ອງທົດລອງ Mingyu 7. ມະຫາວິທະຍາໄລຮ່ອງກົງ Baptist (ຮົງກົງ, ຈີນ) ແລະສູນມະເຮັງເກົາຫຼີ (ກຸງໂຊລ, ເກົາຫຼີ) ແມ່ນແຫຼ່ງການຄ້າຂອງສານສະກັດຈາກ CRG ແລະສານສະກັດຈາກໂສມແດງຂອງຕົ້ນກຳເນີດເກົາຫຼີຕ່າງໆ (ລວມທັງ KRGA, KRGB. ແລະ KRGC).ໂສມແດງແມ່ນຜະລິດຈາກຮາກຂອງໂສມສົດອາຍຸ 6 ປີ.ສານສະກັດຈາກໂສມແດງແມ່ນໄດ້ມາຈາກການລ້າງໂສມດ້ວຍນໍ້າສາມຄັ້ງ, ຈາກນັ້ນເອົາສານສະກັດຈາກນໍ້າໃຫ້ເຂັ້ມຂຸ້ນ, ແລະສຸດທ້າຍເຮັດໃຫ້ແຫ້ງໃນອຸນຫະພູມຕໍ່າເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຜົງສານສະກັດຈາກໂສມ.ພູມຕ້ານທານ (anti-Nrf2, anti-GST, ແລະ β-actin), horseradish peroxidase-conjugated anti-rabbit immunoglobulin G (IgG), ທາດປະສົມການຖ່າຍທອດ, siRNA ຄວບຄຸມ, ແລະ Nrf2 siRNA ໄດ້ຊື້ມາຈາກເຕັກໂນໂລຊີຊີວະພາບ Santa Cruz (Santa Cruz, CA) .), ອາເມລິກາ).
ເຊລ Caco2 ແລະ hEL ຖືກນໍາໄປລ້ຽງໃນຖ້ວຍວັດທະນະທໍາເຊລ 100 mm2 ດ້ວຍ MEM ທີ່ມີ 10% FBS ທີ່ 37 °C ໃນບັນຍາກາດທີ່ມີຄວາມຊຸ່ມຊື່ນຂອງ 5% CO2.ເພື່ອກໍານົດຜົນກະທົບຂອງເງື່ອນໄຂການປິ່ນປົວ, ຈຸລັງ hEL ໄດ້ຖືກອົບດ້ວຍຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງ B(a)P ແລະ G-Rg3 ໃນ MEM ເປັນເວລາ 48 ຊົ່ວໂມງ.ຈຸລັງສາມາດໄດ້ຮັບການວິເຄາະເພີ່ມເຕີມຫຼືເກັບກໍາເພື່ອກະກຽມສານສະກັດຈາກຈຸລັງທີ່ບໍ່ມີ.
ການທົດລອງທັງຫມົດໄດ້ຮັບການອະນຸມັດໂດຍຄະນະກໍາມະການຈັນຍາບັນສັດທົດລອງຂອງ Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology (ອະນຸມັດສະບັບເລກທີ 2019; ທະບຽນເລກທີ 4587TH).ການທົດລອງທັງຫມົດໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍສອດຄ່ອງກັບຄໍາແນະນໍາແລະກົດລະບຽບທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ, ແລະການສຶກສາໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍສອດຄ່ອງກັບການຄົ້ນຄວ້າສັດ: ການລາຍງານຄໍາແນະນໍາຂອງ In Vivo Experiments (ARRIVE).ໜູ A/J ອາຍຸແປດອາທິດໄດ້ສັກຢາ B(a)P ເຂົ້າໃນເສັ້ນປະສາດທາງຊ່ອງຄອດເປັນຄັ້ງທຳອິດ (100 mg/kg, 0.2 ml).ຫຼັງຈາກຫນຶ່ງອາທິດ, ຫນູໄດ້ຖືກແບ່ງອອກເປັນກຸ່ມຄວບຄຸມແລະກຸ່ມການປິ່ນປົວທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ຫນູ 15 ໃນແຕ່ລະກຸ່ມ, ແລະໃຫ້ຢາ 1 ຄັ້ງຕໍ່ມື້.ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວ 20 ອາທິດ, ສັດໄດ້ຖືກເສຍສະລະໂດຍ CO2 asphyxia.ປອດໄດ້ຖືກເກັບກໍາແລະແກ້ໄຂສໍາລັບ 24 ຊົ່ວໂມງ.ຈໍານວນຂອງເນື້ອງອກ superficial ແລະຂະຫນາດ tumor ສ່ວນບຸກຄົນໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ສໍາລັບແຕ່ລະປອດພາຍໃຕ້ກ້ອງຈຸລະທັດ dissecting.ການຄາດຄະເນປະລິມານເນື້ອງອກ (V) ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ການສະແດງອອກດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້: V (mm3) = 4/3πr3, ເຊິ່ງ r ແມ່ນເສັ້ນຜ່າສູນກາງຂອງເນື້ອງອກ.ຜົນລວມສຸດທິຂອງປະລິມານເນື້ອງອກທັງໝົດໃນປອດຂອງໜູແມ່ນເປັນຕົວແທນຂອງປະລິມານເນື້ອງອກທັງໝົດ, ແລະປະລິມານເນື້ອງອກທັງໝົດສະເລ່ຍໃນແຕ່ລະກຸ່ມແມ່ນສະແດງເຖິງການໂຫຼດເນື້ອງອກ.ຕົວຢ່າງເລືອດແລະລໍາໄສ້ທັງຫມົດໄດ້ຖືກເກັບກໍາແລະເກັບຮັກສາໄວ້ຢູ່ທີ່ −80 ° C ເພື່ອກໍານົດ UPLC-MS / MS.Serum ໄດ້ຖືກເກັບກໍາແລະເຄື່ອງວິເຄາະເຄມີອັດຕະໂນມັດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອວິເຄາະລະດັບ alanine aminotransferase (ALT) ແລະ serum creatinine (Cr) ເພື່ອປະເມີນການເຮັດວຽກຂອງຕັບແລະຫມາກໄຂ່ຫຼັງ.
ຕົວຢ່າງທີ່ເກັບກໍາໄດ້ຖືກໂຍກຍ້າຍອອກຈາກບ່ອນເກັບມ້ຽນເຢັນ, thawed, ຊັ່ງນໍ້າຫນັກ, ແລະວາງເຂົ້າໄປໃນທໍ່ຕາມທີ່ໄດ້ອະທິບາຍຂ້າງເທິງ.ນີ້ໄດ້ຖືກເພີ່ມ 0.5 μM phlorizin (ມາດຕະຖານພາຍໃນ) ໃນການແກ້ໄຂ methanol 0.8 ml.ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ເນື້ອເຍື່ອໄດ້ຖືກເຮັດໃຫ້ເປັນເນື້ອດຽວກັນໂດຍໃຊ້ Tissue-Tearor ແລະ homogenate ໄດ້ຖືກໂອນເຂົ້າໄປໃນທໍ່ microcentrifuge 1.5 ມລ.ປະສົມໄດ້ຖືກຈຸດສູນກາງຢູ່ທີ່ 15500 rpm ສໍາລັບ 15 ນາທີ.ຫຼັງຈາກເອົາ 1.0 ມລຂອງ supernatant, ແຫ້ງດ້ວຍໄນໂຕຣເຈນ.ສອງຮ້ອຍ microliters ຂອງ methanol ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການຟື້ນຕົວ.ເລືອດໄດ້ຖືກເກັບກໍາແລະປຸງແຕ່ງຢູ່ໃນເສັ້ນດຽວແລະຖືກນໍາໃຊ້ເປັນເອກະສານອ້າງອີງສໍາລັບການວັດແທກທັງຫມົດ.
ແຜ່ນ Transwell 24-well ໄດ້ຖືກແກ່ນດ້ວຍຈຸລັງ Caco-2 1.0 × 105 ຕໍ່ດີເພື່ອປະເມີນການເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງການຂົນສົ່ງ G-Rg3 ໂດຍການເພີ່ມ verapamil.ຫຼັງຈາກ 3 ອາທິດຂອງວັດທະນະທໍາ, ຈຸລັງໄດ້ຖືກລ້າງດ້ວຍ HBSS ແລະ preincubated ຢູ່ທີ່ 37 ° C.400 μL ຂອງ 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s, ຫຼືປະສົມກັບ 50 ຫຼື 100 μM verapamil) ໄດ້ຖືກສີດໃສ່ basolateral ຫຼື apical side ຂອງ monolayer, ແລະ 600 μL ຂອງ HBSS ການແກ້ໄຂໄດ້ຖືກເພີ່ມໃສ່ອື່ນໆ. ຂ້າງ.ເກັບເອົາ 100 µl ຂອງວັດທະນະ ທຳ ໃນເວລາກໍານົດ (0, 15, 30, 45, 60, 90 ແລະ 120 ນາທີ) ແລະເພີ່ມ 100 µl ຂອງ HBSS ເພື່ອສ້າງປະລິມານນີ້.ຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ −4 °C ຈົນກ່ວາການກວດພົບໂດຍ UPLC-MS/MS.ການສະແດງອອກ Papp = dQ/(dT × A × C0) ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກໍານົດປະລິມານການ permeability apical unidirectional ແລະ basolateral ແລະໃນທາງກັບກັນ (Pa-b ແລະ Pb-a, ຕາມລໍາດັບ);dQ/dT ແມ່ນການປ່ຽນແປງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ, A (0.6 cm2) ແມ່ນພື້ນທີ່ຫນ້າດິນຂອງ monolayer, ແລະ C0 ແມ່ນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງຜູ້ໃຫ້ທຶນເບື້ອງຕົ້ນ.ອັດຕາສ່ວນຂອງ efflux ແມ່ນຄິດໄລ່ເປັນ Pb-a/Pa-b, ເຊິ່ງສະແດງເຖິງອັດຕາການ efflux ຂອງຢາທີ່ສຶກສາ.
ໜູ Wistar ເພດຊາຍໄດ້ອົດອາຫານເປັນເວລາ 24 ຊົ່ວໂມງ, ດື່ມນ້ຳພຽງຢ່າງດຽວ, ແລະ ສັກຢາສະລົບດ້ວຍການສີດເຂົ້າເສັ້ນກ່າງຂອງ 3.5% pentobarbital solution.ທໍ່ silicone intubated ມີໃນຕອນທ້າຍຂອງ duodenum ເປັນທາງເຂົ້າແລະໃນຕອນທ້າຍຂອງ ileum ເປັນທາງອອກ.ໃຊ້ປັ໊ມ peristaltic ເພື່ອສູບນ້ໍາເຂົ້າດ້ວຍ 10 µM G-Rg3r ຫຼື G-Rg3s ໃນ isotonic HBSS ໃນອັດຕາການໄຫຼຂອງ 0.1 ມລ / ນາທີ.ຜົນກະທົບຂອງ verapamil ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍການເພີ່ມ 50 μM ຫຼື 100 μM ຂອງສານປະສົມກັບ 10 μM G-Rg3r ຫຼື G-Rg3s.UPLC-MS/MS ໄດ້ຖືກປະຕິບັດໃນສານສະກັດຈາກ perfusion ທີ່ເກັບກໍາໃນເວລາຈຸດ 60, 90, 120, ແລະ 150 ນາທີຫຼັງຈາກການເລີ່ມຕົ້ນຂອງ perfusion.ອັດຕາສ່ວນຂອງການດູດຊຶມແມ່ນເປັນປະລິມານໂດຍສູດ % absorption = (1 – Cout/Cin) × 100%;ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ G-Rg3 ຢູ່ທາງອອກແລະຂາເຂົ້າແມ່ນສະແດງອອກໂດຍ Cout ແລະ Cin, ຕາມລໍາດັບ.
ຈຸລັງ hEL ໄດ້ຖືກແກ່ນໃນແຜ່ນ 96 ດີທີ່ມີຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງ 1 × 104 ຈຸລັງຕໍ່ດີແລະຖືກປະຕິບັດດ້ວຍ B(a)P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) ຫຼື G-Rg3 ທີ່ລະລາຍໃນ DMSO .ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ຢາດັ່ງກ່າວໄດ້ຖືກເຈືອຈາງດ້ວຍວັດທະນະທໍາຂະຫນາດກາງເຖິງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕ່າງໆ (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) ໃນໄລຍະ 48 ຊົ່ວໂມງ.ການນໍາໃຊ້ຊຸດທົດສອບ MTS ທີ່ມີຢູ່ໃນການຄ້າ, ຈຸລັງຖືກປະຕິບັດກັບໂປໂຕຄອນມາດຕະຖານແລະຫຼັງຈາກນັ້ນວັດແທກໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງອ່ານ microplate ທີ່ 490 nm.ລະດັບການມີຊີວິດຂອງເຊນຂອງກຸ່ມທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ B(a)P (10 μM) ແລະ G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) ໄດ້ຖືກປະເມີນຕາມວິທີການຂ້າງເທິງແລະປຽບທຽບກັບກຸ່ມທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ.
ຈຸລັງ hEL ໄດ້ຖືກແກ່ນໃນແຜ່ນ 6 ຂຸມທີ່ຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງ 1 × 105 ເຊນ / ດີແລະຖືກປະຕິບັດດ້ວຍ 10 μMB(a)P ໃນປະກົດຕົວຫຼືບໍ່ມີ 10 μM G-Rg3.ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວ 48 ຊົ່ວໂມງ, DNA ໄດ້ຖືກສະກັດອອກຈາກຈຸລັງ hEL ໂດຍໃຊ້ QIAamp DNA Mini Kit ອີງຕາມໂປໂຕຄອນຂອງຜູ້ຜະລິດ.ການສ້າງຕັ້ງຂອງສານເສບຕິດ BPDE-DNA ໄດ້ຖືກກວດພົບໂດຍໃຊ້ຊຸດ BPDE-DNA adduct ELISA.ລະດັບຄວາມກ່ຽວຂ້ອງຂອງສານເສບຕິດ BPDE-DNA ໄດ້ຖືກວັດແທກໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງອ່ານ microplate ໂດຍການວັດແທກການດູດຊຶມຢູ່ທີ່ 450 nm.
ຈຸລັງ hEL ໄດ້ຖືກແກ່ນໃນແຜ່ນ 96 ດີທີ່ຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງ 1 × 104 ຈຸລັງຕໍ່ດີແລະຖືກປະຕິບັດດ້ວຍ 10 μMB(a)P ໃນກໍລະນີທີ່ບໍ່ມີຫຼືມີ 10 μM G-Rg3 ເປັນເວລາ 48 ຊົ່ວໂມງ.ກິດຈະກໍາ GST ໄດ້ຖືກວັດແທກໂດຍໃຊ້ຊຸດທົດສອບກິດຈະກໍາ GST ການຄ້າອີງຕາມໂປໂຕຄອນຂອງຜູ້ຜະລິດ.ການກະຕຸ້ນ GST ທີ່ກ່ຽວຂ້ອງໄດ້ຖືກວັດແທກໂດຍການດູດຊຶມຢູ່ທີ່ 450 nm ໂດຍໃຊ້ຕົວອ່ານ microplate.
ຈຸລັງ hEL ໄດ້ຖືກລ້າງດ້ວຍ PBS ທີ່ມີນ້ໍາກ້ອນ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ lysed ໂດຍໃຊ້ radioimmunoprecipitation assay buffer ທີ່ປະກອບດ້ວຍ protease inhibitors ແລະ phosphatase inhibitors.ຫຼັງຈາກການວິເຄາະປະລິມານທາດໂປຼຕີນໂດຍໃຊ້ຊຸດທົດສອບທາດໂປຼຕີນທັງຫມົດ, 30 μgຂອງທາດໂປຼຕີນໃນແຕ່ລະຕົວຢ່າງຖືກແຍກອອກໂດຍ 12% SDS-PAGE ແລະຖືກໂອນເຂົ້າໄປໃນເຍື່ອ PVDF ໂດຍ electrophoresis.Membranes ໄດ້ຖືກສະກັດດ້ວຍນົມ skim 5% ແລະ incubated ດ້ວຍພູມຕ້ານທານຕົ້ນຕໍໃນຕອນກາງຄືນທີ່ 4 ° C.ຫຼັງຈາກ incubation ກັບ horseradish peroxidase-conjugated ພູມຕ້ານທານຂັ້ນສອງ, ການປັບປຸງການ reagents chemiluminescence ໄດ້ຖືກເພີ່ມເພື່ອໃຫ້ເຫັນສັນຍານການຜູກມັດ.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງແຕ່ລະແຖບທາດໂປຼຕີນໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ຊອບແວ ImageJ.
ຊອບແວ GraphPad Prism 7.0 ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອວິເຄາະຂໍ້ມູນທັງຫມົດ, ສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation.ການປ່ຽນແປງລະຫວ່າງກຸ່ມການປິ່ນປົວໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ Student's t test ຫຼື one-way analysis of variance, ທີ່ມີຄ່າ P <0.05 ຊີ້ໃຫ້ເຫັນຄວາມສໍາຄັນທາງສະຖິຕິ.
ຂໍ້ມູນທັງໝົດທີ່ໄດ້ຮັບ ຫຼືວິເຄາະໃນລະຫວ່າງການສຶກສານີ້ແມ່ນລວມຢູ່ໃນບົດຄວາມທີ່ເຜີຍແຜ່ນີ້ ແລະໄຟລ໌ຂໍ້ມູນເສີມ.
Torre, LA, Siegel, RL ແລະ Jemal, A. ສະຖິຕິມະເຮັງປອດ.ຄຳກິລິຍາໝົດອາຍຸແລ້ວ.ຢາ.ຊີວະວິທະຍາ.893, 1–19 (2016).
Hecht, S. Tobacco carcinogens, ເຄື່ອງຫມາຍຊີວະພາບຂອງພວກມັນ ແລະມະເຮັງທີ່ເກີດຈາກຢາສູບ.ນັດ.ມະເຮັງ.3, 733–744 (2003).
Phillips, DH ແລະ Venitt, S. DNA ແລະທາດໂປຼຕີນ adducts ໃນເນື້ອເຍື່ອຂອງມະນຸດເປັນຜົນມາຈາກການສໍາຜັດກັບຄວັນຢາສູບ.ສາກົນ.J. ມະເຮັງ.131, 2733–2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA ແລະ Yu M. ຜົນກະທົບຂອງ Houttuynia cordata ແລະ silibinin ຕໍ່ກັບ benzo(a) pyrene-induced lung tumorigenesis ໃນໜູ A/J.ມະເຮັງ 7, 1053–1057 (2005).
Tang, W. et al.ຜະລິດຕະພັນຕ້ານມະເຮັງທໍາມະຊາດແຍກອອກຈາກອຸປະກອນການຢາຈີນ.ຄາງກະໄຕ.ຢາ.6, 27 (2011).
Yang, Y. et al.ປະສິດທິພາບຂອງ polyphenon E, ginseng ສີແດງ, ແລະ rapamycin ກ່ຽວກັບ tumorigenesis ປອດຂອງ benzo(a) pyrene ໃນຫນູ A/J.ມະເຮັງ 8, 52–58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS ແລະ Yuan, KS Red, ການມີສ່ວນຮ່ວມໃນການປິ່ນປົວມະເຮັງ.ຄາງກະໄຕ.ເຈ.ນັດ.ຢາ.14, 7–16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS ແລະ Gao, L. Ginsenosides ໃນຮາກແລະໃບຂອງໂສມອາເມລິກາ.J. ກະເສດ.ເຄມີອາຫານ.44, 717–720 (1996).
Attele AS, Wu JA ແລະ Yuan KS Pharmacology ຂອງ ginseng: ຫຼາຍອົງປະກອບແລະຜົນກະທົບຫຼາຍ.ຊີວະເຄມີ.ແພດສາດ.58, 1685–1693 (1999).
ເວລາປະກາດ: ກັນຍາ-17-2023