Nature.com වෙත පිවිසීම ගැන ඔබට ස්තුතියි.ඔබ භාවිතා කරන බ්‍රවුසරයේ අනුවාදයට සීමිත CSS සහය ඇත.හොඳම ප්රතිඵල සඳහා, අපි ඔබගේ බ්‍රවුසරයේ නව අනුවාදයක් භාවිතා කිරීම නිර්දේශ කරමු (හෝ Internet Explorer හි ගැළපුම් ප්‍රකාරය අක්‍රිය කරන්න).මේ අතරතුර, අඛණ්ඩ සහාය සහතික කිරීම සඳහා, අපි මෝස්තරය හෝ JavaScript නොමැතිව වෙබ් අඩවිය ප්‍රදර්ශනය කරන්නෙමු.
රතු ජින්සෙන්ග් වසර සිය ගණනක් තිස්සේ සාම්ප්‍රදායික ආසියානු වෛද්‍ය විද්‍යාවේ භාවිතා කර ඇත.මෙම අධ්‍යයනයේදී, විවිධ ප්‍රදේශවල වගා කරන ලද රතු ජින්සෙන්ග් වර්ග හතරක (චීන රතු ජින්සෙන්ග්, කොරියානු රතු ජින්සෙන්ග් A, කොරියානු රතු ජින්සෙන්ග් බී සහ කොරියානු රතු ජින්සෙන්ග් සී) පිළිකා කාරක ප්‍රේරිත පෙනහළු සෑදීම සහ වර්ධනය වැළැක්වීමේ හැකියාව අපි ඇගයීමට ලක් කළෙමු. ගැටිති.A/J මීයන් සඳහා benzo(a)pyrene (B(a)P) පරීක්ෂණයක් සිදු කරන ලද අතර, රතු ජින්සෙන්ග් ප්‍රභේද හතර අතරින් ගෙඩි බර අඩු කිරීම සඳහා කොරියානු රතු ginseng B වඩාත් ඵලදායී බව සොයා ගන්නා ලදී.මීට අමතරව, අපි රතු ජින්සෙන්ග් සාරය හතරක විවිධ ginsenosides (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 සහ Rg5) අන්තර්ගතය විශ්ලේෂණය කළ අතර කොරියානු රතු ජින්සෙන්ග් බී ඇති බව සොයා ගත්තා. ginsenoside Rg3 (G-Rg3) හි ඉහළම මට්ටම්, G-Rg3 එහි චිකිත්සක කාර්යක්ෂමතාවයේ වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කළ හැකි බව යෝජනා කරයි.මෙම කාර්යය පෙන්නුම් කරන්නේ G-Rg3 සාපේක්ෂව අඩු ජෛව උපයෝගීතාවයක් ඇති බවයි.කෙසේ වෙතත්, G-Rg3 P-gp inhibitor වේරාපාමිල් සමඟ ඒකාබද්ධ කළ විට, G-Rg3 Caco-2 සෛල තුළට ගලා ඒම අඩු විය, G-Rg3 බඩවැල් අවශෝෂණය කිරීමේ වේගය මී ආකෘතියක් තුළ වැඩි විය, සහ G-Rg3 වැඩි කරන ලදී.Caco-2 සෛල තුළ, Rg3 පිටතට ගලායාම අඩු වන අතර, Rg3 සාන්ද්‍රණයේ මට්ටම අඩු වේ.G-Rg3 බඩවැලේ සහ ප්ලාස්මාවේ වැඩි වන අතර, එහි පිළිකා වැළැක්වීමේ හැකියාව B(a)P-induced tumorigenesis හි මීයන් ආකෘතියක් තුළද වැඩි දියුණු වේ.G-Rg3 මගින් මිනිස් පෙනහළු සෛල තුළ B(a)P-ප්‍රේරිත සයිටොටොක්සිසිටි සහ DNA ඇඩක්ට් සෑදීම අඩු කරන බවත්, ක්‍රියාකාරීත්වයේ විභව යාන්ත්‍රණයට සම්බන්ධ විය හැකි Nrf2 මාර්ගය හරහා II අදියර එන්සයිමවල ප්‍රකාශනය සහ ක්‍රියාකාරිත්වය යථා තත්වයට පත් කළ බවත් අපි සොයා ගත්තෙමු. G නිෂේධනය -Rg3..පෙනහළු පිළිකා ඇතිවීම ගැන.අපගේ අධ්‍යයනය මගින් මූසික ආකෘතිවල පෙනහළු පිළිකා ඉලක්ක කර ගැනීමේදී G-Rg3 සඳහා විය හැකි වැදගත් කාර්යභාරයක් පෙන්නුම් කරයි.P-glycoprotein ඉලක්ක කර ගැනීමෙන් මෙම ginsenoside හි මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව වැඩි දියුණු කර ඇති අතර, අණුව පිළිකා නාශක බලපෑම් ඇති කිරීමට ඉඩ සලසයි.
පෙනහළු පිළිකා වල වඩාත් සුලභ වර්ගය වන්නේ කුඩා නොවන සෛල පෙනහළු පිළිකා (NSCLC) වන අතර එය චීනයේ සහ උතුරු ඇමරිකාවේ පිළිකා මරණ සඳහා ප්‍රධානතම හේතුවකි1,2.කුඩා නොවන සෛල පෙනහළු පිළිකා ඇතිවීමේ අවදානම වැඩි කරන ප්‍රධාන සාධකය දුම්පානයයි.සිගරට් දුමෙහි බෙන්සෝ(a)පයිරීන් (B(a)P), නයිට්‍රොසැමයින් සහ රේඩෝන් ක්ෂය වීමෙන් විකිරණශීලී සමස්ථානික ඇතුළු පිළිකා කාරක 60කට වැඩි ප්‍රමාණයක් අඩංගු වේ. දුම්.B(a)P ට නිරාවරණය වූ විට, cytochrome P450 එය B(a)P-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide (BPDE) බවට පරිවර්තනය කරයි, එය DNA සමඟ ප්‍රතික්‍රියා කර BPDE-DNA ඇඩක්ට් 4 සාදයි. මීට අමතරව, මේවා එකතු කිරීම මගින් මීයන් තුළ පෙනහළු පිළිකා ඇති කිරීම ප්‍රේරණය කරයි, පිළිකා අවධිය සහ මිනිස් පෙනහළු පිළිකාවලට සමාන හිස්ටෝපාථ විද්යාව5.මෙම ලක්ෂණය B(a)P-induced පෙනහළු පිළිකා ආකෘතිය හැකි පිළිකා නාශක ගුණ සහිත සංයෝග ඇගයීම සඳහා සුදුසු පද්ධතියක් බවට පත් කරයි.
අධි අවදානම් කණ්ඩායම්වල, විශේෂයෙන් දුම් පානය කරන්නන් තුළ, පෙනහළු පිළිකා වර්ධනය වීම වැලැක්වීමට හැකි එක් උපාය මාර්ගයක් නම්, ඉන්ට්‍රේපීටීලියල් නියෝප්ලාස්ටික් තුවාල වර්ධනය වීම මැඩපැවැත්වීම සඳහා රසායනික නිවාරක කාරක භාවිතා කිරීම සහ එමඟින් ඒවා මාරාන්තික තත්ත්වයට පත්වීම වැළැක්වීමයි.සත්ව අධ්‍යයනවලින් පෙනී යන්නේ විවිධ රසායනික නිවාරණ කාරක ඵලදායී වන බවයි.අපගේ පෙර වාර්තාව 7 පෙනහළු පිළිකා සඳහා රතු ජින්සෙන්ග් වල හොඳ වැළැක්වීමේ බලපෑම් ඉස්මතු කළේය.මෙම ඔසු ශතවර්ෂ ගණනාවක් තිස්සේ සාම්ප්‍රදායික ආසියාතික වෛද්‍ය විද්‍යාවේ ආයු කාලය සහ සෞඛ්‍යය දිගු කිරීම සඳහා භාවිතා කර ඇති අතර, ප්‍රති-ටියුමර් බලපෑම් ඇති බවට ලේඛනගත කර ඇත.
ginseng හි සක්‍රීය සාධකය වන්නේ ginsenoside වන අතර එය ginseng සාරයවල ගුණාත්මක භාවය ඇගයීම සඳහා සංයුක්ත සලකුණක් ලෙස භාවිතා කරයි.බොරතෙල් ජින්සෙන්ග් නිස්සාරණවල ප්‍රමාණාත්මක විශ්ලේෂණය සාමාන්‍යයෙන් RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5, සහ Rc9,10 ඇතුළුව ginsenosides කිහිපයක් භාවිතා කරයි.ජින්සෙනොසයිඩ් ඉතා දුර්වල මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව හේතුවෙන් සායනික භාවිතය අඩුය.මෙම දුර්වල ජෛව උපයෝගීතාව සඳහා යාන්ත්රණය පැහැදිලි නැතත්, P-glycoprotein (P-gp)12 මගින් ඇතිවන ginsenosides ගලායාම හේතුව විය හැක.P-gp යනු ATP-බන්ධන කැසට් ප්‍රවාහක සුපිරි පවුලෙහි ඇති වැදගත්ම ප්‍රවාහ ප්‍රවාහකයන්ගෙන් එකකි, එය ATP ජලවිච්ඡේදනයේ ශක්තිය බාහිර පරිසරයට අන්තර් සෛලීය ද්රව්ය මුදා හැරීමට භාවිතා කරයි.P-gp ප්‍රවාහක සාමාන්‍යයෙන් අන්ත්‍රය, වකුගඩු, අක්මාව සහ රුධිර-මොළයේ බාධකයේ බහුලව බෙදා හරිනු ලැබේ.P-gp බඩවැල් අවශෝෂණය කිරීමේදී තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි, සහ P-gp නිෂේධනය කිරීම සමහර පිළිකා නාශක ඖෂධවල මුඛ අවශෝෂණය සහ ලබා ගැනීමේ හැකියාව වැඩි කරයි12,14.සාහිත්‍යයේ කලින් භාවිතා කරන ලද නිෂේධක සඳහා උදාහරණ වන්නේ වේරාපාමිල් සහ සයික්ලොස්පොරින් A15 ය.මෙම කාර්යයට චීනයේ සහ කොරියාවේ විවිධ රතු ජින්සෙන්ග් නිස්සාරණයන් පිළිකාවලට බලපෑම් කිරීමේ හැකියාව තක්සේරු කිරීම සඳහා B(a)P-ප්‍රේරිත පෙනහළු පිළිකා අධ්‍යයනය කිරීම සඳහා මූසික පද්ධතියක් ස්ථාපිත කිරීම ඇතුළත් වේ.පිළිකා කාරකයට බලපෑ හැකි විශේෂිත ජින්සෙනොසයිඩ් හඳුනා ගැනීම සඳහා නිස්සාරණ තනි තනිව විශ්ලේෂණය කරන ලදී.පසුව Verapamil P-gp ඉලක්ක කර පිළිකා ඉලක්ක කරන ginsenosides වල මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව සහ චිකිත්සක කාර්යක්ෂමතාව වැඩි දියුණු කිරීමට භාවිතා කරන ලදී.
ginseng saponins පිළිකා කාරකයට චිකිත්සක බලපෑම් ඇති කරන යාන්ත්රණය අපැහැදිලිව පවතී.විවිධ ginsenosides මගින් ඔක්සිකාරක ආතතිය අඩු කිරීමෙන් සහ දෙවන අදියර ඩෙටොක්සිකරණ එන්සයිම සක්‍රීය කිරීමෙන් පිළිකා කාරක මගින් සිදුවන DNA හානි අවම කර ගත හැකි බව පර්යේෂණ මගින් පෙන්වා දී ඇත.Glutathione S-transferase (GST) යනු පිළිකා කාරක මගින් සිදුවන DNA හානි අවම කිරීමට අවශ්‍ය වන සාමාන්‍ය II අදියර එන්සයිමයකි.න්‍යෂ්ටික එරිත්‍රොයිඩ් 2-ආශ්‍රිත සාධකය 2 (Nrf2) යනු රෙඩොක්ස් හෝමියස්ටැසිස් නියාමනය කරන සහ අදියර II එන්සයිමවල ප්‍රකාශනය සහ සයිටොප්‍රොටෙක්ටිව් ප්‍රතිඔක්සිකාරක ප්‍රතිචාර සක්‍රීය කරන වැදගත් පිටපත් කිරීමේ සාධකයකි.අපගේ අධ්‍යයනය B(a)P-induced cytotoxicity සහ BPDE-DNA adduct සෑදීම අඩු කිරීම මෙන්ම සාමාන්‍ය පෙනහළු සෛල තුළ Nrf2 මාර්ගය වෙනස් කිරීම මගින් අදියර II එන්සයිම ප්‍රේරණය කිරීම සඳහා හඳුනාගත් ginsenosides වල බලපෑම ද පරීක්ෂා කරන ලදී.
B(a)P-induced පිළිකාවේ මූසික ආකෘතියක් පිහිටුවීම පෙර වැඩකටයුතු වලට අනුකූල වේ5.රූප සටහන 1A මඟින් B(a)P, ජලය (පාලනය), චීන රතු ජින්සෙන්ග් සාරය (CRG), කොරියානු රතු ජින්සෙන්ග් සාරය A (KRGA) සහ කොරියානු රතු මගින් ප්‍රේරණය කරන ලද මූසික පිළිකා ආකෘතියකට සති 20ක ප්‍රතිකාරයක පර්යේෂණාත්මක සැලසුම පෙන්වයි. ජින්සෙන්ග්.උපුටා ගැනීම B (KRGB) සහ කොරියානු රතු Ginseng Extract C (KRGC).සති 20 ක රතු ජින්සෙන්ග් ප්‍රතිකාරයෙන් පසු, මීයන් CO2 හුස්ම හිරවීම මගින් බිලි දෙන ලදී.රූප සටහන 1B මගින් විවිධ වර්ගයේ රතු ජින්සෙන්ග් සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද සතුන්ගේ මැක්‍රොස්කොපික් පෙනහළු ගෙඩි පෙන්නුම් කරයි, සහ රූප සටහන 1C මගින් පිළිකා නියැදියක නියෝජිත ආලෝක ක්ෂුද්‍ර සටහනක් පෙන්වයි.KRGB-ප්රතිකාර කරන ලද සතුන්ගේ (1.5 ± 0.35) පිළිකා බර, රූප සටහන 1D හි පෙන්වා ඇති පරිදි, පාලන සතුන්ට වඩා (0.82 ± 0.2, P <0.05) අඩු විය.පිළිකා පැටවීම වැළැක්වීමේ සාමාන්‍ය උපාධිය 45% කි.පරීක්ෂා කරන ලද අනෙකුත් රතු ජින්සෙන්ග් සාරය පිළිකා බරෙහි එවැනි සැලකිය යුතු වෙනස්කම් නොපෙන්වයි (P > 0.05).රතු ජින්සෙන්ග් ප්‍රතිකාරයේ සති 20 තුළ මූසික ආකෘතියේ කිසිදු පැහැදිලි අතුරු ආබාධයක් දක්නට නොලැබුණි, ශරීර බරෙහි කිසිදු වෙනසක් (දත්ත පෙන්වා නැත) සහ අක්මාව හෝ වකුගඩු විෂ සහිත බවක් නොමැත (රූපය 1E,F).
රතු ජින්සෙන්ග් සාරය A/J මීයන්ගේ පෙනහළු පිළිකා වර්ධනයට ප්රතිකාර කරයි.(A) පර්යේෂණාත්මක නිර්මාණය.(B) මූසික ආකෘතියක විශාල පෙනහළු පිළිකා.පිළිකා ඊතල මගින් පෙන්නුම් කෙරේ.a: චීන රතු ජින්සෙන්ග් කණ්ඩායම.b: කොරියානු රතු ජින්සෙන්ග් A කාණ්ඩය.c: කොරියානු රතු ginseng කණ්ඩායම B. d: කොරියානු රතු ginseng කණ්ඩායම C. d: පාලන කණ්ඩායම.(C) පෙනහළු ගෙඩියක් පෙන්වන සැහැල්ලු මයික්‍රොග්‍රැෆ්.විශාලනය: 100. b: 400. (D) රතු ජින්සෙන්ග් නිස්සාරක කාණ්ඩයේ පිළිකා පැටවීම.(ඊ) අක්මා එන්සයිම ALT හි ප්ලාස්මා මට්ටම්.(F) Cr වකුගඩු එන්සයිමයේ ප්ලාස්මා මට්ටම්.දත්ත මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස ප්රකාශිත වේ.*P <0.05.
මෙම අධ්‍යයනයේ දී හඳුනාගත් රතු ජින්සෙන්ග් සාරය පහත සඳහන් ginsenosides ප්‍රමාණ කිරීම සඳහා අති-ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ ටැන්ඩම් ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (UPLC-MS/MS) මගින් විශ්ලේෂණය කරන ලදී: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3 , Rh2, F1, Rk1 සහ Rg5.විශ්ලේෂණ මැනීම සඳහා භාවිතා කරන UPLC සහ MS කොන්දේසි පෙර වාර්තාවක විස්තර කර ඇත19.රතු ජින්සෙන්ග් සාරය හතරක UPLC-MS/MS වර්ණදේහ රූප සටහන 2A හි පෙන්වා ඇත.CRG (590.27 ± 41.28 μmol/L) හි ඉහළම සම්පූර්ණ ජින්සෙනොසයිඩ් අන්තර්ගතය සමඟ මුළු ginsenoside අන්තර්ගතයේ සැලකිය යුතු වෙනස්කම් ඇති විය (රූපය 2B).තනි ginsenosides ඇගයීමේදී (රූපය 2C), KRGB අනෙකුත් ginsenosides හා සසඳන විට G-Rg3 හි ඉහළම මට්ටම පෙන්නුම් කළේය (G-Rg3s සඳහා 58.33 ± 3.81 μmol/L සහ G -Rg3r සඳහා 41.56 ± 2.88 μmol/L).රතු ජින්සෙන්ග් වර්ගය (P <0.001).G-Rg3 කාබන් 20 හි හයිඩ්‍රොක්සයිල් කාණ්ඩයේ පිහිටුමෙන් වෙනස් වන G-Rg3r සහ G-Rg3s ස්ටීරියෝසෝමර් යුගලයක් ලෙස සිදු වේ (රූපය 2D).B(a)P-induced Cancer mouse model එකක G-Rg3r හෝ G-Rg3ට වැදගත් පිළිකා නාශක විභවයක් තිබිය හැකි බව ප්රතිඵල පෙන්වා දෙයි.
විවිධ රතු ginseng සාරය තුළ ginsenosides අන්තර්ගතය.(A) රතු ජින්සෙන්ග් සාරය හතරක UPLC-MS/MS වර්ණදේහ.(B) ඇඟවුම් කර ඇති සාරය තුළ සම්පූර්ණ ginsenoside අන්තර්ගතය ඇස්තමේන්තු කිරීම.(C) ලේබල් කරන ලද සාරය තුළ තනි ගින්සෙනොසයිඩ් හඳුනා ගැනීම.(D) ginsenoside stereoisomers G-Rg3r සහ G-Rg3s වල ව්‍යුහයන්.ත්‍රිත්ව නිර්ණයන්හි මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස දත්ත ප්‍රකාශ කෙරේ.***P <0.001.
UPLC-MS/MS අධ්‍යයනයට සති 20 ක ප්‍රතිකාරයෙන් පසු බඩවැල් සහ රුධිර සාම්පලවල ජින්සෙනොසයිඩ් ප්‍රමාණනය කිරීම අවශ්‍ය විය.KRGB සමඟ ප්රතිකාර කිරීමෙන් පෙන්නුම් කළේ රුධිරයේ 0.0063 ± 0.0005 μg/ml Rg5 පමණක් පවතින බවයි.ඉතිරි ginsenosides හඳුනා නොගත් අතර, දුර්වල මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව පෙන්නුම් කරන අතර එම නිසා මෙම ginsenosides වලට නිරාවරණය වීම අඩු විය.
මහා බඩවැලේ ඇඩිනොකාර්සිනෝමා සෛල රේඛාව Caco-2 රූප විද්‍යාත්මකව හා ජෛව රසායනිකව මිනිස් බඩවැල් එපිටිලියල් සෛල වලට සමාන වන අතර, බඩවැල් එපිටිලියල් බාධකය හරහා එන්ට්‍රොසයිට් ප්රවාහනය තක්සේරු කිරීමේදී එහි උපයෝගීතාව පෙන්නුම් කරයි.මෙම විශ්ලේෂණය පදනම් වූයේ පෙර අධ්‍යයනයක් 20 මතය.රූප 3A,B,C,D,E,F මගින් Caco-2 monolayer මොඩලයක් භාවිතයෙන් G-Rg3r සහ G-Rg3 අන්තර් සෛලීය ප්‍රවාහනයේ නියෝජිත රූප පෙන්වයි.Caco-2 ඒකස්ථර හරහා G-Rg3r හෝ G-Rg3 පරිවහනය basolateral සිට apical පැත්තට (Pb-a) අග්‍ර සිට basolateral පැත්තට (Pa-b) වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය.G-Rg3r සඳහා, සාමාන්‍ය Pa-b අගය 0.38 ± 0.06 වූ අතර, එය 50 μmol/L වේරාපාමිල් සමඟ ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසු 0.73 ± 0.06 දක්වා සහ 100 μmol/L verapamil (p, 0.001 සහ <0.001 සහ <0.0.0.0.00.0.09) දක්වා වැඩි විය. පිළිවෙලින් රූපය 2).3A).G-Rg3 සඳහා නිරීක්ෂණ සමාන රටාවක් අනුගමනය කරන ලදී (රූපය 3B), සහ ප්රතිඵල පෙන්නුම් කළේ verapamil ප්රතිකාරය G-Rg3r සහ G-Rg3 ප්රවාහනය වැඩි දියුණු කළ බවයි.Verapamil ප්රතිකාරය මගින් මධ්යන්ය Pb-a සහ G-Rg3r සහ G-Rg3s ප්‍රවාහ අනුපාතවල සැලකිය යුතු අඩුවීමක් ද ඇති විය (රූපය 3C,D,E,F), verapamil ප්රතිකාරය Caco-2 efflux සෛලවල ginsenoside අන්තර්ගතය අඩු කරන බව පෙන්නුම් කරයි..
Caco-2 ඒකස්ථරවල G-Rg3 අන්තර් සෛලීය ප්රවාහනය සහ මීයන් පරිවහනය කිරීමේ පරීක්ෂණයක බඩවැල් අවශෝෂණය.(A) Caco-2 monolayer හි G-Rg3r කාණ්ඩයේ Pa-b අගය.(B) Caco-2 monolayer හි G-Rg3s කාණ්ඩවල Pa-b අගය.(C) Caco-2 monolayer හි G-Rg3r කාණ්ඩයේ Pb අගය.(D) Caco-2 monolayer හි G-Rg3s කාණ්ඩවල Pb අගය.(E) Caco-2 ඒකස්ථරයක G-Rg3r කාණ්ඩවල අස්වැන්න අනුපාතය.(F) Caco-2 monolayer එකක G-Rg3 කාණ්ඩවල අස්වැන්න අනුපාතය.(G) මීයන් තුළ පර්ෆියුෂන් පරීක්ෂණයකදී G-Rg3r බඩවැල් අවශෝෂණය කිරීමේ ප්‍රතිශතය.(H) මීයන් තුළ පර්ෆියුෂන් පරීක්ෂණයකදී G-Rg3 බඩවැල් අවශෝෂණය කිරීමේ ප්‍රතිශතය.පාරගම්යතාව සහ අවශෝෂණය verapamil එකතු කිරීමකින් තොරව සංසන්දනය කර ඇත.ස්වාධීන පරීක්ෂණ පහක මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස දත්ත ප්‍රකාශ කෙරේ.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
පෙර වැඩ 20 ට අනුකූලව, වෙරාපමිල් ප්‍රතිකාරයෙන් පසු බඩවැලේ G-Rg3 අවශෝෂණය වැඩි වේද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා මීයන්ගේ විකලාංග බඩවැල් පරිවහනය සිදු කරන ලදී.ඉහත කාල පරිච්ෙඡ්දය තුළ පිළිකා ආදර්ශ මීයන් තුළ G-Rg3r සහ G-Rg3 බඩවැල් අවශෝෂණය කිරීමේ ප්‍රතිශතය ඇගයීම සඳහා 3G,H හි නියෝජිත පරිවර්ථන විශ්ලේෂණයන් පෙන්වයි.50 μM වේරාපාමිල් සමඟ ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසු දළ වශයෙන් 10% ක දුර්වල G-Rg3r ලබා ගැනීමේ ආරම්භක ප්‍රතිශතය 20% ට වඩා වැඩි වූ අතර 100 μM වෙරාපාමිල් සමඟ ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසු 25% ට වඩා වැඩි විය.එසේම, G-Rg3, 10% ක ආරම්භක ප්‍රතිග්‍රහණයක් ඇති අතර, 50 μM වේරාපාමිල් සමඟ ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසු 20% ට වඩා ඉහළ අගයක් ද, 100 μM වෙරාපාමිල් සමඟ ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසු 30% කට ආසන්න ප්‍රමාණයක් ද පෙන්නුම් කළ අතර, verapamil මගින් P-gp නිෂේධනය වැඩි දියුණු කරන බව යෝජනා කරයි. පෙනහළු පිළිකා මූසික ආකෘතියක් තුළ බඩවැල් G-අවශෝෂණය Rg3.
ඉහත ක්‍රමයට අනුව, රූප සටහන 4A හි පෙන්වා ඇති පරිදි, B(a)P-ප්‍රේරිත පිළිකා ආකෘති මීයන් අහඹු ලෙස කණ්ඩායම් හයකට බෙදා ඇත.පාලන කණ්ඩායමට සාපේක්ෂව G-Rg3 ප්රතිකාර කණ්ඩායම තුළ සැලකිය යුතු බර අඩුවීමක් හෝ විෂ සහිත සායනික සලකුණු දක්නට නොලැබුණි (දත්ත පෙන්වා නැත).සති 20 ක ප්‍රතිකාරයෙන් පසු, එක් එක් මූසිකයේ පෙනහළු එකතු කරන ලදී.රූප සටහන 4B මඟින් ඉහත ප්රතිකාර කණ්ඩායම්වල මීයන් තුළ මැක්‍රොස්කොපික් පෙනහළු පිළිකා පෙන්නුම් කරන අතර, 4C මගින් නියෝජිත පිළිකාවක නියෝජිත ආලෝක ක්ෂුද්‍ර ප්‍රස්ථාරයක් පෙන්වයි.එක් එක් කාණ්ඩයේ පිළිකා බර සම්බන්ධයෙන් (රූපය 4D), G-Rg3r සහ G-Rg3s සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද මීයන් සඳහා වන අගයන් පිළිවෙලින් 0.75 ± 0.29 mm3 සහ 0.81 ± 0.30 mm3 වන අතර G මීයන් සඳහා අගයන් ප්රතිකාර කරන ලදී. සමග -Rg3s 1.63 පිළිවෙලින් ±0.40 mm3.පාලනය මීයන් (p <0.001), G-Rg3 ප්රතිකාරය මීයන් තුළ ගෙඩි බර අඩු කරන බව පෙන්නුම් කරයි.වෙරාපමිල් පරිපාලනය මෙම අඩු කිරීම තවදුරටත් වැඩි දියුණු කළේය: verapamil+ G-Rg3r මීයන්ගේ අගයන් 0.75 ± 0.29 mm3 සිට 0.33 ± 0.25 mm3 (p <0.01) දක්වා අඩු විය (p <0.01), සහ verapamil+ සඳහා අගයන් 0.81 සිට 0.3 0 ± 0. 0.3 ± දක්වා අඩු විය. G. -Rg3s-ප්රතිකාර කළ මීයන් (p <0.05) හි mm3, වෙරාපමිල් මගින් පිළිකා උත්පාදනය සඳහා G-Rg3 හි නිෂේධනීය බලපෑම වැඩි දියුණු කළ හැකි බව පෙන්නුම් කරයි.පිළිකා බර පාලන කණ්ඩායම සහ verapamil කණ්ඩායම, G-Rg3r කණ්ඩායම සහ G-Rg3s කණ්ඩායම, සහ verapamil+G-Rg3r කණ්ඩායම සහ verapamil+G-Rg3s කාණ්ඩය අතර සැලකිය යුතු වෙනස්කම් නොපෙන්වයි.එපමනක් නොව, ඇගයීමට ලක් කරන ලද ප්රතිකාර හා සම්බන්ධ සැලකිය යුතු අක්මාව හෝ වකුගඩු විෂ වීම් නොමැත (රූපය 4E,F).
G-Rg3 ප්‍රතිකාරයෙන් පසු පිළිකා බර සහ ප්ලාස්මා හෝ බඩවැල් G-Rg3r සහ G-Rg3 මට්ටම් දක්වා ඇති කණ්ඩායම්වල.(A) පර්යේෂණාත්මක නිර්මාණය.(B) මූසික ආකෘතියක මැක්‍රොස්කොපික් පිළිකා.පිළිකා ඊතල මගින් පෙන්නුම් කෙරේ.a: G-Rg3r.b: G-Rg3s.c: G-Rg3r verapamil සමඟ සංයෝජනයක්.d: G-Rg3 verapamil සමඟ සංයෝජනයක්.ඈ: වෙරපාමිල්.ඉ: පාලනය.(C) විශාලනය කිරීමේදී ගෙඩියේ දෘශ්‍ය මයික්‍රොග්‍රැෆ්.පිළිතුර: 100x.b: 400X.(D) A/J මීයන්ගේ පිළිකා බර මත G-Rg3 + verapamil ප්‍රතිකාරයේ බලපෑම.(ඊ) අක්මා එන්සයිම ALT හි ප්ලාස්මා මට්ටම්.(F) Cr වකුගඩු එන්සයිමයේ ප්ලාස්මා මට්ටම්.(G) G-Rg3r හෝ G-Rg3 හි සඳහන් කාණ්ඩවල ප්ලාස්මා මට්ටම්.(H) ඇඟවුම් කරන ලද කණ්ඩායම්වල බඩවැල්වල G-Rg3r හෝ G-Rg3s මට්ටම්.ත්‍රිත්ව නිර්ණයන්හි මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස දත්ත ප්‍රකාශ කෙරේ.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
B(a)P-induced Cancer Model මීයන්ගේ G-Rg3 මට්ටම් ක්‍රම අංශයේ විස්තර කර ඇති ක්‍රමයට අනුව සති 20ක ප්රතිකාර කාලයකට පසුව UPLC-MS/MS විසින් තක්සේරු කරන ලදී.රූපසටහන් 4G සහ H පිළිවෙලින් ප්ලාස්මා සහ බඩවැල් G-Rg3 මට්ටම් පෙන්වයි.ප්ලාස්මා G-Rg3r මට්ටම් 0.44 ± 0.32 μmol/L සහ 1.17 ± 0.47 μmol/L දක්වා වැඩි වී verapamil (p <0.001) සමගාමීව පරිපාලනය කිරීමත් සමඟ බඩවැල් G-Rg3r මට්ටම් 0.53 ± 0.08.වෙරපාමිල් සමඟ සංයෝජිතව ඇති විට, g 1.35 ± 0.13 μg/g (p <0.001) දක්වා වැඩි විය.G-Rg3 සඳහා, ප්රතිඵල සමාන රටාවක් අනුගමනය කළ අතර, වෙරාපමිල් ප්රතිකාරය A/J මීයන් තුළ G-Rg3 හි මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව වැඩි කළ බව පෙන්නුම් කරයි.
HEL සෛල මත B(a)P සහ G-Rg3 වල සයිටොටොක්සිසිටි බව තක්සේරු කිරීමට සෛල ශක්‍යතා විශ්ලේෂණය භාවිතා කරන ලදී.HEL සෛල තුළ B(a)P මගින් ප්‍රේරණය කරන ලද සයිටොටොක්සිසිටි බව රූප සටහන 5A හි පෙන්වා ඇති අතර G-Rg3r සහ G-Rg3 හි විෂ නොවන ගුණාංග රූප 5A සහ 5B හි දක්වා ඇත.5B, C. G-Rg3 හි සයිටොප්‍රොටෙක්ටිව් බලපෑම ඇගයීම සඳහා, B(a)P විවිධ සාන්ද්‍රණ G-Rg3r හෝ G-Rg3 සමඟ hEL සෛල තුළට සම-පරිපාලනය කරන ලදී.රූප සටහන 5D හි පෙන්වා ඇති පරිදි, G-Rg3r 5 μM, 10 μM, සහ 20 μM සාන්ද්‍රණයන්හි සෛල ශක්‍යතාව පිළිවෙලින් 58.3%, 79.3% සහ 77.3% දක්වා ප්‍රතිෂ්ඨාපනය කරන ලදී.G-Rg3s කාණ්ඩයේ ද සමාන ප්රතිඵල දැකිය හැක.G-Rg3 හි සාන්ද්‍රණය 5 µM, 10 µM සහ 20 µM වූ විට, සෛල ශක්‍යතාව පිළිවෙලින් 58.3%, 72.7% සහ 76.7% දක්වා ප්‍රතිසාධනය කරන ලදී (රූපය 5E) .)ELISA කට්ටලයක් භාවිතයෙන් BPDE-DNA ඇඩෝන වල පැවැත්ම මනිනු ලැබේ.අපගේ ප්රතිඵල පෙන්නුම් කළේ පාලක කණ්ඩායම හා සසඳන විට B(a)P-ප්රතිකාර කළ කණ්ඩායම තුළ BPDE-DNA ඇබ්බැහි මට්ටම් වැඩි වී ඇති නමුත් G-Rg3 සම-ප්රතිකාර සමඟ සසඳන විට B(a)P කාණ්ඩයේ BPDE-DNA ඇබ්බැහි මට්ටම් ප්රතිකාර කරන ලද කණ්ඩායමේ B, DNA ආකලන මට්ටම් සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය.B(a)P සමඟ පමණක් ප්රතිකාර කිරීමේ ප්රතිඵල රූප සටහන 5F හි පෙන්වා ඇත (G-Rg3r සඳහා 1.87 ± 0.33 එදිරිව 3.77 ± 0.42, 1.93 ± 0.48 එදිරිව 3.77 ± 0.42 සඳහා G -Rg30, p <1).
G-Rg3 සහ B(a)P සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛල තුළ සෛල ශක්‍යතාව සහ BPDE-DNA ඇඩක්ට් සෑදීම.(A) B(a)P සමඟ ප්රතිකාර කරන hEL සෛලවල ශක්‍යතාව.(B) G-Rg3r සමඟ ප්රතිකාර කරන හෙල් සෛලවල ශක්‍යතාව.(C) G-Rg3 සමඟ ප්රතිකාර කරන හෙල් සෛලවල ශක්‍යතාව.(D) B(a)P සහ G-Rg3r සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල ශක්‍යතාව.(ඊ) B(a)P සහ G-Rg3 සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද හෙල් සෛලවල ශක්‍යතාව.(F) B(a)P සහ G-Rg3 සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල BPDE-DNA එකතු කිරීමේ මට්ටම්.ත්‍රිත්ව නිර්ණයන්හි මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස දත්ත ප්‍රකාශ කෙරේ.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
GST එන්සයිම ප්‍රකාශනය 10 μM B(a)P සහ 10 μM G-Rg3r හෝ G-Rg3s සමඟ සම-ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසුව අනාවරණය විය.අපගේ ප්රතිඵල පෙන්නුම් කළේ B(a)P GST ප්‍රකාශනය යටපත් කර ඇති බවයි (G-Rg3r කාණ්ඩයේ 59.7 ± 8.2% සහ G-Rg3s කාණ්ඩයේ 39 ± 4.5%), සහ B(a)P G-Rg3r සමඟ සම්බන්ධ වී ඇත. , හෝ G-Rg3r සමඟ, හෝ G-Rg3r සමඟ.G-Rg3s සමඟ සම-ප්රතිකාරය GST ප්‍රකාශනය ප්‍රතිසාධනය කරන ලදී.GST ප්‍රකාශනය (G-Rg3r කාණ්ඩයේ 103.7 ± 15.5% සහ G-Rg3s කාණ්ඩයේ 110 ± 11.1%, p <0.05 සහ p <0.001, පිළිවෙලින්, Fig. 6A, B, සහ C).GST ක්‍රියාකාරකම් ක්‍රියාකාරකම් තක්සේරු කට්ටලයක් භාවිතයෙන් තක්සේරු කරන ලදී.අපගේ ප්රතිඵල පෙන්නුම් කළේ B(a)P පමණක් කාණ්ඩයට (96.3 ± 6.6% එදිරිව G-Rg3r කාණ්ඩයේ 35.7 ± 7.8% එදිරිව G-Rg3r කාණ්ඩයේ 92.3 ± 6.5 ට සාපේක්ෂව සංයෝජන ප්රතිකාර කණ්ඩායමට ඉහළ GST ක්‍රියාකාරකම් ඇති බවයි. )G-Rg3s කාණ්ඩයේ % එදිරිව 35.7 ± 7.8%, p <0.001, Figure 6D).
B(a)P සහ G-Rg3 සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල GST සහ Nrf2 ප්‍රකාශනය.(A) Western blotting මගින් GST ප්‍රකාශනය හඳුනා ගැනීම.(B) B(a)P සහ G-Rg3r සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල GST හි ප්‍රමාණාත්මක ප්‍රකාශනය.(C) B(a)P සහ G-Rg3s සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල GST හි ප්‍රමාණාත්මක ප්‍රකාශනය.(D) B(a)P සහ G-Rg3 සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල GST ක්‍රියාකාරකම්.(E) බටහිර බ්ලොටිං මගින් Nrf2 ප්‍රකාශනය හඳුනා ගැනීම.(F) B(a)P සහ G-Rg3r සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල Nrf2 හි ප්‍රමාණාත්මක ප්‍රකාශනය.(G) B(a)P සහ G-Rg3s සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල Nrf2 හි ප්‍රමාණාත්මක ප්‍රකාශනය.ත්‍රිත්ව නිර්ණයන්හි මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස දත්ත ප්‍රකාශ කෙරේ.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
B(a)P-induced tumorigenesis හි G-Rg3-මැදිහත්වීම මර්දනයට සම්බන්ධ වන මාර්ග පැහැදිලි කිරීම සඳහා, Nrf2 ප්‍රකාශනය බටහිර බ්ලොටින් මගින් තක්සේරු කරන ලදී.රූප සටහන 6E,F,G හි පෙන්වා ඇති පරිදි, පාලන කණ්ඩායම හා සසඳන විට, B(a)P ප්රතිකාර කණ්ඩායමේ Nrf2 මට්ටම පමණක් අඩු විය;කෙසේ වෙතත්, B(a)P ප්රතිකාර කණ්ඩායම හා සසඳන විට, PG-Rg3 කාණ්ඩයේ B(a) Nrf2 මට්ටම් වැඩි විය (G-Rg3r සඳහා 106 ± 9.5% එදිරිව 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% සඳහා G-Rg3s සඳහා G-Rg3r එදිරිව 41 ± 9.8%, p <0.01).
විශේෂිත කුඩා බාධා කරන RNA (siRNA) භාවිතයෙන් Nrf2 ප්‍රකාශනය යටපත් කිරීමෙන් අපි Nrf2 හි වැළැක්වීමේ කාර්යභාරය තහවුරු කළෙමු.Nrf2 knockdown බටහිර blotting මගින් තහවුරු කරන ලදී (රූපය 7A,B).රූප සටහන 7C,D හි පෙන්වා ඇති පරිදි, B(a)P සහ G-Rg3 සමඟ hEL සෛල සම-ප්රතිකාර කිරීම BPDE-DNA එකතු කිරීම් ගණන (1.47 ± 0.21) B(a)P සමඟ සසඳන විට අඩු වීමට හේතු විය. පාලන siRNA කාණ්ඩයේ පමණක්.) G-Rg3r 4.13 ± 0.49, G-Rg3s 1.8 ± 0.32 සහ 4.1 ± 0.57, p <0.01).කෙසේ වෙතත්, BPDE-DNA ගොඩනැගීමට G-Rg3 හි නිෂේධනීය බලපෑම Nrf2 knockdown මගින් අහෝසි කරන ලදී.siNrf2 කාණ්ඩයේ, B(a)P සහ G-Rg3 සම-ප්රතිකාර සහ B(a)P ප්රතිකාර අතර BPDE-DNA adduct සෑදීමේ සැලකිය යුතු වෙනසක් නොතිබුණි (G-Rg3r සඳහා 3.0 ± 0.21 එදිරිව 3.56 ± 0.32. )G-Rg3r සඳහා 3.6 එදිරිව G-Rg3s සඳහා ±0.45 එදිරිව 4.0±0.37, p > 0.05).
HEL සෛල තුළ BPDE-DNA adduct ගොඩනැගීමට Nrf2 තට්ටු කිරීමේ බලපෑම.(A) Nrf2 knockdown බටහිර blotting මගින් තහවුරු විය.(B) Nrf2 කලාප තීව්‍රතාවය ප්‍රමාණ කිරීම.(C) B(a)P සහ G-Rg3r සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල BPDE-DNA ඇඩක්ට් මට්ටම් මත Nrf2 තට්ටු කිරීමේ බලපෑම.(D) B(a)P සහ G-Rg3 සමඟ ප්රතිකාර කරන ලද hEL සෛලවල BPDE-DNA ඇඩක්ට් මට්ටම් මත Nrf2 තට්ටු කිරීමේ බලපෑම.ත්‍රිත්ව නිර්ණයන්හි මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස දත්ත ප්‍රකාශ කෙරේ.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
මෙම අධ්‍යයනය මගින් B(a)P-ප්‍රේරිත පෙනහළු පිළිකාවේ මූසික ආකෘතියක් මත විවිධ රතු ජින්සෙන්ග් සාරය වල නිවාරණ බලපෑම් ඇගයීමට ලක් කරන ලද අතර KRGB ප්රතිකාර මගින් ගෙඩි බර සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කරන ලදී.මෙම ginseng සාරය තුළ G-Rg3 ඉහළම අන්තර්ගතය ඇති බව සලකන විට, tumorigenesis නිෂේධනය කිරීමේදී මෙම ginsenoside හි වැදගත් කාර්යභාරය අධ්‍යයනය කර ඇත.G-Rg3r සහ G-Rg3 (G-Rg3 හි එපීමර් දෙකක්) යන දෙකම B(a)P-ප්‍රේරිත පිළිකාවේ මූසික ආකෘතියක ගෙඩි බර සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළේය.G-Rg3r සහ G-Rg3 පිළිකා සෛලවල ඇපොප්ටෝසිස් ප්‍රේරණය කිරීම මගින් පිළිකා නාශක බලපෑම් ඇති කරයි.G-Rg3 සෛලීය පරිවෘත්තීය 25 වළක්වන බව ද පෙන්වා දී ඇති අතර, රසායනික චිකිත්සාව සහ විකිරණ චිකිත්සාවේ බලපෑම වැඩි දියුණු කිරීමට G-Rg3 හි හැකියාව ලේඛනගත කර ඇත26,27.G-Rg3 ප්රතිකාරය මගින් B(a)P28 හි genotoxic බලපෑම් අඩු කළ හැකි බව Poon et al විසින් පෙන්නුම් කරන ලදී.පාරිසරික පිළිකා කාරක අණු ඉලක්ක කර පිළිකා වැළැක්වීම සඳහා G-Rg3 හි චිකිත්සක විභවය මෙම අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කරයි.
ඔවුන්ගේ හොඳ රෝග නිවාරණ හැකියාව තිබියදීත්, ginsenosides වල දුර්වල මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව මෙම අණු වල සායනික භාවිතය සඳහා අභියෝගයක් වේ.මීයන් තුළ ජින්සෙනොසයිඩ් මුඛ පරිපාලනය පිළිබඳ ඖෂධීය විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ එහි ජෛව උපයෝගීතාව තවමත් 5% 29 ට වඩා අඩු බවයි.මෙම පරීක්ෂණවලින් පෙන්නුම් කළේ සති 20 ක ප්රතිකාර කාලයෙන් පසු රුධිරයේ Rg5 මට්ටම පමණක් අඩු වූ බවයි.දුර්වල ජෛව උපයෝගීතාවයේ යටින් පවතින යාන්ත්රණය පැහැදිලි කිරීමට ඉතිරිව තිබුණද, P-gp ජින්සෙනොසයිඩ් ප්‍රවාහයට සම්බන්ධ යැයි සැලකේ.P-gp අවහිර කරන්නෙකු වන verapamil පරිපාලනය G-Rg3r සහ G-Rg3 වල වාචික ජෛව උපයෝගීතාව වැඩි කරන බව මෙම කාර්යය පළමු වරට පෙන්නුම් කළේය.මේ අනුව, මෙම සොයාගැනීමෙන් ඇඟවෙන්නේ G-Rg3r සහ G-Rg3s එහි ගලායාම නියාමනය කිරීම සඳහා P-gp හි උපස්ථර ලෙස ක්‍රියා කරන බවයි.
පෙනහළු පිළිකා පිළිබඳ මූසික ආකෘතියක් තුළ වෙරාපමිල් සමඟ ඒකාබද්ධ ප්රතිකාරය G-Rg3 හි මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව වැඩි කරන බව මෙම කාර්යය පෙන්නුම් කරයි.P-gp අවහිරය මත G-Rg3 ආන්ත්‍රික ට්‍රාන්ස්සෙලියුලර් ප්රවාහනය වැඩි කිරීමෙන් මෙම සොයා ගැනීම සහය වන අතර එමඟින් එහි අවශෝෂණය වැඩි වේ.Caco2 සෛලවල විශ්ලේෂණයන් පෙන්නුම් කළේ වෙරාපමිල් ප්රතිකාරය මගින් පටල පාරගම්යතාව වැඩි දියුණු කරන අතරම G-Rg3r සහ G-Rg3 වල ප්‍රවාහය අඩු කරන බවයි.Yang et al විසින් කරන ලද අධ්‍යයනයක්.අධ්‍යයනවලින් පෙන්නුම් කර ඇත්තේ සයික්ලොස්පෝරීන් A (තවත් P-gp අවහිර කරන්නෙකු) සමඟ ප්රතිකාර කිරීම ginsenoside Rh2 හි ජෛව උපයෝගීතාව 1%20 සිට 30% දක්වා වැඩි කරන බවයි.Ginsenosides සංයෝග K සහ Rg1 ද සමාන ප්රතිඵල පෙන්නුම් කරයි30,31.verapamil සහ cyclosporin A සම-පරිපාලනය කළ විට, Caco-2 සෛලවල K සංයෝගයේ ගලායාම 26.6 සිට 3 දක්වා සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වූ අතර, එහි අන්තර් සෛල මට්ටම් 40 ගුණයකින් වැඩි විය30.verapamil හමුවේ, Rg1 මට්ටම මී පෙණහලු අපිච්ඡද සෛලවල වැඩි විය, Meng et al.31 විසින් පෙන්වා දී ඇති පරිදි, ginsenoside efflux හි P-gp සඳහා භූමිකාවක් යෝජනා කරයි.කෙසේ වෙතත්, සමහර ginsenosides (Rg1, F1, Rh1 සහ Re වැනි) පිටාර ගැලීම මත verapamil එකම බලපෑමක් ඇති කර නැත, Liang et al විසින් පෙන්වා දී ඇති පරිදි P-gp උපස්ථර මගින් ඒවාට බලපෑමක් නොමැති බව පෙන්නුම් කරයි.32මෙම නිරීක්‍ෂණය වෙනත් ප්‍රවාහකයන්ගේ සහ විකල්ප ජින්සෙනොසයිඩ් ව්‍යුහයන්ගේ සම්බන්ධය හා සම්බන්ධ විය හැකිය.
පිළිකා සඳහා G-Rg3 හි වැළැක්වීමේ බලපෑමේ යාන්ත්රණය අපැහැදිලි ය.B(a)P-induced tumorigenesis වැලැක්වීම සඳහා යටින් පවතින යාන්ත්රණය විය හැකි ඔක්සිකාරක ආතතිය සහ දැවිල්ල අඩු කිරීම මගින් G-Rg3 DNA හානි සහ ඇපොප්ටෝසිස් වලක්වන බව පෙර අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත.සමහර වාර්තා පෙන්වා දෙන්නේ BPDE-DNA34 සෑදීමට අදියර II එන්සයිම මොඩියුලේට් කිරීමෙන් B(a)P මගින් ප්‍රේරණය වන genotoxicity අඩු කළ හැකි බවයි.GST යනු සාමාන්‍ය අදියර II එන්සයිමයක් වන අතර එය GSH BPDE වෙත බන්ධනය කිරීම ප්‍රවර්ධනය කිරීම මගින් BPDE-DNA ඇබ්බැහි වීම වළක්වයි, එමඟින් B(a)P35 මගින් ප්‍රේරිත DNA හානිය අඩු කරයි.අපගේ ප්රතිඵල පෙන්වා දෙන්නේ G-Rg3 ප්රතිකාරය මගින් HEL සෛල තුළ B(a)P-induced cytotoxicity සහ BPDE-DNA adduct සෑදීම අඩු කරන අතර GST ප්‍රකාශනය සහ vitro හි ක්‍රියාකාරිත්වය යථා තත්වයට පත් කරන බවයි.කෙසේ වෙතත්, මෙම බලපෑම් Nrf2 නොමැති විට නොතිබුණි, G-Rg3 Nrf2 මාර්ගය හරහා සයිටොප්‍රොටෙක්ටිව් බලපෑම් ඇති කරන බව යෝජනා කරයි.Nrf2 යනු xenobiotics නිෂ්කාශනය ප්‍රවර්ධනය කරන II අදියර ඩෙටොක්සිකරණ එන්සයිම සඳහා ප්‍රධාන පිටපත් කිරීමේ සාධකයකි.Nrf2 මාර්ගය සක්‍රිය කිරීමෙන් සෛල ආරක්ෂණය ඇති කරන අතර පටක හානි අඩු කරයි37.එපමනක් නොව, පිළිකා කාරකයේ පිළිකා මර්දනකාරකයක් ලෙස Nrf2 හි භූමිකාවට වාර්තා කිහිපයක් සහාය දක්වා ඇත38.අපගේ අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ G-Rg3 මගින් Nrf2 මාර්ගය ප්‍රේරණය කිරීම B(a)P-induced genotoxicity හි වැදගත් නියාමන කාර්යභාරයක් ඉටු කරන අතර එමඟින් II අදියර එන්සයිම සක්‍රීය කිරීම මගින් B(a)P detoxification ඇති කිරීම මගින් tumorigenesis ක්‍රියාවලිය වළක්වයි.
ginsenoside G-Rg3 හි වැදගත් මැදිහත්වීම හරහා මීයන් තුළ B(a)P-ප්‍රේරිත පෙනහළු පිළිකා වැලැක්වීම සඳහා රතු ජින්සෙන්ග්හි ඇති හැකියාව අපගේ කාර්යය මගින් අනාවරණය කරයි.මෙම අණුවේ දුර්වල මුඛ ජෛව උපයෝගීතාව එහි සායනික යෙදුමට බාධා කරයි.කෙසේ වෙතත්, මෙම අධ්‍යයනයෙන් ප්‍රථම වරට පෙන්නුම් කරන්නේ G-Rg3 යනු P-gp හි උපස්ථරයක් වන අතර, P-gp නිෂේධකයක් පරිපාලනය කිරීම මගින් vitro සහ vivo තුළ G-Rg3 ජෛව උපයෝගීතාව වැඩි කිරීමයි.G-Rg3 Nrf2 මාර්ගය නියාමනය කිරීම මගින් B(a)P-induced cytotoxicity අඩු කරයි, එය එහි වැළැක්වීමේ ක්‍රියාකාරිත්වය සඳහා විභව යාන්ත්‍රණයක් විය හැකිය.අපගේ අධ්‍යයනයෙන් පෙනහළු පිළිකා වැළැක්වීම සහ ප්රතිකාර කිරීම සඳහා ginsenoside G-Rg3 හි විභවය තහවුරු කරයි.
සති හයක ගැහැණු A/J මීයන් (20 ± 1 g) සහ සති 7ක් වයසැති පිරිමි Wistar මීයන් (250 ± 20 g) ජැක්සන් රසායනාගාරයෙන් (Bar Harbour, USA) සහ Wuhan Institute of Zoology වෙතින් ලබා ගන්නා ලදී.විශ්ව විද්‍යාලය (වුහාන්, චීනය).Chinese Type Culture Collection Center (Wuhan, China) අපට Caco-2 සහ hEL සෛල ලබා දුන්නා.Sigma-Aldrich (St. Louis, USA) යනු B(a)P සහ tricaprine වල ප්‍රභවයකි.පිරිසිදු කරන ලද ginsenosides G-Rg3r සහ G-Rg3s, dimethyl sulfoxide (DMSO), CellTiter-96 proliferation assay kit (MTS), verapamil, අවම අත්‍යවශ්‍ය මාධ්‍යය (MEM) සහ fetal bovine serum (FBS) Chengdu Must Bio-Technology වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. .සීමිත සමාගම.(චෙන්ඩු, චීනය).QIAamp DNA කුඩා කට්ටලය සහ BPDE-DNA adduct ELISA කට්ටලය Qiagen (Stanford, CA, USA) සහ Cell Biolabs (San Diego, CA, USA) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී.GST ක්‍රියාකාරකම් තක්සේරු කට්ටලය සහ සම්පූර්ණ ප්‍රෝටීන් විශ්ලේෂණ කට්ටලය (සම්මත BCA ක්‍රමය) Solarbio (Beijing, China) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී.සියලුම රතු ජින්සෙන්ග් සාරය Mingyu රසායනාගාරයේ ගබඩා කර ඇත 7. Hong Kong Baptist University (Hong Kong, China) සහ Korea Cancer Center (Seoul, Korea) CRG සාරය සහ විවිධ කොරියානු සම්භවයක් ඇති විවිධ රතු ජින්සෙන්ග් සාරය (KRGA, KRGB ඇතුළුව) වාණිජ මූලාශ්‍ර වේ. සහ KRGC).රතු ජින්සෙන්ග් සෑදී ඇත්තේ අවුරුදු 6 ක් පැරණි නැවුම් ජින්සෙන්ග් වල මුල් වලිනි.රතු ජින්සෙන්ග් සාරය ලබා ගන්නේ ජින්සෙන්ග් ජලයෙන් තුන් වරක් සෝදා, පසුව ජලීය සාරය සාන්ද්‍රණය කර, අවසානයේ අඩු උෂ්ණත්වයේ වියළීම මගින් ජින්සෙන්ග් සාරය කුඩු ලබා ගැනීමයි.ප්‍රතිදේහ (anti-Nrf2, anti-GST, සහ β-actin), horseradish peroxidase-conjugated anti-rabbit immunoglobulin G (IgG), transfection reagent, control siRNA සහ Nrf2 siRNA, Santa Cruz Biotechnology (CA) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. .), ඇඑජ).
Caco2 සහ hEL සෛල 5% CO2 හි ආර්ද්‍රතා වායුගෝලය තුළ 37 °C දී 10% FBS අඩංගු MEM සමඟ 100 mm2 සෛල සංස්කෘතික ආහාරවල වගා කරන ලදී.ප්රතිකාර කොන්දේසි වල බලපෑම තීරණය කිරීම සඳහා, hEL සෛල පැය 48 ක් සඳහා MEM හි B(a)P සහ G-Rg3 හි විවිධ සාන්ද්රණයන් සමඟ පුරවා ඇත.සෛල රහිත සාරය සකස් කිරීම සඳහා සෛල තවදුරටත් විශ්ලේෂණය කිරීමට හෝ එකතු කිරීමට හැකිය.
සියලුම අත්හදා බැලීම් ටොංජි වෛද්‍ය විද්‍යාලයේ පර්යේෂණාත්මක සත්ව ආචාර ධර්ම කමිටුව විසින් අනුමත කරන ලදී, Huazhong විද්‍යා හා තාක්ෂණ විශ්ව විද්‍යාලය (අනුමත අංක 2019; ලියාපදිංචි අංක 4587TH).සියලුම අත්හදා බැලීම් අදාළ මාර්ගෝපදේශ සහ රෙගුලාසිවලට අනුකූලව සිදු කරන ලද අතර, සත්ව පර්යේෂණ: In Vivo Experiments (ARRIVE) මාර්ගෝපදේශයන්ට අනුකූලව අධ්‍යයනය සිදු කරන ලදී.සති අටක් වයසැති A/J මීයන් ප්‍රථමයෙන් ට්‍රයිකැප්‍රීන් ද්‍රාවණයෙන් (100 mg/kg, 0.2 ml) B(a)P සමඟ අභ්‍යන්තරව එන්නත් කරන ලදී.සතියකට පසු, මීයන් අහඹු ලෙස පාලන කණ්ඩායම් සහ විවිධ ප්රතිකාර කණ්ඩායම් වලට බෙදා ඇත, එක් කණ්ඩායමකට මීයන් 15 ක් සහ දිනකට එක් වරක් ගිල්වා ඇත.සති 20 ක ප්‍රතිකාරයෙන් පසු, CO2 asphyxia මගින් සතුන් බිලි දෙන ලදී.පෙනහළු එකතු කර පැය 24 ක් සවි කර ඇත.විඝටන අන්වීක්ෂයක් යටතේ එක් එක් පෙණහලු සඳහා පෘෂ්ඨීය පිළිකා ගණන සහ තනි පිළිකා ප්‍රමාණය ගණනය කරන ලදී.පිළිකා පරිමා ඇස්තමේන්තු (V) පහත ප්‍රකාශනය භාවිතයෙන් ගණනය කර ඇත: V (mm3) = 4/3πr3, මෙහි r යනු ගෙඩියේ විෂ්කම්භය වේ.මීයන්ගේ පෙනහළුවල ඇති සියලුම පිළිකා පරිමාවන්ගේ ශුද්ධ එකතුව මුළු පිළිකා පරිමාව නියෝජනය කරන අතර, එක් එක් කාණ්ඩයේ සාමාන්‍ය සම්පූර්ණ පිළිකා පරිමාව පිළිකා භාරය නියෝජනය කරයි.UPLC-MS/MS නිර්ණය සඳහා සම්පූර්ණ රුධිර හා බඩවැල් සාම්පල එකතු කර -80 ° C දී ගබඩා කර ඇත.සෙරුමය එකතු කරන ලද අතර අක්මාව සහ වකුගඩු ක්‍රියාකාරිත්වය තක්සේරු කිරීම සඳහා ඇලනින් ඇමයිනොට්‍රාන්ස්ෆෙරේස් (ALT) සහ සෙරුම් ක්‍රියේටිනින් (Cr) මට්ටම් විශ්ලේෂණය කිරීමට ස්වයංක්‍රීය රසායන විද්‍යා විශ්ලේෂකය භාවිතා කරන ලදී.
එකතු කරන ලද සාම්පල සීතල ගබඩාවෙන් ඉවත් කර, දිය වී, බර කර, ඉහත විස්තර කර ඇති පරිදි නල තුළට දමනු ලැබේ.මෙයට මිලි ලීටර් 0.8 මෙතනෝල් ද්‍රාවණයක 0.5 μM ෆ්ලොරිසින් (අභ්‍යන්තර සම්මත) එකතු කරන ලදී.පසුව පටක ඉරීම භාවිතයෙන් පටක සමජාතීය කරන ලද අතර පසුව සමජාතීය 1.5 ml ක්ෂුද්‍ර කේන්ද්රාපසාරී නලයකට මාරු කරන ලදී.මිශ්රණය විනාඩි 15 ක් සඳහා 15500 rpm දී කේන්ද්රාපසාරී කර ඇත.සුපිරි නයිට්රජන් මිලි ලීටර් 1.0 ක් ඉවත් කිරීමෙන් පසු නයිට්රජන් සමඟ වියළන්න.ප්‍රකෘතිමත් වීම සඳහා මයික්‍රො ලීටර් දෙසීයක මෙතනෝල් භාවිතා කරන ලදී.රුධිරය එක් රේඛාවක් මත එකතු කර සකස් කර ඇති අතර සියලු මිනුම් සඳහා යොමු කිරීමක් ලෙස භාවිතා කරයි.
verapamil එකතු කිරීම මගින් G-Rg3 ප්‍රවාහනයේ විභව වැඩිදියුණු කිරීම් ඇගයීම සඳහා ළිං 24 ට්‍රාන්ස්වෙල් තහඩු එක් ළිඳකට 1.0 × 105 Caco-2 සෛල සමඟ බීජ කරන ලදී.සති 3 ක සංස්කෘතියෙන් පසු, සෛල HBSS සමඟ සෝදා 37 ° C දී පූර්ව නිවාරණය කර ඇත.10 μM G-Rg3 හි 400 μL (G-Rg3r, G-Rg3s, හෝ 50 හෝ 100 μM වේරාපාමිල් සහිත මිශ්‍රණයක්) ඒක ස්ථරයේ බාසෝලේටරල් හෝ අග්‍ර පැත්තට එන්නත් කරන ලද අතර අනෙක් HBSS ද්‍රාවණයට 600 μL එකතු කරන ලදී. පැත්ත.නියමිත වේලාවට (0, 15, 30, 45, 60, 90 සහ 120 විනාඩි) සංස්කෘතික මාධ්ය 100 µl එකතු කර මෙම පරිමාව සෑදීමට HBSS 100 µl එකතු කරන්න.UPLC-MS/MS මගින් හඳුනා ගන්නා තෙක් සාම්පල −4 °C දී ගබඩා කර ඇත.Papp = dQ/(dT × A × C0) යන ප්‍රකාශනය පෙනෙන ඒක දිශානුගත අග්‍ර සහ basolateral පාරගම්යතාව සහ අනෙක් අතට (පිළිවෙලින් Pa-b සහ Pb-a) ප්‍රමාණ කිරීමට භාවිතා කරයි;dQ/dT යනු සාන්ද්‍රණයේ වෙනස වන අතර A (0.6 cm2) යනු ඒකස්ථරයෙහි මතුපිට ප්‍රදේශය වන අතර C0 යනු ආරම්භක දායක සාන්ද්‍රණය වේ.ප්‍රවාහ අනුපාතය Pb-a/Pa-b ලෙස ගණනය කරනු ලබන අතර එය අධ්‍යයන ඖෂධයේ ප්‍රවාහ අනුපාතය නියෝජනය කරයි.
පිරිමි Wistar මීයන් පැය 24 ක් නිරාහාරව සිට, ජලය පමණක් පානය කර, 3.5% pentobarbital ද්‍රාවණයක් සහිත එන්නත් කිරීමකින් නිර්වින්දනය කරන ලදී.ඇතුල් කරන ලද සිලිකොන් නළය duodenum හි අවසානය ඇතුල්වීම ලෙසත්, ileum හි අවසානය පිටවීම ලෙසත් ඇත.0.1 ml/min ප්‍රවාහ අනුපාතයකින් සමස්ථානික HBSS හි 10 µM G-Rg3r හෝ G-Rg3s සමඟ ඇතුල්වීම පොම්ප කිරීමට peristaltic පොම්පයක් භාවිතා කරන්න.10 μM G-Rg3r හෝ G-Rg3 වලට සංයෝගයේ 50 μM හෝ 100 μM එකතු කිරීමෙන් වෙරාපමිල් වල බලපෑම තක්සේරු කරන ලදී.UPLC-MS/MS පර්ෆියුෂන් ආරම්භයේ සිට මිනිත්තු 60, 90, 120, සහ 150 කාලය තුළ එකතු කරන ලද පර්ෆියුෂන් සාරය මත සිදු කරන ලදී.අවශෝෂණ ප්‍රතිශතය % අවශෝෂණ = (1 - Cout/Cin) × 100% සූත්‍රය මගින් ප්‍රමාණ කෙරේ.පිටවන ස්ථානයේ සහ ඇතුල්වීමේ G-Rg3 සාන්ද්‍රණය පිළිවෙලින් Cout සහ Cin මගින් ප්‍රකාශ වේ.
hEL සෛල එක් ළිඳකට සෛල 1 × 104 ඝනත්වයකින් 96-ළිං තහඩු වල බීජ කර B(a)P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) හෝ G-Rg3 සමඟ DMSO හි දිය කර ඇත. .ඖෂධ පසුව පැය 48 ක් පුරා විවිධ සාන්ද්රණයන් (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) දක්වා සංස්කෘතික මාධ්ය සමඟ තනුක කර ඇත.වාණිජමය වශයෙන් ලබා ගත හැකි MTS පරීක්ෂණ කට්ටලයක් භාවිතා කරමින්, සෛල සම්මත ප්‍රොටෝකෝලයකට යටත් කර පසුව 490 nm හි මයික්‍රොප්ලේට් රීඩරයක් භාවිතයෙන් මනිනු ලැබේ.B (a)P (10 μM) සහ G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) සමඟ සම-ප්රතිකාර කරන ලද කණ්ඩායම්වල සෛල ශක්‍යතා මට්ටම ඉහත ක්‍රමයට අනුව තක්සේරු කර ප්රතිකාර නොකළ කණ්ඩායම සමඟ සසඳන ලදී.
hEL සෛල 1 × 105 සෛල/ළිඳක ඝනත්වයකින් 6-ළිං තහඩු වල බීජ කර 10 μM G-Rg3 ඇති විට හෝ නොමැති විට 10 μMB(a)P සමඟ ප්රතිකාර කරන ලදී.පැය 48ක ප්‍රතිකාරයෙන් පසුව, නිෂ්පාදකයාගේ ප්‍රොටෝකෝලය අනුව QIAamp DNA Mini Kit භාවිතයෙන් DNA hEL සෛල වලින් උපුටා ගන්නා ලදී.BPDE-DNA adducts සෑදීම BPDE-DNA adduct ELISA කට්ටලයක් භාවිතයෙන් අනාවරණය විය.450 nm දී අවශෝෂණය මැනීම මගින් මයික්‍රොප්ලේට් රීඩරයක් භාවිතයෙන් BPDE-DNA ඇඩක්ටරයේ සාපේක්ෂ මට්ටම් මනිනු ලැබේ.
hEL සෛල ළිං 1 × 104 ඝනත්වයකින් ළිං තහඩු 96 ක් තුළ බීජ කර ඇති අතර පැය 48 ක් සඳහා 10 μM G-Rg3 නොමැති විට හෝ පැමිණීමේදී 10 μMB(a)P සමඟ ප්රතිකාර කරනු ලැබේ.GST ක්‍රියාකාරකම් නිෂ්පාදකයාගේ ප්‍රොටෝකෝලය අනුව වාණිජ GST ක්‍රියාකාරකම් තක්සේරු කට්ටලයක් භාවිතයෙන් මනිනු ලැබේ.සාපේක්ෂ GST සක්‍රීය කිරීම මයික්‍රොප්ලේට් රීඩරයක් භාවිතයෙන් 450 nm හි අවශෝෂණය මගින් මනිනු ලැබේ.
hEL සෛල අයිස්-සීතල PBS වලින් සෝදා පසුව ප්‍රෝටීස් නිෂේධක සහ පොස්පේටේස් නිෂේධක අඩංගු රේඩියෝ ප්‍රතිශක්තිකරණ පරීක්ෂණ බෆරය භාවිතයෙන් ලයිස් කරන ලදී.සම්පූර්ණ ප්‍රෝටීන් විශ්ලේෂණ කට්ටලයක් භාවිතයෙන් ප්‍රෝටීන් ප්‍රමාණනය කිරීමෙන් පසු, එක් එක් සාම්පලයේ ප්‍රෝටීන් 30 μg 12% SDS-PAGE මගින් වෙන් කර විද්‍යුත් විච්ඡේදනය මගින් PVDF පටලයකට මාරු කරන ලදී.5% ක් මුදවපු කිරිවලින් පටල අවහිර කර ඇති අතර ප්‍රාථමික ප්‍රතිදේහ සමඟ එක රැයකින් 4 ° C දී පුර්වගත කරන ලදී.අශ්වාරෝහක පෙරොක්සිඩේස්-සංයුජ ද්විතීයික ප්‍රතිදේහ සමඟ පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පසුව, බන්ධන සංඥාව දෘශ්‍යමාන කිරීම සඳහා වැඩිදියුණු කරන ලද රසායනික ප්‍රතික්‍රියාකාරක එකතු කරන ලදී.ImageJ මෘදුකාංගය භාවිතයෙන් එක් එක් ප්‍රෝටීන් කලාපයේ තීව්‍රතාවය ප්‍රමාණනය කරන ලදී.
සියලුම දත්ත විශ්ලේෂණය කිරීමට GraphPad Prism 7.0 මෘදුකාංගය භාවිතා කරන ලදී, මධ්යන්ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස ප්‍රකාශ වේ.ප්රතිකාර කණ්ඩායම් අතර විචලනය ශිෂ්‍ය ටී පරීක්ෂණය හෝ විචලනය පිළිබඳ එක්-මාර්ග විශ්ලේෂණයක් භාවිතයෙන් තක්සේරු කරන ලදී, P අගය <0.05 සංඛ්‍යානමය වැදගත්කම පෙන්නුම් කරයි.
මෙම අධ්‍යයනයේදී ලබාගත් හෝ විශ්ලේෂණය කරන ලද සියලුම දත්ත මෙම ප්රකාශිත ලිපියේ සහ අතිරේක තොරතුරු ගොනුවල ඇතුළත් වේ.
Torre, LA, Siegel, RL සහ Jemal, A. පෙනහළු පිළිකා සංඛ්යා ලේඛන.adverb.කල් ඉකුත් වී ඇත.ඖෂධය.ජීව විද්යාව.893, 1–19 (2016).
Hecht, S. දුම්කොළ පිළිකා කාරක, ඒවායේ ජෛව සලකුණු සහ දුම්කොළ මගින් ඇතිවන පිළිකා.නැට්.පිළිකා පූජක.3, 733-744 (2003).
Phillips, DH සහ Venitt, S. DNA සහ දුම්කොළ දුමාරයට නිරාවරණය වීම හේතුවෙන් මිනිස් පටක වල ප්‍රෝටීන් එකතු වේ.ජාත්යන්තරත්වය.J. පිළිකා.131, 2733-2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA සහ Yu M. Houttuynia cordata සහ silibinin වල බලපෑම A/J මීයන් තුළ බෙන්සෝ (a) pyrene-induced lung tumorigenesis මත.පිළිකා 7, 1053-1057 (2005).
ටැන්ග්, ඩබ්ලිව්. සහ අල්.චීන ඖෂධීය ද්රව්ය වලින් හුදකලා වූ පිළිකා නාශක ස්වභාවික නිෂ්පාදනයක්.හකු.ඖෂධය.6, 27 (2011).
Yang, Y. et al.A/J මීයන් තුළ බෙන්සෝ (a) pyrene-induced පෙනහළු tumorigenesis මත polyphenon E, red ginseng, සහ rapamycin වල කාර්යක්ෂමතාව.පිළිකා 8, 52–58 (2006).
වැන්ග්, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS සහ Yuan, KS Red, පිළිකා චිකිත්සාවට සම්බන්ධ වීම.හකු.ජේ. නට්ඖෂධය.14, 7-16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS සහ Gao, L. Ginsenosides ඇමරිකානු ginseng හි මුල් සහ කොළ වල.ජේ. ඇග්‍රික්.ආහාර රසායන විද්යාව.44, 717-720 (1996).
Attele AS, Wu JA සහ Yuan KS ginseng ඖෂධවේදය: බොහෝ සංරචක සහ බොහෝ බලපෑම්.ජෛව රසායනය.ඖෂධවේදය.58, 1685-1693 (1999).
පසු කාලය: සැප්-17-2023