Nature.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி.நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியின் பதிப்பு குறைந்த CSS ஆதரவைக் கொண்டுள்ளது.சிறந்த முடிவுகளுக்கு, உங்கள் உலாவியின் புதிய பதிப்பைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் பொருந்தக்கூடிய பயன்முறையை முடக்கவும்).இதற்கிடையில், தொடர்ந்து ஆதரவை உறுதிப்படுத்த, நாங்கள் ஸ்டைலிங் அல்லது ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் தளத்தைக் காண்பிக்கிறோம்.
நூற்றுக்கணக்கான ஆண்டுகளாக பாரம்பரிய ஆசிய மருத்துவத்தில் சிவப்பு ஜின்ஸெங் பயன்படுத்தப்படுகிறது.இந்த ஆய்வில், பல்வேறு பகுதிகளில் வளர்க்கப்படும் நான்கு வகையான சிவப்பு ஜின்ஸெங்கின் (சீன சிவப்பு ஜின்ஸெங், கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் ஏ, கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் பி மற்றும் கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் சி) புற்றுநோயால் தூண்டப்பட்ட நுரையீரலின் உருவாக்கம் மற்றும் வளர்ச்சியைத் தடுக்கும் திறனை மதிப்பீடு செய்தோம். கட்டிகள்.A/J எலிகளில் பென்சோ(a)பைரீன் (B(a)P) சோதனை நடத்தப்பட்டது, மேலும் நான்கு சிவப்பு ஜின்ஸெங் வகைகளில் கட்டியின் சுமையை குறைப்பதில் கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் பி மிகவும் பயனுள்ளதாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது.கூடுதலாக, நான்கு சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாற்றில் உள்ள பல்வேறு ஜின்செனோசைடுகளின் (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 மற்றும் Rg5) உள்ளடக்கங்களை ஆய்வு செய்து, கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் பி இருப்பதைக் கண்டறிந்தோம். ஜின்செனோசைட் Rg3 (G-Rg3) இன் மிக உயர்ந்த நிலைகள், G-Rg3 அதன் சிகிச்சை செயல்திறனில் முக்கிய பங்கு வகிக்கக்கூடும் என்று பரிந்துரைக்கிறது.இந்த வேலை G-Rg3 ஒப்பீட்டளவில் குறைந்த உயிர் கிடைக்கும் தன்மையைக் காட்டுகிறது.இருப்பினும், ஜி-ஆர்ஜி3 பி-ஜிபி இன்ஹிபிட்டர் வெராபமிலுடன் இணைந்து நிர்வகிக்கப்பட்டபோது, ஜி-ஆர்ஜி3 காகோ-2 செல்களுக்குள் வெளியேறுவது குறைக்கப்பட்டது, ஜி-ஆர்ஜி3 இன் குடல் உறிஞ்சுதல் வீதம் எலி மாதிரியில் அதிகரிக்கப்பட்டது, மேலும் ஜி-ஆர்ஜி3 அதிகரிக்கப்பட்டது.Caco-2 செல்களில், Rg3 இன் வெளியேற்றம் குறைகிறது, மேலும் Rg3 செறிவு அளவு குறைகிறது.குடல் மற்றும் பிளாஸ்மாவில் G-Rg3 அதிகரிக்கிறது, மேலும் கட்டிகளைத் தடுக்கும் அதன் திறன் B(a)P- தூண்டப்பட்ட tumorigenesis இன் எலி மாதிரியிலும் மேம்படுத்தப்படுகிறது.G-Rg3 மனித நுரையீரல் உயிரணுக்களில் B(a)P- தூண்டப்பட்ட சைட்டோடாக்சிசிட்டி மற்றும் DNA சேர்க்கை உருவாக்கம் ஆகியவற்றைக் குறைத்ததையும், Nrf2 பாதையின் மூலம் இரண்டாம் கட்ட நொதிகளின் வெளிப்பாடு மற்றும் செயல்பாட்டை மீட்டெடுத்ததையும் நாங்கள் கண்டறிந்தோம், இது செயல்பாட்டின் சாத்தியமான பொறிமுறையுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம். G தடுப்பின் -Rg3..நுரையீரல் கட்டிகள் ஏற்படுவது பற்றி.சுட்டி மாதிரிகளில் நுரையீரல் கட்டிகளை குறிவைப்பதில் G-Rg3 க்கு முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது என்பதை எங்கள் ஆய்வு நிரூபிக்கிறது.இந்த ஜின்செனோசைட்டின் வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மை பி-கிளைகோபுரோட்டீனை குறிவைப்பதன் மூலம் மேம்படுத்தப்பட்டு, மூலக்கூறானது புற்றுநோய் எதிர்ப்பு விளைவுகளை ஏற்படுத்த அனுமதிக்கிறது.
நுரையீரல் புற்றுநோயின் மிகவும் பொதுவான வகை சிறிய அல்லாத உயிரணு நுரையீரல் புற்றுநோயாகும் (NSCLC), இது சீனா மற்றும் வட அமெரிக்காவில் புற்றுநோய் இறப்புகளுக்கு முக்கிய காரணங்களில் ஒன்றாகும்1,2.சிறிய அல்லாத உயிரணு நுரையீரல் புற்றுநோயை உருவாக்கும் அபாயத்தை அதிகரிக்கும் முக்கிய காரணி புகைபிடித்தல் ஆகும்.சிகரெட் புகையில் பென்சோ(a)பைரீன் (B(a)P), நைட்ரோசமைன்கள் மற்றும் ரேடானின் சிதைவிலிருந்து வரும் கதிரியக்க ஐசோடோப்புகள் உட்பட 60க்கும் மேற்பட்ட புற்றுநோய்கள் உள்ளன. புகை.B(a)P க்கு வெளிப்படும் போது, சைட்டோக்ரோம் P450 அதை B(a)P-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide (BPDE) ஆக மாற்றுகிறது, இது DNA உடன் வினைபுரிந்து BPDE-DNA சேர்க்கை 4ஐ உருவாக்குகிறது. கூடுதலாக, இவை மனித நுரையீரல் கட்டிகள் போன்ற கட்டி நிலை மற்றும் ஹிஸ்டோபோதாலஜி கொண்ட எலிகளில் நுரையீரல் கட்டி உருவாக்கத்தை தூண்டுகிறது.இந்த அம்சம் B(a)P- தூண்டப்பட்ட நுரையீரல் புற்றுநோய் மாதிரியை சாத்தியமான ஆன்டிகான்சர் பண்புகளுடன் கூடிய சேர்மங்களை மதிப்பிடுவதற்கு பொருத்தமான அமைப்பாக ஆக்குகிறது.
அதிக ஆபத்துள்ள குழுக்களில், குறிப்பாக புகைப்பிடிப்பவர்களில் நுரையீரல் புற்றுநோயின் வளர்ச்சியைத் தடுப்பதற்கான ஒரு சாத்தியமான உத்தி, இன்ட்ராபிதெலியல் நியோபிளாஸ்டிக் புண்களின் வளர்ச்சியை அடக்குவதற்கும், அதன் மூலம் வீரியம் மிக்கதாக அவற்றின் அடுத்தடுத்த முன்னேற்றத்தைத் தடுப்பதற்கும் வேதியியல் தடுப்பு முகவர்களின் பயன்பாடு ஆகும்.பல்வேறு வேதியியல் தடுப்பு முகவர்கள் பயனுள்ளதாக இருப்பதாக விலங்கு ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன.எங்கள் முந்தைய அறிக்கை 7 நுரையீரல் புற்றுநோயில் சிவப்பு ஜின்ஸெங்கின் நல்ல தடுப்பு விளைவுகளை எடுத்துக்காட்டுகிறது.இந்த மூலிகை பல நூற்றாண்டுகளாக பாரம்பரிய ஆசிய மருத்துவத்தில் ஆயுட்காலம் மற்றும் ஆரோக்கியத்தை நீடிக்க பயன்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் இது ஆன்டிடூமர் விளைவுகளைக் கொண்டிருப்பதாக ஆவணப்படுத்தப்பட்டுள்ளது.
ஜின்ஸெங்கின் செயலில் உள்ள காரணி ஜின்ஸெனோசைட் ஆகும், இது ஜின்ஸெங் சாற்றின் தரத்தை மதிப்பிடுவதற்கு ஒரு கூட்டு மார்க்கராகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.கச்சா ஜின்ஸெங் சாற்றின் அளவு பகுப்பாய்வு பொதுவாக RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5 மற்றும் Rc9,10 உள்ளிட்ட பல ஜின்செனோசைடுகளின் பயன்பாட்டை உள்ளடக்கியது.ஜின்செனோசைடுகளின் மிக மோசமான வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மை காரணமாக மருத்துவ ரீதியாக சிறிய பயன்பாடு உள்ளது.இந்த மோசமான உயிர் கிடைக்கும் தன்மைக்கான வழிமுறை தெளிவாக இல்லை என்றாலும், P-glycoprotein (P-gp)12 மூலம் ஜின்செனோசைடுகளின் வெளியேற்றம் காரணமாக இருக்கலாம்.பி-ஜிபி என்பது ஏடிபி-பைண்டிங் கேசட் டிரான்ஸ்போர்ட்டர் சூப்பர்ஃபாமிலியில் உள்ள மிக முக்கியமான எஃப்ஃப்ளக்ஸ் டிரான்ஸ்போர்ட்டர்களில் ஒன்றாகும், இது ஏடிபி ஹைட்ரோலிசிஸின் ஆற்றலைப் பயன்படுத்தி உள்செல்லுலார் பொருட்களை வெளிப்புற சூழலில் வெளியிடுகிறது.P-gp டிரான்ஸ்போர்ட்டர்கள் பொதுவாக குடல், சிறுநீரகம், கல்லீரல் மற்றும் இரத்த-மூளை தடையில் பரவலாக விநியோகிக்கப்படுகின்றன.குடல் உறிஞ்சுதலில் பி-ஜிபி முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது, மேலும் பி-ஜிபியின் தடுப்பானது சில புற்றுநோய் எதிர்ப்பு மருந்துகளின் வாய்வழி உறிஞ்சுதல் மற்றும் கிடைக்கும் தன்மையை அதிகரிக்கிறது12,14.இலக்கியத்தில் முன்பு பயன்படுத்தப்பட்ட தடுப்பான்களின் எடுத்துக்காட்டுகள் வெராபமில் மற்றும் சைக்ளோஸ்போரின் A15 ஆகும்.இந்த வேலையில், பி(அ)பி-தூண்டப்பட்ட நுரையீரல் புற்றுநோயைப் படிப்பதற்காக, சீனா மற்றும் கொரியாவில் இருந்து பல்வேறு சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறுகளின் வீரியத்தை பாதிக்கும் திறனை மதிப்பிடுவதற்கு ஒரு சுட்டி அமைப்பை நிறுவுவது அடங்கும்.புற்றுநோயை பாதிக்கக்கூடிய குறிப்பிட்ட ஜின்செனோசைடுகளை அடையாளம் காண சாறுகள் தனித்தனியாக பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.வெராபமில் பின்னர் பி-ஜிபியை குறிவைக்கவும், புற்றுநோயை இலக்காகக் கொண்ட ஜின்செனோசைடுகளின் வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மை மற்றும் சிகிச்சை செயல்திறனை மேம்படுத்தவும் பயன்படுத்தப்பட்டது.
ஜின்ஸெங் சபோனின்கள் புற்றுநோயை உண்டாக்குவதில் சிகிச்சை விளைவுகளை ஏற்படுத்தும் வழிமுறை தெளிவாக இல்லை.பல்வேறு ஜின்செனோசைடுகள் ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தத்தைக் குறைப்பதன் மூலமும், இரண்டாம் கட்ட நச்சுத்தன்மை என்சைம்களை செயல்படுத்துவதன் மூலமும் புற்றுநோயால் ஏற்படும் டிஎன்ஏ பாதிப்பைக் குறைக்கலாம், இதனால் செல் சேதத்தைத் தடுக்கலாம் என்று ஆராய்ச்சி காட்டுகிறது.Glutathione S-transferase (GST) என்பது ஒரு பொதுவான கட்டம் II என்சைம் ஆகும், இது கார்சினோஜென்களால் ஏற்படும் டிஎன்ஏ பாதிப்பைக் குறைக்க தேவைப்படுகிறது17.நியூக்ளியர் எரித்ராய்டு 2-தொடர்புடைய காரணி 2 (Nrf2) என்பது ரெடாக்ஸ் ஹோமியோஸ்டாசிஸை ஒழுங்குபடுத்தும் மற்றும் கட்டம் II என்சைம்கள் மற்றும் சைட்டோபுரோடெக்டிவ் ஆக்சிஜனேற்ற எதிர்விளைவுகளின் வெளிப்பாட்டை செயல்படுத்தும் ஒரு முக்கியமான டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணியாகும்.B(a)P- தூண்டப்பட்ட சைட்டோடாக்சிசிட்டி மற்றும் BPDE-DNA சேர்க்கை உருவாக்கம் மற்றும் சாதாரண நுரையீரல் செல்களில் Nrf2 பாதையை மாற்றியமைப்பதன் மூலம் இரண்டாம் கட்ட நொதிகளைத் தூண்டுவதில் அடையாளம் காணப்பட்ட ஜின்செனோசைடுகளின் விளைவுகளையும் எங்கள் ஆய்வு ஆய்வு செய்தது.
பி(அ)பி-தூண்டப்பட்ட புற்றுநோயின் சுட்டி மாதிரியை நிறுவுவது முந்தைய வேலையுடன் ஒத்துப்போகிறது5.பி(a)P, நீர் (கட்டுப்பாடு), சீன சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறு (CRG), கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறு A (KRGA) மற்றும் கொரிய சிவப்பு ஆகியவற்றால் தூண்டப்பட்ட சுட்டி புற்றுநோய் மாதிரியின் 20 வார சிகிச்சையின் சோதனை வடிவமைப்பை படம் 1A காட்டுகிறது. ஜின்ஸெங்.எக்ஸ்ட்ராக்ட் பி (கேஆர்ஜிபி) மற்றும் கொரியன் ரெட் ஜின்ஸெங் எக்ஸ்ட்ராக்ட் சி (கேஆர்ஜிசி).சிவப்பு ஜின்ஸெங் சிகிச்சையின் 20 வாரங்களுக்குப் பிறகு, CO2 மூச்சுத்திணறல் மூலம் எலிகள் பலியிடப்பட்டன.படம் 1 பி பல்வேறு வகையான சிவப்பு ஜின்ஸெங்குடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட விலங்குகளில் மேக்ரோஸ்கோபிக் நுரையீரல் கட்டிகளைக் காட்டுகிறது, மேலும் படம் 1 சி கட்டி மாதிரியின் பிரதிநிதி ஒளி நுண்ணோக்கியைக் காட்டுகிறது.KRGB-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட விலங்குகளின் கட்டி சுமை (1.5 ± 0.35) படம் 1D இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, கட்டுப்பாட்டு விலங்குகளை விட (0.82 ± 0.2, P <0.05) குறைவாக இருந்தது.கட்டி சுமை தடுப்பின் சராசரி அளவு 45% ஆகும்.பரிசோதிக்கப்பட்ட மற்ற சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறுகள் கட்டி சுமையில் (P > 0.05) குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்களைக் காட்டவில்லை.20 வார சிவப்பு ஜின்ஸெங் சிகிச்சையின் போது மவுஸ் மாதிரியில் வெளிப்படையான பக்க விளைவுகள் எதுவும் காணப்படவில்லை, இதில் உடல் எடையில் எந்த மாற்றமும் இல்லை (தரவு காட்டப்படவில்லை) மற்றும் கல்லீரல் அல்லது சிறுநீரக நச்சுத்தன்மை இல்லை (படம் 1E,F).
சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறு A/J எலிகளில் நுரையீரல் கட்டி வளர்ச்சிக்கு சிகிச்சையளிக்கிறது.(A) பரிசோதனை வடிவமைப்பு.(B) சுட்டி மாதிரியில் பெரிய நுரையீரல் கட்டிகள்.கட்டிகள் அம்புகளால் குறிக்கப்படுகின்றன.a: சீன சிவப்பு ஜின்ஸெங் குழு.b: கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங்கின் குழு A.c: கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் குழு B. d: கொரிய சிவப்பு ஜின்ஸெங் குழு C. d: கட்டுப்பாட்டு குழு.(C) நுரையீரல் கட்டியைக் காட்டும் ஒளி மைக்ரோகிராஃப்.உருப்பெருக்கம்: 100. b: 400. (D) சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறு குழுவில் கட்டி சுமை.(E) கல்லீரல் நொதியின் பிளாஸ்மா அளவுகள் ALT.(F) சிறுநீரக நொதி Cr இன் பிளாஸ்மா அளவுகள்.தரவு சராசரி ± நிலையான விலகலாக வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.*பி <0.05.
இந்த ஆய்வில் அடையாளம் காணப்பட்ட சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறுகள் அல்ட்ரா-பெர்ஃபார்மன்ஸ் லிக்விட் குரோமடோகிராபி டேன்டெம் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி (UPLC-MS/MS) மூலம் பின்வரும் ஜின்செனோசைடுகளை அளவிடுவதற்காக பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3 , Rh2, F1, Rk1 மற்றும் Rg5.பகுப்பாய்வுகளை அளவிடப் பயன்படுத்தப்படும் UPLC மற்றும் MS நிபந்தனைகள் முந்தைய அறிக்கையில் விவரிக்கப்பட்டுள்ளன19.நான்கு சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறுகளின் UPLC-MS/MS குரோமடோகிராம்கள் படம் 2A இல் காட்டப்பட்டுள்ளன.CRG (590.27 ± 41.28 μmol/L) (படம் 2B) இல் அதிகபட்ச மொத்த ஜின்செனோசைடு உள்ளடக்கத்துடன், மொத்த ஜின்செனோசைடு உள்ளடக்கத்தில் குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் இருந்தன.தனிப்பட்ட ஜின்செனோசைடுகளை மதிப்பிடும்போது (படம் 2C), மற்ற ஜின்செனோசைடுகளுடன் ஒப்பிடும்போது KRGB G-Rg3 இன் மிக உயர்ந்த அளவைக் காட்டியது (G-Rg3sக்கு 58.33 ± 3.81 μmol/L மற்றும் G -Rg3rக்கு 41.56 ± 2.88 μmol/L).சிவப்பு ஜின்ஸெங் வகை (P <0.001).G-Rg3 ஒரு ஜோடி ஸ்டீரியோசோமர்கள் G-Rg3r மற்றும் G-Rg3s ஆக நிகழ்கிறது, இது கார்பன் 20 இல் ஹைட்ராக்சில் குழுவின் நிலையில் வேறுபடுகிறது (படம். 2D).B(a)P- தூண்டப்பட்ட புற்றுநோய் சுட்டி மாதிரியில் G-Rg3r அல்லது G-Rg3 முக்கியமான புற்றுநோய் எதிர்ப்பு ஆற்றலைக் கொண்டிருக்கலாம் என்று முடிவுகள் குறிப்பிடுகின்றன.
பல்வேறு சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாற்றில் ஜின்செனோசைடுகளின் உள்ளடக்கம்.(A) நான்கு சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாற்றின் UPLC-MS/MS குரோமடோகிராம்கள்.(B) சுட்டிக்காட்டப்பட்ட சாற்றில் உள்ள மொத்த ஜின்செனோசைட் உள்ளடக்கத்தின் மதிப்பீடு.(C) பெயரிடப்பட்ட சாற்றில் தனிப்பட்ட ஜின்செனோசைடுகளைக் கண்டறிதல்.(D) ஜின்செனோசைட் ஸ்டீரியோசோமர்கள் G-Rg3r மற்றும் G-Rg3s கட்டமைப்புகள்.மூன்று மடங்கு தீர்மானங்களின் சராசரி ± நிலையான விலகலாக தரவு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.***பி <0.001.
UPLC-MS/MS ஆய்வுக்கு 20 வார சிகிச்சைக்குப் பிறகு குடல் மற்றும் இரத்த மாதிரிகளில் ஜின்செனோசைடுகளின் அளவீடு தேவைப்பட்டது.KRGB உடனான சிகிச்சையானது இரத்தத்தில் 0.0063 ± 0.0005 μg/ml Rg5 மட்டுமே இருப்பதைக் காட்டியது.மீதமுள்ள ஜின்செனோசைடுகள் கண்டறியப்படவில்லை, இது மோசமான வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மையைக் குறிக்கிறது, எனவே இந்த ஜின்செனோசைடுகளின் வெளிப்பாடு குறைக்கப்பட்டது.
பெருங்குடல் அடினோகார்சினோமா செல் கோடு Caco-2 உருவவியல் மற்றும் உயிர்வேதியியல் ரீதியாக மனித குடல் எபிடெலியல் செல்களைப் போலவே உள்ளது, இது குடல் எபிடெலியல் தடை முழுவதும் என்டோரோசைட் போக்குவரத்தை மதிப்பிடுவதில் அதன் பயன்பாட்டை நிரூபிக்கிறது.இந்த பகுப்பாய்வு முந்தைய ஆய்வு 20 ஐ அடிப்படையாகக் கொண்டது.புள்ளிவிவரங்கள் 3A,B,C,D,E,F ஒரு Caco-2 மோனோலேயர் மாதிரியைப் பயன்படுத்தி G-Rg3r மற்றும் G-Rg3 ஆகியவற்றின் டிரான்ஸ்செல்லுலர் போக்குவரத்தின் பிரதிநிதி படங்களைக் காட்டுகிறது.G-Rg3r அல்லது G-Rg3 இன் டிரான்ஸ்செல்லுலர் போக்குவரத்து Caco-2 மோனோலேயர்ஸ் முழுவதும் பாசோலேட்டரலில் இருந்து நுனிப் பக்கத்திற்கு (Pb-a) அபிகல் முதல் பாசோலேட்டரல் பக்கத்தை விட (Pa-b) கணிசமாக அதிகமாக இருந்தது.G-Rg3r க்கு, சராசரி Pa-b மதிப்பு 0.38 ± 0.06 ஆக இருந்தது, இது 50 μmol/L வெராபமிலுடன் சிகிச்சைக்குப் பிறகு 0.73 ± 0.06 ஆகவும், 100 μmol/L வெராபமில் (p <0.01 மற்றும் <0.01, <0.0.0.01, <0.0.0.0.0.01, <0.0.0.0.0.0.0.0.0.0.0.00. முறையே படம் 2).3A).G-Rg3 க்கான அவதானிப்புகள் இதேபோன்ற முறையைப் பின்பற்றின (படம். 3B), மற்றும் முடிவுகள் வெராபமில் சிகிச்சை G-Rg3r மற்றும் G-Rg3 இன் போக்குவரத்தை மேம்படுத்தியது.வெராபமில் சிகிச்சையானது சராசரி Pb-a மற்றும் G-Rg3r மற்றும் G-Rg3s வெளியேற்ற விகிதங்களில் குறிப்பிடத்தக்க குறைவை ஏற்படுத்தியது (படம் 3C,D,E,F), வெராபமில் சிகிச்சையானது Caco-2 எஃப்ஃப்ளக்ஸ் செல்களில் ஜின்செனோசைட் உள்ளடக்கத்தை குறைக்கிறது என்பதைக் குறிக்கிறது..
காகோ-2 மோனோலேயர்களில் G-Rg3 இன் டிரான்ஸ்செல்லுலர் டிரான்ஸ்போர்ட் மற்றும் எலி பெர்ஃப்யூஷன் மதிப்பீட்டில் குடல் உறிஞ்சுதல்.(A) Caco-2 மோனோலேயரில் G-Rg3r குழுவின் Pa-b மதிப்பு.(B) Caco-2 மோனோலேயரில் G-Rg3s குழுக்களின் Pa-b மதிப்பு.(C) Caco-2 மோனோலேயரில் G-Rg3r குழுவின் Pb மதிப்பு.(D) Caco-2 மோனோலேயரில் G-Rg3s குழுக்களின் Pb மதிப்பு.(E) ஒரு Caco-2 மோனோலேயரில் G-Rg3r குழுக்களின் மகசூல் விகிதம்.(F) ஒரு Caco-2 மோனோலேயரில் G-Rg3 குழுக்களின் மகசூல் விகிதம்.(G) எலிகளில் ஒரு துளையிடல் மதிப்பீட்டில் G-Rg3r இன் குடல் உறிஞ்சுதலின் சதவீதம்.(எச்) எலிகளில் ஒரு துளையிடல் மதிப்பீட்டில் G-Rg3 இன் குடல் உறிஞ்சுதலின் சதவீதம்.ஊடுருவும் தன்மை மற்றும் உறிஞ்சுதல் ஆகியவை வெராபமில் சேர்க்கப்படாமல் ஒப்பிடப்பட்டன.ஐந்து சுயாதீன சோதனைகளின் சராசரி ± நிலையான விலகலாக தரவு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
முந்தைய வேலை20க்கு இணங்க, வெராபமில் சிகிச்சைக்குப் பிறகு குடலில் G-Rg3 உறிஞ்சுதல் அதிகரிக்கிறதா என்பதைத் தீர்மானிக்க எலிகளின் ஆர்த்தோடோபிக் குடல் துளையிடல் செய்யப்பட்டது.மேலே குறிப்பிட்ட காலகட்டங்களில் புற்றுநோய் மாதிரி எலிகளில் G-Rg3r மற்றும் G-Rg3 குடல் உறிஞ்சுதலின் சதவீதத்தை மதிப்பிடுவதற்கான பிரதிநிதித்துவ பெர்ஃப்யூஷன் மதிப்பீடுகளை புள்ளிவிவரங்கள் 3G,H காட்டுகிறது.50 μM வெராபமிலுடன் சிகிச்சைக்குப் பிறகு 20% க்கும் அதிகமாகவும், 100 μM வெராபமிலுடன் சிகிச்சைக்குப் பிறகு 25% க்கும் அதிகமாகவும் ஏறத்தாழ 10% பலவீனமான G-Rg3r உறிஞ்சுதலின் ஆரம்ப சதவீதம் அதிகரித்தது.அதேபோல, G-Rg3, 10% தொடக்கத்தில், 50 μM வெராபமிலுடன் சிகிச்சையின் பின்னர் 20% க்கும் அதிகமான உச்சத்தையும், 100 μM வெராபமிலுடன் சிகிச்சைக்குப் பிறகு கிட்டத்தட்ட 30% ஆகவும் இருந்தது, இது வெராபமிலால் P-gp ஐத் தடுப்பது அதிகரிக்கிறது என்று பரிந்துரைக்கிறது. நுரையீரல் புற்றுநோயின் சுட்டி மாதிரியில் குடல் ஜி-உறிஞ்சுதல் Rg3.
மேலே உள்ள முறையின்படி, படம் 4A இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, B(a)P- தூண்டப்பட்ட புற்றுநோய் மாதிரி எலிகள் தோராயமாக ஆறு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன.கட்டுப்பாட்டு குழுவோடு ஒப்பிடும்போது G-Rg3 சிகிச்சை குழுவில் குறிப்பிடத்தக்க எடை இழப்பு அல்லது நச்சுத்தன்மையின் மருத்துவ அறிகுறிகள் காணப்படவில்லை (தரவு காட்டப்படவில்லை).20 வார சிகிச்சைக்குப் பிறகு, ஒவ்வொரு எலியின் நுரையீரல்களும் சேகரிக்கப்பட்டன.மேலே உள்ள சிகிச்சை குழுக்களில் உள்ள எலிகளில் உள்ள மேக்ரோஸ்கோபிக் நுரையீரல் கட்டிகளை படம் 4B காட்டுகிறது, மேலும் படம் 4C ஒரு பிரதிநிதிக் கட்டியின் பிரதிநிதி ஒளி நுண்ணோக்கியைக் காட்டுகிறது.ஒவ்வொரு குழுவிலும் உள்ள கட்டியின் சுமையை (படம். 4D) பொறுத்தவரை, G-Rg3r மற்றும் G-Rg3s மூலம் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட எலிகளின் மதிப்புகள் முறையே 0.75 ± 0.29 mm3 மற்றும் 0.81 ± 0.30 mm3 ஆகும், அதே நேரத்தில் ஜி எலிகளுக்கான மதிப்புகள் சிகிச்சை அளிக்கப்பட்டன. உடன் -Rg3கள் 1.63 முறையே ±0.40 மிமீ3.கட்டுப்பாட்டு எலிகள் (p <0.001), G-Rg3 சிகிச்சையானது எலிகளில் கட்டியின் சுமையைக் குறைக்கிறது என்பதைக் குறிக்கிறது.வெராபமிலின் நிர்வாகம் இந்த குறைப்பை மேலும் மேம்படுத்தியது: வெராபமில்+ G-Rg3r எலிகளின் மதிப்புகள் 0.75 ± 0.29 mm3 இலிருந்து 0.33 ± 0.25 mm3 (p <0.01), மற்றும் வெராபமிலின் மதிப்புகள் 0.81 லிருந்து 1 ± 3 ± 0.3 ± ஜிகட்டி சுமை கட்டுப்பாட்டு குழு மற்றும் வெராபமில் குழு, G-Rg3r குழு மற்றும் G-Rg3s குழு மற்றும் வெராபமில்+G-Rg3r குழு மற்றும் வெராபமில்+G-Rg3s குழுவிற்கு இடையே குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் இல்லை.மேலும், மதிப்பிடப்பட்ட சிகிச்சைகளுடன் தொடர்புடைய குறிப்பிடத்தக்க கல்லீரல் அல்லது சிறுநீரக நச்சுத்தன்மை எதுவும் இல்லை (படம் 4E, F).
G-Rg3 சிகிச்சைக்குப் பிறகு கட்டி சுமை மற்றும் சுட்டிக்காட்டப்பட்ட குழுக்களில் பிளாஸ்மா அல்லது குடல் G-Rg3r மற்றும் G-Rg3 அளவுகள்.(A) பரிசோதனை வடிவமைப்பு.(B) சுட்டி மாதிரியில் உள்ள மேக்ரோஸ்கோபிக் கட்டிகள்.கட்டிகள் அம்புகளால் குறிக்கப்படுகின்றன.a: G-Rg3r.b: G-Rg3s.c: வெராபமிலுடன் இணைந்து G-Rg3r.d: G-Rg3 வெராபமிலுடன் இணைந்து.ஈ: வெராபமில்.இ: கட்டுப்பாடு.(C) உருப்பெருக்கத்தில் கட்டியின் ஆப்டிகல் மைக்ரோகிராஃப்.பதில்: 100x.b: 400X.(D) A/J எலிகளில் கட்டி சுமை மீது G-Rg3 + வெராபமில் சிகிச்சையின் விளைவு.(E) கல்லீரல் நொதியின் பிளாஸ்மா அளவுகள் ALT.(F) சிறுநீரக நொதி Cr இன் பிளாஸ்மா அளவுகள்.(G) சுட்டிக்காட்டப்பட்ட குழுக்களின் G-Rg3r அல்லது G-Rg3 இன் பிளாஸ்மா அளவுகள்.(H) சுட்டிக்காட்டப்பட்ட குழுக்களின் குடலில் உள்ள G-Rg3r அல்லது G-Rg3களின் நிலைகள்.மூன்று மடங்கு தீர்மானங்களின் சராசரி ± நிலையான விலகலாக தரவு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
B(a)P- தூண்டப்பட்ட புற்றுநோய் மாதிரி எலிகளில் G-Rg3 அளவுகள், முறைகள் பிரிவில் விவரிக்கப்பட்டுள்ள முறையின்படி 20 வார சிகிச்சை காலத்திற்குப் பிறகு UPLC-MS/MS ஆல் மதிப்பிடப்பட்டது.புள்ளிவிவரங்கள் 4G மற்றும் H முறையே பிளாஸ்மா மற்றும் குடல் G-Rg3 அளவைக் காட்டுகின்றன.பிளாஸ்மா G-Rg3r அளவுகள் 0.44 ± 0.32 μmol/L மற்றும் 1.17 ± 0.47 μmol/L ஆக அதிகரித்தது வெராபமில் (p <0.001), அதே சமயம் குடல் G-Rg3r அளவுகள் 0.53 ± 0.08.வெராபமிலுடன் இணைந்தால், g 1.35 ± 0.13 μg/g (p <0.001) ஆக அதிகரித்தது.G-Rg3 க்கு, வெராபமில் சிகிச்சையானது A/J எலிகளில் G-Rg3 இன் வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மையை அதிகரிப்பதைக் குறிக்கும் அதே முறையைப் பின்பற்றியது.
HEL கலங்களில் B(a)P மற்றும் G-Rg3 ஆகியவற்றின் சைட்டோடாக்சிசிட்டியை மதிப்பிடுவதற்கு செல் நம்பகத்தன்மை மதிப்பீடு பயன்படுத்தப்பட்டது.HEL கலங்களில் B(a)P ஆல் தூண்டப்பட்ட சைட்டோடாக்சிசிட்டி படம் 5A இல் காட்டப்பட்டுள்ளது, G-Rg3r மற்றும் G-Rg3 இன் நச்சுத்தன்மையற்ற பண்புகள் புள்ளிவிவரங்கள் 5A மற்றும் 5B இல் காட்டப்பட்டுள்ளன.5B, C. G-Rg3 இன் சைட்டோபுரோடெக்டிவ் விளைவை மதிப்பிடுவதற்கு, B(a)P ஆனது HEL செல்களில் G-Rg3r அல்லது G-Rg3 இன் பல்வேறு செறிவுகளுடன் இணைந்து நிர்வகிக்கப்பட்டது.படம் 5D இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, 5 μM, 10 μM மற்றும் 20 μM செறிவுகளில் G-Rg3r ஆனது செல் நம்பகத்தன்மையை முறையே 58.3%, 79.3% மற்றும் 77.3% ஆக மீட்டெடுத்தது.G-Rg3s குழுவிலும் இதே போன்ற முடிவுகளைக் காணலாம்.G-Rg3களின் செறிவுகள் 5 µM, 10 µM மற்றும் 20 µM ஆக இருக்கும்போது, செல் நம்பகத்தன்மை முறையே 58.3%, 72.7% மற்றும் 76.7% ஆக மீட்டெடுக்கப்பட்டது (படம் 5E) .)BPDE-DNA சேர்க்கைகளின் இருப்பு ELISA கருவியைப் பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்டது.கட்டுப்பாட்டுக் குழுவோடு ஒப்பிடும்போது B(a)P-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட குழுவில் BPDE-DNA சேர்க்கை அளவுகள் அதிகரித்துள்ளன என்பதை எங்கள் முடிவுகள் காட்டுகின்றன, ஆனால் G-Rg3 இணை சிகிச்சையுடன் ஒப்பிடும்போது, B(a)P குழுவில் BPDE-DNA சேர்க்கை நிலைகள் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட குழுவில் பி, டிஎன்ஏ சேர்க்கை அளவுகள் கணிசமாகக் குறைக்கப்பட்டன.B(a)P உடனான சிகிச்சையின் முடிவுகள் மட்டும் படம் 5F இல் காட்டப்பட்டுள்ளன (G-Rg3rக்கு 1.87 ± 0.33 எதிராக 3.77 ± 0.42, 1.93 ± 0.48 vs. 3.77 ± 0.42 க்கு G -Rg30, p <1).
G-Rg3 மற்றும் B(a)P உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களில் செல் நம்பகத்தன்மை மற்றும் BPDE-DNA சேர்க்கை உருவாக்கம்.(A) B(a)P உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களின் நம்பகத்தன்மை.(B) G-Rg3r உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களின் நம்பகத்தன்மை.(C) G-Rg3 உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களின் நம்பகத்தன்மை.(D) B(a)P மற்றும் G-Rg3r உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களின் நம்பகத்தன்மை.(இ) B(a)P மற்றும் G-Rg3 உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களின் நம்பகத்தன்மை.(F) B(a)P மற்றும் G-Rg3 உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களில் BPDE-DNA சேர்க்கையின் நிலைகள்.மூன்று மடங்கு தீர்மானங்களின் சராசரி ± நிலையான விலகலாக தரவு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
ஜிஎஸ்டி என்சைம் வெளிப்பாடு 10 μM B(a)P மற்றும் 10 μM G-Rg3r அல்லது G-Rg3s உடன் இணை-சிகிச்சைக்குப் பிறகு கண்டறியப்பட்டது.B(a)P GST வெளிப்பாடு (G-Rg3r குழுவில் 59.7 ± 8.2% மற்றும் G-Rg3s குழுவில் 39 ± 4.5%) மற்றும் B(a)P G-Rg3r உடன் தொடர்புடையது என்பதை எங்கள் முடிவுகள் காட்டுகின்றன. , அல்லது G-Rg3r, அல்லது G-Rg3r உடன்.G-Rg3s உடனான இணை சிகிச்சை GST வெளிப்பாடு மீட்டமைக்கப்பட்டது.GST வெளிப்பாடு (G-Rg3r குழுவில் 103.7 ± 15.5% மற்றும் G-Rg3s குழுவில் 110 ± 11.1%, முறையே p <0.05 மற்றும் p <0.001, படம். 6A, B மற்றும் C).ஜிஎஸ்டி செயல்பாடு செயல்பாட்டு மதிப்பீட்டு கருவியைப் பயன்படுத்தி மதிப்பிடப்பட்டது.B(a)P மட்டும் குழுவுடன் (96.3 ± 6.6% எதிராக 35.7 ± 7.8% G-Rg3r குழுவில் 92.3 ± 6.5 க்கு எதிராக G-Rg3r குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது கூட்டு சிகிச்சை குழுவானது அதிக GST செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது என்பதை எங்கள் முடிவுகள் காட்டுகின்றன. )G-Rg3s குழுவில் % vs 35.7 ± 7.8%, p <0.001, படம் 6D).
B(a)P மற்றும் G-Rg3 உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் கலங்களில் GST மற்றும் Nrf2 இன் வெளிப்பாடு.(A) வெஸ்டர்ன் ப்ளாட்டிங் மூலம் ஜிஎஸ்டி வெளிப்பாட்டைக் கண்டறிதல்.(B) B(a)P மற்றும் G-Rg3r உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களில் ஜிஎஸ்டியின் அளவு வெளிப்பாடு.(C) B(a)P மற்றும் G-Rg3s உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களில் ஜிஎஸ்டியின் அளவு வெளிப்பாடு.(D) B(a)P மற்றும் G-Rg3 உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களில் ஜிஎஸ்டி செயல்பாடு.(E) வெஸ்டர்ன் ப்ளாட்டிங் மூலம் Nrf2 வெளிப்பாட்டைக் கண்டறிதல்.(F) B(a)P மற்றும் G-Rg3r உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களில் Nrf2 இன் அளவு வெளிப்பாடு.(ஜி) B(a)P மற்றும் G-Rg3களுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் செல்களில் Nrf2 இன் அளவு வெளிப்பாடு.மூன்று மடங்கு தீர்மானங்களின் சராசரி ± நிலையான விலகலாக தரவு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
B(a)P-தூண்டப்பட்ட டூமோரிஜெனெசிஸின் G-Rg3-மத்தியஸ்த அடக்குமுறையில் ஈடுபட்டுள்ள பாதைகளை தெளிவுபடுத்த, Nrf2 வெளிப்பாடு மேற்கத்திய ப்ளாட்டிங் மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது.புள்ளிவிவரங்கள் 6E,F,G இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, கட்டுப்பாட்டு குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது, B(a)P சிகிச்சை குழுவில் Nrf2 இன் நிலை மட்டுமே குறைக்கப்பட்டது;இருப்பினும், B(a)P சிகிச்சை குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது, PG-Rg3 குழுவில் B(a) Nrf2 அளவுகள் அதிகரிக்கப்பட்டன (G-Rg3rக்கு 106 ± 9.5% எதிராக 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% G-Rg3sக்கு எதிராக G-Rg3r 41 ± 9.8%, p <0.01).
குறிப்பிட்ட சிறிய குறுக்கிடும் RNA (siRNA) ஐப் பயன்படுத்தி Nrf2 வெளிப்பாட்டை அடக்குவதன் மூலம் Nrf2 இன் தடுப்புப் பங்கை நாங்கள் உறுதிப்படுத்தினோம்.Nrf2 நாக் டவுன் வெஸ்டர்ன் ப்ளாட்டிங் மூலம் உறுதி செய்யப்பட்டது (படம். 7A,B).புள்ளிவிவரங்கள் 7C,D இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, B(a)P மற்றும் G-Rg3 உடன் ஹெச்இஎல் செல்களின் இணை சிகிச்சையானது B(a)P உடனான சிகிச்சையுடன் ஒப்பிடும்போது BPDE-DNA சேர்க்கைகளின் எண்ணிக்கையில் (1.47 ± 0.21) குறைந்துள்ளது. கட்டுப்பாட்டு siRNA குழுவில் மட்டும்.) G-Rg3r 4.13 ± 0.49, G-Rg3s 1.8 ± 0.32 மற்றும் 4.1 ± 0.57, p <0.01).இருப்பினும், BPDE-DNA உருவாக்கத்தில் G-Rg3 இன் தடுப்பு விளைவு Nrf2 நாக் டவுன் மூலம் ஒழிக்கப்பட்டது.siNrf2 குழுவில், B(a)P மற்றும் G-Rg3 இணை சிகிச்சை மற்றும் B(a)P சிகிச்சைக்கு இடையே BPDE-DNA சேர்க்கை உருவாக்கத்தில் குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடு இல்லை (G-Rg3rக்கு 3.0 ± 0.21 எதிராக 3.56 ± 0.32 )G-Rg3rக்கு எதிராக 3.6க்கு எதிராக G-Rg3sக்கு எதிராக ±0.45 மற்றும் 4.0±0.37, p > 0.05).
HEL கலங்களில் BPDE-DNA சேர்க்கை உருவாக்கத்தில் Nrf2 நாக் டவுனின் விளைவு.(A) Nrf2 நாக் டவுன் வெஸ்டர்ன் ப்ளாட்டிங் மூலம் உறுதி செய்யப்பட்டது.(B) Nrf2 பேண்ட் தீவிரத்தின் அளவு.(C) B(a)P மற்றும் G-Rg3r உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் கலங்களில் BPDE-DNA சேர்க்கை நிலைகளில் Nrf2 நாக் டவுனின் விளைவு.(D) B(a)P மற்றும் G-Rg3 உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஹெச்இஎல் கலங்களில் BPDE-DNA சேர்க்கை நிலைகளில் Nrf2 நாக் டவுனின் விளைவு.மூன்று மடங்கு தீர்மானங்களின் சராசரி ± நிலையான விலகலாக தரவு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
இந்த ஆய்வு B(a)P- தூண்டப்பட்ட நுரையீரல் புற்றுநோயின் சுட்டி மாதிரியில் பல்வேறு சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாற்றின் தடுப்பு விளைவுகளை மதிப்பீடு செய்தது, மேலும் KRGB சிகிச்சையானது கட்டியின் சுமையை கணிசமாகக் குறைத்தது.இந்த ஜின்ஸெங் சாற்றில் G-Rg3 அதிக உள்ளடக்கத்தைக் கொண்டிருப்பதைக் கருத்தில் கொண்டு, டூமோரிஜெனிசிஸைத் தடுப்பதில் இந்த ஜின்செனோசைட்டின் முக்கிய பங்கு ஆய்வு செய்யப்பட்டுள்ளது.G-Rg3r மற்றும் G-Rg3 (G-Rg3 இன் இரண்டு எபிமர்கள்) இரண்டும் B(a)P- தூண்டப்பட்ட புற்றுநோயின் சுட்டி மாதிரியில் கட்டியின் சுமையை கணிசமாகக் குறைத்தன.G-Rg3r மற்றும் G-Rg3 ஆகியவை கட்டி உயிரணுக்களின் அப்போப்டொசிஸைத் தூண்டி, கட்டி வளர்ச்சியைத் தடுப்பதன் மூலம், உயிரணு சுழற்சியைக் கைதுசெய்து, ஆஞ்சியோஜெனீசிஸ்24 ஐப் பாதிப்பதன் மூலம் புற்றுநோய் எதிர்ப்பு விளைவுகளை ஏற்படுத்துகின்றன.G-Rg3 செல்லுலார் மெட்டாஸ்டாசிஸைத் தடுப்பதாகவும் காட்டப்பட்டுள்ளது, மேலும் கீமோதெரபி மற்றும் கதிரியக்க சிகிச்சையின் விளைவுகளை மேம்படுத்தும் G-Rg3 இன் திறன் ஆவணப்படுத்தப்பட்டுள்ளது26,27.பூன் மற்றும் பலர் G-Rg3 சிகிச்சையானது B(a)P28 இன் ஜெனோடாக்ஸிக் விளைவுகளை குறைக்கும் என்பதை நிரூபித்துள்ளனர்.இந்த ஆய்வு சுற்றுச்சூழல் புற்றுநோயை உண்டாக்கும் மூலக்கூறுகளை குறிவைத்து புற்றுநோயைத் தடுப்பதில் G-Rg3 இன் சிகிச்சை திறனை நிரூபிக்கிறது.
அவற்றின் நல்ல நோய்த்தடுப்பு திறன் இருந்தபோதிலும், ஜின்செனோசைடுகளின் மோசமான வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மை இந்த மூலக்கூறுகளின் மருத்துவ பயன்பாட்டிற்கு சவாலாக உள்ளது.எலிகளில் ஜின்செனோசைடுகளின் வாய்வழி நிர்வாகத்தின் பார்மகோகினெடிக் பகுப்பாய்வு அதன் உயிர் கிடைக்கும் தன்மை இன்னும் 5% 29 க்கும் குறைவாக இருப்பதைக் காட்டுகிறது.இந்த சோதனைகள் 20 வார சிகிச்சை காலத்திற்குப் பிறகு, Rg5 இன் இரத்த அளவு மட்டுமே குறைந்துள்ளது என்பதைக் காட்டுகிறது.மோசமான உயிர் கிடைக்கும் தன்மையின் அடிப்படை வழிமுறை இன்னும் தெளிவுபடுத்தப்பட வேண்டியிருந்தாலும், ஜின்செனோசைடுகளின் வெளியேற்றத்தில் P-gp ஈடுபட்டுள்ளதாக கருதப்படுகிறது.P-gp பிளாக்கரான வெராபமிலின் நிர்வாகம் G-Rg3r மற்றும் G-Rg3களின் வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மையை அதிகரிக்கிறது என்பதை இந்த வேலை முதன்முறையாக நிரூபித்தது.எனவே, G-Rg3r மற்றும் G-Rg3s அதன் வெளியேற்றத்தை ஒழுங்குபடுத்த P-gp இன் அடி மூலக்கூறுகளாக செயல்படுவதாக இந்த கண்டுபிடிப்பு தெரிவிக்கிறது.
வெராபமிலுடன் கூடிய கூட்டு சிகிச்சையானது நுரையீரல் புற்றுநோயின் சுட்டி மாதிரியில் G-Rg3 இன் வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மையை அதிகரிக்கிறது என்பதை இந்த வேலை நிரூபிக்கிறது.இந்த கண்டுபிடிப்பு P-gp தடையின் மீது G-Rg3 இன் குடல் டிரான்ஸ்செல்லுலர் போக்குவரத்து மூலம் ஆதரிக்கப்படுகிறது, இதனால் அதன் உறிஞ்சுதல் அதிகரிக்கிறது.சவ்வு ஊடுருவலை மேம்படுத்தும் போது வெராபமில் சிகிச்சையானது G-Rg3r மற்றும் G-Rg3களின் வெளியேற்றத்தைக் குறைப்பதாக Caco2 செல்களில் ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன.யாங் மற்றும் பலர் மேற்கொண்ட ஆய்வு.சைக்ளோஸ்போரின் A (மற்றொரு P-gp தடுப்பான்) உடன் சிகிச்சையானது ஜின்செனோசைட் Rh2 இன் உயிர் கிடைக்கும் தன்மையை 1% 20 இன் அடிப்படை மதிப்பிலிருந்து 30% க்கும் அதிகமாக அதிகரிக்கிறது என்று ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன.Ginsenosides கலவைகள் K மற்றும் Rg1 இதே போன்ற முடிவுகளைக் காட்டியது30,31.வெராபமில் மற்றும் சைக்ளோஸ்போரின் A ஆகியவை இணைந்து நிர்வகிக்கப்பட்டபோது, Caco-2 செல்களில் K கலவையின் வெளியேற்றம் கணிசமாக 26.6 இலிருந்து 3 க்கும் குறைவாக குறைக்கப்பட்டது, அதே நேரத்தில் அதன் உள்செல்லுலார் அளவுகள் 40 மடங்கு அதிகரித்தன.வெராபமிலின் முன்னிலையில், எலி நுரையீரல் எபிடெலியல் செல்களில் Rg1 அளவுகள் அதிகரித்தன, இது மெங் மற்றும் பலர் காட்டியபடி ஜின்செனோசைட் வெளியேற்றத்தில் P-gp க்கு ஒரு பங்கைக் குறிக்கிறது.இருப்பினும், வெராபமில் சில ஜின்செனோசைடுகளின் (Rg1, F1, Rh1 மற்றும் Re போன்றவை) வெளியேற்றத்தில் அதே விளைவைக் கொண்டிருக்கவில்லை, லியாங் மற்றும் பலர் காட்டியபடி, P-gp அடி மூலக்கூறுகளால் அவை பாதிக்கப்படவில்லை என்பதைக் குறிக்கிறது.32 .இந்த கவனிப்பு மற்ற டிரான்ஸ்போர்ட்டர்கள் மற்றும் மாற்று ஜின்செனோசைட் கட்டமைப்புகளின் ஈடுபாட்டுடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம்.
புற்றுநோயில் G-Rg3 இன் தடுப்பு விளைவின் வழிமுறை தெளிவாக இல்லை.முந்தைய ஆய்வுகள் G-Rg3 ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தம் மற்றும் அழற்சியைக் குறைப்பதன் மூலம் டிஎன்ஏ சேதம் மற்றும் அப்போப்டொசிஸைத் தடுக்கிறது.சில அறிக்கைகள் BPDE-DNA34 ஐ உருவாக்க கட்டம் II என்சைம்களை மாற்றியமைப்பதன் மூலம் B(a)P ஆல் தூண்டப்பட்ட மரபணு நச்சுத்தன்மையை குறைக்கலாம் என்று குறிப்பிடுகின்றன.GST என்பது ஒரு பொதுவான கட்டம் II என்சைம் ஆகும், இது BPDE-DNA சேர்க்கை உருவாவதைத் தடுக்கிறது, இது GSH ஐ BPDE உடன் பிணைப்பதை ஊக்குவிப்பதன் மூலம் B(a)P35 ஆல் தூண்டப்பட்ட DNA சேதத்தைக் குறைக்கிறது.G-Rg3 சிகிச்சையானது HEL செல்களில் B(a)P- தூண்டப்பட்ட சைட்டோடாக்சிசிட்டி மற்றும் BPDE-DNA சேர்க்கை உருவாக்கத்தை குறைக்கிறது மற்றும் விட்ரோவில் GST வெளிப்பாடு மற்றும் செயல்பாட்டை மீட்டெடுக்கிறது என்பதை எங்கள் முடிவுகள் காட்டுகின்றன.இருப்பினும், இந்த விளைவுகள் Nrf2 இல்லாத நிலையில் இல்லை, G-Rg3 Nrf2 பாதை வழியாக சைட்டோபுரோடெக்டிவ் விளைவுகளைத் தூண்டுகிறது என்று பரிந்துரைக்கிறது.Nrf2 என்பது xenobiotics 36 இன் அனுமதியை ஊக்குவிக்கும் இரண்டாம் கட்ட நச்சுத்தன்மை என்சைம்களுக்கான முக்கிய படியெடுத்தல் காரணியாகும்.Nrf2 பாதையை செயல்படுத்துவது சைட்டோபுரோடெக்ஷனை தூண்டுகிறது மற்றும் திசு சேதத்தை குறைக்கிறது37.மேலும், பல அறிக்கைகள் புற்றுநோயை உண்டாக்குவதில் கட்டியை அடக்கியாக Nrf2 இன் பங்கை ஆதரித்துள்ளன38.G-Rg3 ஆல் Nrf2 பாதையின் தூண்டல் B(a)P- தூண்டப்பட்ட மரபணு நச்சுத்தன்மையில் B(a)P நச்சுத்தன்மையை நிலை II என்சைம்களை செயல்படுத்துவதன் மூலம், அதன் மூலம் tumorigenesis செயல்முறையைத் தடுக்கிறது.
ஜின்செனோசைட் ஜி-ஆர்ஜி3 இன் முக்கியமான ஈடுபாட்டின் மூலம் எலிகளில் பி(அ)பி-தூண்டப்பட்ட நுரையீரல் புற்றுநோயைத் தடுப்பதில் சிவப்பு ஜின்ஸெங்கின் திறனை எங்கள் பணி வெளிப்படுத்துகிறது.இந்த மூலக்கூறின் மோசமான வாய்வழி உயிர் கிடைக்கும் தன்மை அதன் மருத்துவ பயன்பாட்டைத் தடுக்கிறது.இருப்பினும், G-Rg3 என்பது P-gp இன் அடி மூலக்கூறு என்பதை இந்த ஆய்வு முதன்முறையாகக் காட்டுகிறது, மேலும் P-gp தடுப்பானின் நிர்வாகம் G-Rg3 இன் விட்ரோ மற்றும் விவோவில் உயிர் கிடைக்கும் தன்மையை அதிகரிக்கிறது.G-Rg3 Nrf2 பாதையை ஒழுங்குபடுத்துவதன் மூலம் B(a)P- தூண்டப்பட்ட சைட்டோடாக்சிசிட்டியைக் குறைக்கிறது, இது அதன் தடுப்புச் செயல்பாட்டிற்கான ஒரு சாத்தியமான பொறிமுறையாக இருக்கலாம்.நுரையீரல் புற்றுநோயைத் தடுப்பதற்கும் சிகிச்சையளிப்பதற்கும் ஜின்செனோசைட் G-Rg3 இன் திறனை எங்கள் ஆய்வு உறுதிப்படுத்துகிறது.
ஆறு வார வயதுடைய பெண் ஏ/ஜே எலிகள் (20 ± 1 கிராம்) மற்றும் 7 வார வயதுடைய ஆண் விஸ்டார் எலிகள் (250 ± 20 கிராம்) ஜாக்சன் ஆய்வகம் (பார் ஹார்பர், அமெரிக்கா) மற்றும் வுஹான் இன்ஸ்டிடியூட் ஆஃப் விலங்கியல் ஆகியவற்றிலிருந்து பெறப்பட்டது.பல்கலைக்கழகம் (வுஹான், சீனா).சீன வகை கலாச்சார சேகரிப்பு மையம் (வுஹான், சீனா) எங்களுக்கு Caco-2 மற்றும் hEL செல்களை வழங்கியது.Sigma-Aldrich (St. Louis, USA) என்பது B(a)P மற்றும் tricaprine ஆகியவற்றின் மூலமாகும்.சுத்திகரிக்கப்பட்ட ஜின்செனோசைடுகள் G-Rg3r மற்றும் G-Rg3s, டைமிதில் சல்பாக்சைடு (DMSO), CellTiter-96 பெருக்க மதிப்பீட்டு கருவி (MTS), வெராபமில், குறைந்தபட்ச அத்தியாவசிய ஊடகம் (MEM) மற்றும் கரு போவின் சீரம் (FBS) ஆகியவை செங்டு மஸ்ட் பயோ-டெக்னாலஜியில் இருந்து வாங்கப்பட்டன. .கோ., லிமிடெட்(செங்டு, சீனா).QIAamp DNA மினி கிட் மற்றும் BPDE-DNA சேர்க்கை ELISA கிட் ஆகியவை Qiagen (Stanford, CA, USA) மற்றும் Cell Biolabs (San Diego, CA, USA) ஆகியவற்றிலிருந்து வாங்கப்பட்டன.ஜிஎஸ்டி செயல்பாட்டு மதிப்பீட்டு கிட் மற்றும் மொத்த புரத மதிப்பீட்டு கிட் (நிலையான பிசிஏ முறை) சோலார்பியோவிலிருந்து (பெய்ஜிங், சீனா) வாங்கப்பட்டது.அனைத்து சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறுகளும் Mingyu ஆய்வகத்தில் சேமிக்கப்படுகின்றன 7. ஹாங்காங் பாப்டிஸ்ட் பல்கலைக்கழகம் (ஹாங்காங், சீனா) மற்றும் கொரியா புற்றுநோய் மையம் (சியோல், கொரியா) ஆகியவை CRG சாற்றின் வணிக ஆதாரங்கள் மற்றும் பல்வேறு கொரிய வம்சாவளியைச் சேர்ந்த பல்வேறு சிவப்பு ஜின்ஸெங் சாறுகள் (KRGA, KRGB உட்பட. மற்றும் KRGC).சிவப்பு ஜின்ஸெங் 6 வயது புதிய ஜின்ஸெங்கின் வேர்களில் இருந்து தயாரிக்கப்படுகிறது.ஜின்ஸெங்கை மூன்று முறை தண்ணீரில் கழுவி, பின்னர் அக்வஸ் சாற்றை குவித்து, இறுதியாக குறைந்த வெப்பநிலையில் உலர்த்துவதன் மூலம் ஜின்ஸெங் சாறு பெறப்படுகிறது.ஆன்டிபாடிகள் (ஆன்டி-என்ஆர்எஃப்2, ஜிஎஸ்டி எதிர்ப்பு, மற்றும் β-ஆக்டின்), ஹார்ஸ்ராடிஷ் பெராக்ஸிடேஸ்-கன்ஜுகேட்டட் ஆன்டி-ராபிட் இம்யூனோகுளோபுலின் ஜி (ஐஜிஜி), டிரான்ஸ்ஃபெக்ஷன் ரீஜென்ட், கண்ட்ரோல் சிஆர்என்ஏ மற்றும் என்ஆர்எஃப்2 சிஆர்என்ஏ ஆகியவை சாண்டா குரூஸ் பயோடெக்னாலஜி (சாண்டா குரூஸ், சிஏ) இலிருந்து வாங்கப்பட்டன. .), அமெரிக்கா).
Caco2 மற்றும் hEL செல்கள் 5% CO2 ஈரப்பதமான வளிமண்டலத்தில் 37 °C இல் 10% FBS கொண்ட MEM உடன் 100 mm2 செல் கலாச்சார உணவுகளில் வளர்க்கப்பட்டன.சிகிச்சை நிலைமைகளின் விளைவைத் தீர்மானிக்க, HEL செல்கள் MEM இல் B(a)P மற்றும் G-Rg3 ஆகியவற்றின் வெவ்வேறு செறிவுகளுடன் 48 மணிநேரத்திற்கு அடைகாத்தன.செல்கள் இல்லாத சாற்றைத் தயாரிக்க செல்களை மேலும் பகுப்பாய்வு செய்யலாம் அல்லது சேகரிக்கலாம்.
அனைத்து சோதனைகளும் டோங்ஜி மருத்துவக் கல்லூரியின் பரிசோதனை விலங்கு நெறிமுறைக் குழுவால் அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளன, ஹுவாஜோங் அறிவியல் மற்றும் தொழில்நுட்ப பல்கலைக்கழகம் (ஒப்புதல் எண். 2019; பதிவு எண். 4587TH).அனைத்து சோதனைகளும் தொடர்புடைய வழிகாட்டுதல்கள் மற்றும் விதிமுறைகளின்படி மேற்கொள்ளப்பட்டன, மேலும் ஆய்வு விலங்கு ஆராய்ச்சி: இன் விவோ பரிசோதனைகள் (அரைவ்) வழிகாட்டுதல்களின்படி நடத்தப்பட்டது.எட்டு வார வயதுடைய ஏ/ஜே எலிகள் முதன்முதலில் ட்ரைகாபிரைன் கரைசலில் (100 மி.கி./கி.கி., 0.2 மில்லி) B(a)P உடன் உட்செலுத்தப்பட்டது.ஒரு வாரத்திற்குப் பிறகு, எலிகள் தோராயமாக கட்டுப்பாட்டுக் குழுக்கள் மற்றும் வெவ்வேறு சிகிச்சை குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன, ஒவ்வொரு குழுவிலும் 15 எலிகள், மற்றும் ஒரு நாளைக்கு ஒரு முறை குடலிறக்கம் செய்யப்பட்டன.20 வார சிகிச்சைக்குப் பிறகு, CO2 மூச்சுத்திணறலால் விலங்குகள் பலியிடப்பட்டன.நுரையீரல் சேகரிக்கப்பட்டு 24 மணி நேரம் சரி செய்யப்பட்டது.ஒவ்வொரு நுரையீரலுக்கும் மேலோட்டமான கட்டிகளின் எண்ணிக்கை மற்றும் தனிப்பட்ட கட்டி அளவுகள் ஒரு நுண்ணோக்கியின் கீழ் அளவிடப்பட்டன.கட்டியின் அளவு மதிப்பீடுகள் (V) பின்வரும் வெளிப்பாட்டைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டது: V (mm3) = 4/3πr3, இங்கு r என்பது கட்டியின் விட்டம்.எலிகளின் நுரையீரலில் உள்ள அனைத்து கட்டி தொகுதிகளின் நிகரத் தொகை மொத்த கட்டி அளவைக் குறிக்கிறது, மேலும் ஒவ்வொரு குழுவிலும் உள்ள சராசரி மொத்த கட்டி அளவு கட்டி சுமையைக் குறிக்கிறது.UPLC-MS/MS நிர்ணயத்திற்காக முழு இரத்தம் மற்றும் குடல் மாதிரிகள் சேகரிக்கப்பட்டு −80°C இல் சேமிக்கப்பட்டன.சீரம் சேகரிக்கப்பட்டது மற்றும் கல்லீரல் மற்றும் சிறுநீரக செயல்பாட்டை மதிப்பிடுவதற்கு அலனைன் அமினோட்ரான்ஸ்ஃபெரேஸ் (ALT) மற்றும் சீரம் கிரியேட்டினின் (Cr) அளவை பகுப்பாய்வு செய்ய ஒரு தானியங்கு வேதியியல் பகுப்பாய்வி பயன்படுத்தப்பட்டது.
சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரிகள் குளிர் சேமிப்பிலிருந்து அகற்றப்பட்டு, கரைக்கப்பட்டு, எடையிடப்பட்டு, மேலே விவரிக்கப்பட்டபடி குழாய்களில் வைக்கப்பட்டன.இதில் 0.8 மிலி மெத்தனால் கரைசலில் 0.5 μM புளோரிசின் (உள் தரநிலை) சேர்க்கப்பட்டது.திசு-கழிநீரைப் பயன்படுத்தி திசு ஒரே மாதிரியாக மாற்றப்பட்டது மற்றும் ஹோமோஜெனேட் பின்னர் 1.5 மில்லி மைக்ரோசென்ட்ரிஃப்யூஜ் குழாய்க்கு மாற்றப்பட்டது.கலவை 15 நிமிடங்களுக்கு 15500 ஆர்பிஎம்மில் மையவிலக்கு செய்யப்பட்டது.1.0 மில்லி சூப்பர்நேட்டன்ட்டை அகற்றிய பிறகு, நைட்ரஜனுடன் உலர்த்தவும்.மீட்பதற்காக இருநூறு மைக்ரோலிட்டர் மெத்தனால் பயன்படுத்தப்பட்டது.இரத்தம் ஒரு வரியில் சேகரிக்கப்பட்டு செயலாக்கப்படுகிறது மற்றும் அனைத்து அளவீடுகளுக்கும் ஒரு குறிப்பாக பயன்படுத்தப்படுகிறது.
24-கிணறு டிரான்ஸ்வெல் தகடுகள் வெராபமில் சேர்ப்பதன் மூலம் G-Rg3 போக்குவரத்தின் சாத்தியமான மேம்பாட்டை மதிப்பிடுவதற்கு ஒரு கிணற்றுக்கு 1.0 × 105 Caco-2 செல்கள் விதைக்கப்பட்டன.3 வார கலாச்சாரத்திற்குப் பிறகு, செல்கள் HBSS உடன் கழுவப்பட்டு 37 ° C வெப்பநிலையில் முன்கூட்டியே அடைக்கப்படுகின்றன.400 μL இன் 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s, அல்லது 50 அல்லது 100 μM வெராபமில் கொண்ட கலவை) மோனோலேயரின் பாசோலேட்டரல் அல்லது அபிகல் பக்கத்தில் செலுத்தப்பட்டது, மேலும் 600 μL HBSS கரைசல் மற்றவற்றில் சேர்க்கப்பட்டது. பக்கம்.குறிப்பிட்ட நேரத்தில் (0, 15, 30, 45, 60, 90 மற்றும் 120 நிமிடங்கள்) 100 µl கலாச்சார ஊடகத்தைச் சேகரித்து, 100 µl HBSSஐச் சேர்த்து இந்த அளவை உருவாக்கவும்.UPLC-MS/MS மூலம் கண்டறியும் வரை மாதிரிகள் −4 °C இல் சேமிக்கப்பட்டன.Papp = dQ/(dT × A × C0) என்ற வெளிப்பாடு வெளிப்படையான ஒருதிசை நுனி மற்றும் பாசோலேட்டரல் ஊடுருவல் மற்றும் நேர்மாறாக (முறையே Pa-b மற்றும் Pb-a) அளவிட பயன்படுகிறது;dQ/dT என்பது செறிவில் ஏற்படும் மாற்றமாகும், A (0.6 cm2) என்பது மோனோலேயரின் மேற்பரப்பு பகுதி, மற்றும் C0 என்பது ஆரம்ப நன்கொடையாளர் செறிவு ஆகும்.வெளியேற்ற விகிதம் Pb-a/Pa-b என கணக்கிடப்படுகிறது, இது ஆய்வு மருந்தின் வெளியேற்ற விகிதத்தைக் குறிக்கிறது.
ஆண் விஸ்டார் எலிகள் 24 மணிநேரம் உண்ணாவிரதம் இருந்து, தண்ணீரை மட்டுமே குடித்து, 3.5% பென்டோபார்பிட்டல் கரைசலின் நரம்பு ஊசி மூலம் மயக்கமடைந்தன.உட்செலுத்தப்பட்ட சிலிகான் குழாய் டியோடெனத்தின் முடிவை நுழைவாயிலாகவும், இலியத்தின் முடிவை வெளியேறும் வழியாகவும் கொண்டுள்ளது.0.1 மில்லி/நிமிட ஓட்ட விகிதத்தில் ஐசோடோனிக் HBSS இல் 10 µM G-Rg3r அல்லது G-Rg3s உடன் உள்ளீட்டை பம்ப் செய்ய பெரிஸ்டால்டிக் பம்பைப் பயன்படுத்தவும்.வெராபமிலின் விளைவு 50 μM அல்லது 100 μM கலவையை 10 μM G-Rg3r அல்லது G-Rg3s உடன் சேர்ப்பதன் மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது.60, 90, 120, மற்றும் 150 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு பெர்ஃப்யூஷன் தொடங்கப்பட்ட நேரப் புள்ளிகளில் சேகரிக்கப்பட்ட பெர்ஃப்யூஷன் சாற்றில் UPLC-MS/MS செய்யப்பட்டது.உறிஞ்சுதலின் சதவீதம் % உறிஞ்சுதல் = (1 – Cout/Cin) × 100% சூத்திரத்தால் அளவிடப்படுகிறது;G-Rg3 இன் செறிவு கடையின் மற்றும் நுழைவாயில் முறையே Cout மற்றும் Cin மூலம் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.
ஹெச்இஎல் செல்கள் ஒரு கிணற்றுக்கு 1 × 104 செல்கள் அடர்த்தியில் 96-கிணறு தட்டுகளில் விதைக்கப்பட்டு B(a)P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) அல்லது G-Rg3 உடன் டிஎம்எஸ்ஓவில் கரைக்கப்பட்டது. .மருந்துகள் பின்னர் 48 மணிநேரத்தில் பல்வேறு செறிவுகளுக்கு (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) கலாச்சார ஊடகத்துடன் நீர்த்தப்பட்டன.வணிக ரீதியாக கிடைக்கக்கூடிய MTS மதிப்பீட்டு கருவியைப் பயன்படுத்தி, செல்கள் ஒரு நிலையான நெறிமுறைக்கு உட்படுத்தப்பட்டு பின்னர் 490 nm இல் மைக்ரோ பிளேட் ரீடரைப் பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்டது.B(a)P (10 μM) மற்றும் G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) உடன் இணைந்து சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட குழுக்களின் செல் நம்பகத்தன்மை நிலை மேலே உள்ள முறையின்படி மதிப்பிடப்பட்டு சிகிச்சை அளிக்கப்படாத குழுவுடன் ஒப்பிடப்பட்டது.
ஹெச்இஎல் செல்கள் 1 × 105 செல்கள்/கிணறு அடர்த்தியில் 6-கிணறு தகடுகளில் விதைக்கப்பட்டு 10 μM G-Rg3 முன்னிலையில் அல்லது இல்லாத நிலையில் 10 μMB(a)P உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது.48 மணிநேர சிகிச்சைக்குப் பிறகு, உற்பத்தியாளரின் நெறிமுறையின்படி QIAamp DNA Mini Kit ஐப் பயன்படுத்தி hEL செல்களிலிருந்து DNA பிரித்தெடுக்கப்பட்டது.BPDE-DNA சேர்க்கைகளின் உருவாக்கம் BPDE-DNA சேர்க்கை ELISA கருவியைப் பயன்படுத்தி கண்டறியப்பட்டது.BPDE-DNA சேர்க்கையின் ஒப்பீட்டு நிலைகள் மைக்ரோ பிளேட் ரீடரைப் பயன்படுத்தி 450 nm இல் உறிஞ்சுதலை அளவிடுவதன் மூலம் அளவிடப்பட்டது.
ஹெச்இஎல் செல்கள் ஒரு கிணற்றுக்கு 1 × 104 செல்கள் அடர்த்தியில் 96-கிணறு தகடுகளில் விதைக்கப்பட்டு, 48 மணிநேரத்திற்கு 10 μM G-Rg3 இல்லாத நிலையில் அல்லது முன்னிலையில் 10 μMB(a)P உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது.உற்பத்தியாளரின் நெறிமுறையின்படி வணிக ஜிஎஸ்டி செயல்பாட்டு மதிப்பீட்டு கருவியைப் பயன்படுத்தி ஜிஎஸ்டி செயல்பாடு அளவிடப்பட்டது.மைக்ரோ பிளேட் ரீடரைப் பயன்படுத்தி 450 nm இல் உறிஞ்சுவதன் மூலம் தொடர்புடைய ஜிஎஸ்டி செயல்படுத்தல் அளவிடப்பட்டது.
ஹெச்இஎல் செல்கள் பனி-குளிர் பிபிஎஸ் மூலம் கழுவப்பட்டு, பின்னர் புரோட்டீஸ் தடுப்பான்கள் மற்றும் பாஸ்பேடேஸ் தடுப்பான்களைக் கொண்ட ரேடியோ இம்யூனோபிரெசிபிட்டேஷன் அஸ்ஸே பஃபரைப் பயன்படுத்தி லைஸ் செய்யப்பட்டன.மொத்த புரத மதிப்பீட்டு கருவியைப் பயன்படுத்தி புரத அளவீட்டுக்குப் பிறகு, ஒவ்வொரு மாதிரியிலும் 30 μg புரதம் 12% SDS-PAGE ஆல் பிரிக்கப்பட்டு எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மூலம் PVDF சவ்வுக்கு மாற்றப்பட்டது.சவ்வுகள் 5% கொழுப்பு நீக்கப்பட்ட பாலுடன் தடுக்கப்பட்டு ஒரே இரவில் 4 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் முதன்மை ஆன்டிபாடிகளுடன் அடைகாக்கப்பட்டது.ஹார்ஸ்ராடிஷ் பெராக்ஸிடேஸ்-இணைந்த இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடிகளுடன் அடைகாத்த பிறகு, பிணைப்பு சமிக்ஞையை காட்சிப்படுத்த மேம்படுத்தப்பட்ட கெமிலுமினென்சென்ஸ் ரியாஜெண்டுகள் சேர்க்கப்பட்டன.ஒவ்வொரு புரதக் குழுவின் தீவிரமும் ImageJ மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி அளவிடப்பட்டது.
அனைத்து தரவையும் பகுப்பாய்வு செய்ய GraphPad Prism 7.0 மென்பொருள் பயன்படுத்தப்பட்டது, சராசரி ± நிலையான விலகலாக வெளிப்படுத்தப்பட்டது.சிகிச்சை குழுக்களுக்கு இடையேயான மாறுபாடு மாணவர்களின் t சோதனை அல்லது மாறுபாட்டின் ஒரு வழி பகுப்பாய்வு மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது, P மதிப்பு <0.05 புள்ளியியல் முக்கியத்துவத்தைக் குறிக்கிறது.
இந்த ஆய்வின் போது பெறப்பட்ட அல்லது பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட அனைத்து தரவுகளும் இந்த வெளியிடப்பட்ட கட்டுரை மற்றும் துணைத் தகவல் கோப்புகளில் சேர்க்கப்பட்டுள்ளன.
Torre, LA, Siegel, RL மற்றும் Jemal, A. நுரையீரல் புற்றுநோய் புள்ளிவிவரங்கள்.வினையுரிச்சொல்.காலாவதியான.மருந்து.உயிரியல்.893, 1–19 (2016).
ஹெக்ட், எஸ். புகையிலை புற்றுநோய்கள், அவற்றின் உயிரியல் குறிப்பான்கள் மற்றும் புகையிலையால் தூண்டப்பட்ட புற்றுநோய்.நாட்.புற்றுநோய் குரு.3, 733–744 (2003).
Phillips, DH மற்றும் Venitt, S. டிஎன்ஏ மற்றும் புகையிலை புகையின் வெளிப்பாட்டின் விளைவாக மனித திசுக்களில் புரத சேர்க்கைகள்.சர்வதேசம்.ஜே. புற்றுநோய்.131, 2733–2753 (2012).
யாங் ஒய்., வாங் ஒய்., டாங் கே., லுபெட் ஆர்.ஏ. மற்றும் யூ எம். ஹூட்டுய்னியா கார்டாட்டா மற்றும் சிலிபினின் ஆகியவற்றின் விளைவு ஏ/ஜே எலிகளில் பென்சோ(அ)பைரீன்-தூண்டப்பட்ட நுரையீரல் கட்டி உருவாக்கம்.புற்றுநோய் 7, 1053–1057 (2005).
டாங், டபிள்யூ. மற்றும் பலர்.சீன மருத்துவப் பொருட்களிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட புற்றுநோய் எதிர்ப்பு இயற்கை தயாரிப்பு.தாடைமருந்து.6, 27 (2011).
யாங், ஒய். மற்றும் பலர்.A/J எலிகளில் பென்சோ(a)பைரீன்-தூண்டப்பட்ட நுரையீரல் கட்டி உருவாக்கத்தில் பாலிஃபீனான் E, சிவப்பு ஜின்ஸெங் மற்றும் ராபமைசின் ஆகியவற்றின் செயல்திறன்.புற்றுநோய் 8, 52–58 (2006).
வாங், CZ, ஆண்டர்சன், S., Du, W., He, TS மற்றும் Yuan, KS Red, புற்றுநோய் சிகிச்சையில் ஈடுபாடு.தாடைஜே. நட்.மருந்து.14, 7–16 (2016).
அமெரிக்க ஜின்ஸெங்கின் வேர்கள் மற்றும் இலைகளில் லீ, டிஎஸ், மஸ்ஸா, ஜி., காட்ரெல், ஏஎஸ் மற்றும் காவோ, எல். ஜின்செனோசைடுகள்.ஜே. அக்ரிக்.உணவு வேதியியல்.44, 717–720 (1996).
Attele AS, Wu JA மற்றும் Yuan KS ஜின்ஸெங்கின் மருந்தியல்: பல கூறுகள் மற்றும் பல விளைவுகள்.உயிர் வேதியியல்.மருந்தியல்.58, 1685–1693 (1999).
இடுகை நேரம்: செப்-17-2023