Nature.com'u ziyaret ettiğiniz için teşekkür ederiz.Kullandığınız tarayıcı sürümünün CSS desteği sınırlıdır.En iyi sonuçları elde etmek için tarayıcınızın daha yeni bir sürümünü kullanmanızı (veya Internet Explorer'da uyumluluk modunu kapatmanızı) öneririz.Bu arada desteğin sürekliliğini sağlamak için siteyi stil veya JavaScript olmadan görüntülüyoruz.
Kırmızı ginseng geleneksel Asya tıbbında yüzlerce yıldır kullanılmaktadır.Bu çalışmada, farklı bölgelerde yetiştirilen dört tip kırmızı ginseng'in (Çin kırmızı ginsengi, Kore kırmızı ginseng A, Kore kırmızı ginseng B ve Kore kırmızı ginseng C) kanserojen kaynaklı akciğer oluşumunu ve büyümesini engelleme yeteneğini değerlendirdik. tümörler.A/J fareleri üzerinde bir benzo(a)piren (B(a)P) testi yapıldı ve Kore kırmızı ginseng B'nin, dört kırmızı ginseng çeşidi arasında tümör yükünü azaltmada en etkili olduğu bulundu.Ek olarak, dört kırmızı ginseng ekstraktında çeşitli ginsenosidlerin (Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 ve Rg5) içeriğini analiz ettik ve Kore kırmızı ginseng B'nin sahip olduğunu bulduk. ginsenosid Rg3'ün (G-Rg3) en yüksek seviyeleri, G-Rg3'ün terapötik etkinliğinde önemli bir rol oynayabileceğini düşündürmektedir.Bu çalışma G-Rg3'ün nispeten düşük biyoyararlanıma sahip olduğunu göstermektedir.Bununla birlikte, G-Rg3, P-gp inhibitörü verapamil ile birlikte uygulandığında, G-Rg3'ün Caco-2 hücrelerine akışı azaldı, bir sıçan modelinde G-Rg3'ün bağırsaktan emilim oranı arttı ve G-Rg3 arttırıldı.Caco-2 hücrelerinde Rg3'ün çıkışı azalır ve Rg3 konsantrasyonunun seviyesi azalır.G-Rg3 bağırsakta ve plazmada arttırılmıştır ve tümörleri önleme yeteneği aynı zamanda B(a)P'nin indüklediği tümör oluşumuna ilişkin bir sıçan modelinde de arttırılmıştır.Ayrıca G-Rg3'ün insan akciğer hücrelerinde B(a)P kaynaklı sitotoksisiteyi ve DNA eklenti oluşumunu azalttığını ve potansiyel etki mekanizmasıyla ilişkili olabilecek Nrf2 yolu yoluyla faz II enzimlerinin ekspresyonunu ve aktivitesini geri kazandırdığını da bulduk. G inhibisyonunun -Rg3..Akciğer tümörlerinin oluşumu hakkında.Çalışmamız fare modellerinde akciğer tümörlerini hedeflemede G-Rg3'ün potansiyel olarak önemli bir rol oynadığını göstermektedir.Bu ginsenosidin oral biyoyararlanımı, P-glikoproteinin hedeflenmesiyle arttırılır ve molekülün antikanser etkileri göstermesine izin verilir.
Akciğer kanserinin en yaygın türü, Çin ve Kuzey Amerika'da kanser ölümlerinin önde gelen nedenlerinden biri olan küçük hücreli dışı akciğer kanseridir (KHDAK).Küçük hücreli dışı akciğer kanserine yakalanma riskini artıran en önemli faktör sigaradır.Sigara dumanı, benzo(a)piren (B(a)P), nitrozaminler ve radonun bozunmasından kaynaklanan radyoaktif izotoplar da dahil olmak üzere 60'tan fazla kanserojen içerir.3 Polisiklik aromatik hidrokarbonlar B(a)P, sigaradaki toksisitenin ana nedenidir. Sigara içmek.B(a)P'ye maruz kalma üzerine sitokrom P450, onu B(a)P-7,8-dihidrodiol-9,10-epoksite (BPDE) dönüştürür ve bu da DNA ile reaksiyona girerek BPDE-DNA eklentisi 4'ü oluşturur. eklentileri, tümör evresi ve histopatolojisi insan akciğer tümörlerine benzer olan farelerde akciğer tümör oluşumunu indükler5.Bu özellik, B(a)P kaynaklı akciğer kanseri modelini olası antikanser özelliklere sahip bileşiklerin değerlendirilmesi için uygun bir sistem haline getirir.
Yüksek riskli gruplarda, özellikle de sigara içenlerde akciğer kanseri gelişimini önlemek için olası bir strateji, intraepitelyal neoplastik lezyonların gelişimini baskılamak ve böylece bunların daha sonra maligniteye ilerlemesini önlemek için kemopreventif ajanların kullanılmasıdır.Hayvan çalışmaları çeşitli kemopreventif ajanların etkili olduğunu göstermektedir6.Önceki raporumuz7 kırmızı ginseng'in akciğer kanseri üzerindeki iyi önleyici etkilerini vurguladı.Bu bitki yüzyıllardır geleneksel Asya tıbbında yaşamı ve sağlığı uzatmak için kullanılmış ve antitümör etkileri olduğu belgelenmiştir8.
Ginseng'in aktif faktörü, ginseng ekstraktlarının kalitesini değerlendirmek için kompozit bir belirteç olarak kullanılan ginsenosiddir.Ham ginseng ekstraktlarının kantitatif analizi tipik olarak RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5 ve Rc9,10 dahil olmak üzere çeşitli ginsenosidlerin kullanımını içerir.Ginsenosidlerin oral biyoyararlanımlarının çok zayıf olması nedeniyle klinik kullanımı çok azdır11.Bu zayıf biyoyararlanımın mekanizması açık olmasa da, bunun nedeni P-glikoprotein (P-gp)12'nin neden olduğu ginsenosidlerin dışarı akışı olabilir.P-gp, hücre içi maddeleri dış ortama salmak için ATP hidrolizinin enerjisini kullanan, ATP bağlayıcı kaset taşıyıcı süper ailesindeki en önemli akış taşıyıcılarından biridir.P-gp taşıyıcıları tipik olarak bağırsakta, böbrekte, karaciğerde ve kan-beyin bariyerinde geniş çapta dağılmıştır13.P-gp, bağırsak emiliminde kritik bir rol oynar ve P-gp'nin inhibisyonu, bazı antikanser ilaçlarının oral emilimini ve kullanılabilirliğini artırır12,14.Literatürde daha önce kullanılan inhibitörlerin örnekleri verapamil ve siklosporin A15'tir.Bu çalışma, Çin ve Kore'den gelen farklı kırmızı ginseng ekstraktlarının maligniteleri etkileme yeteneğini değerlendirmek amacıyla B(a)P kaynaklı akciğer kanserini incelemek için bir fare sistemi kurmayı içerir.Ekstraktlar, karsinogenezi etkileyebilecek spesifik ginsenosidleri tanımlamak için ayrı ayrı analiz edildi.Verapamil daha sonra P-gp'yi hedeflemek ve kanseri hedef alan ginsenosidlerin oral biyoyararlanımını ve terapötik etkinliğini geliştirmek için kullanıldı.
Ginseng saponinlerinin karsinogenez üzerinde terapötik etki gösterdiği mekanizma belirsizliğini koruyor.Araştırmalar, çeşitli ginsenosidlerin, oksidatif stresi azaltarak ve faz II detoksifikasyon enzimlerini aktive ederek kanserojenlerin neden olduğu DNA hasarını azaltabildiğini ve böylece hücre hasarını önleyebildiğini göstermiştir.Glutatyon S-transferaz (GST), kanserojenlerin neden olduğu DNA hasarını azaltmak için gerekli olan tipik bir faz II enzimidir17.Nükleer eritroid 2 ile ilişkili faktör 2 (Nrf2), redoks homeostazisini düzenleyen ve faz II enzimlerinin ekspresyonunu ve sitoprotektif antioksidan yanıtları aktive eden önemli bir transkripsiyon faktörüdür18.Çalışmamız aynı zamanda tanımlanan ginsenosidlerin B(a)P kaynaklı sitotoksisiteyi ve BPDE-DNA eklenti oluşumunu azaltmanın yanı sıra normal akciğer hücrelerinde Nrf2 yolunu modüle ederek faz II enzimlerini indükleme üzerindeki etkilerini de inceledi.
B(a)P kaynaklı kanserin fare modelinin oluşturulması önceki çalışmalarla tutarlıdır5.Şekil 1A, B(a)P, su (kontrol), Çin kırmızı ginseng ekstraktı (CRG), Kore kırmızı ginseng ekstraktı A (KRGA) ve Kore kırmızısı ile indüklenen bir fare kanseri modelinin 20 haftalık tedavisinin deneysel tasarımını göstermektedir. ginseng.Ekstrakt B (KRGB) ve Kore Kırmızı Ginseng Ekstraktı C (KRGC).20 haftalık kırmızı ginseng tedavisinden sonra fareler CO2 boğulması yoluyla öldürüldü.Şekil 1B, farklı türde kırmızı ginseng ile tedavi edilen hayvanlardaki makroskopik akciğer tümörlerini gösterir ve Şekil 1C, bir tümör numunesinin temsili bir ışık mikrografını gösterir.KRGB ile tedavi edilen hayvanların tümör yükü (1,5 ± 0,35), Şekil 1D'de gösterildiği gibi kontrol hayvanlarınınkinden (0,82 ± 0,2, P <0,05) daha düşüktü.Tümör yükü inhibisyonunun ortalama derecesi %45 idi.Test edilen diğer kırmızı ginseng ekstraktları, tümör yükünde bu kadar önemli değişiklikler göstermedi (P > 0.05).20 haftalık kırmızı ginseng tedavisi sırasında fare modelinde, vücut ağırlığında herhangi bir değişiklik (veriler gösterilmemiştir) ve karaciğer veya böbrek toksisitesi olmaması da dahil olmak üzere hiçbir belirgin yan etki gözlenmedi (Şekil 1E,F).
Kırmızı ginseng özütü, A/J farelerinde akciğer tümörü gelişimini tedavi eder.(A) Deneysel tasarım.(B) Bir fare modelinde büyük akciğer tümörleri.Tümörler oklarla gösterilmiştir.a: Çin kırmızı ginseng grubu.b: Kore kırmızı ginsenginin A grubu.c: Kore kırmızı ginseng grubu B. d: Kore kırmızı ginseng grubu C. d: Kontrol grubu.(C) Akciğer tümörünü gösteren ışık mikrografı.Büyütme: 100. b: 400. (D) Kırmızı ginseng ekstresi grubundaki tümör yükü.(E) Karaciğer enzimi ALT'nin plazma seviyeleri.(F) Böbrek enzimi Cr'nin plazma seviyeleri.Veriler ortalama ± standart sapma olarak ifade edildi.*P<0.05.
Bu çalışmada tanımlanan kırmızı ginseng ekstraktları, aşağıdaki ginsenosidleri ölçmek için ultra performanslı sıvı kromatografi tandem kütle spektrometresi (UPLC-MS/MS) ile analiz edildi: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Kk1 ve Kg5.Analitleri ölçmek için kullanılan UPLC ve MS koşulları önceki bir raporda19açıklanmıştı.Dört kırmızı ginseng ekstresinin UPLC-MS/MS kromatogramları Şekil 2A'da gösterilmektedir.Toplam ginsenosid içeriğinde önemli farklılıklar vardı ve en yüksek toplam ginsenosid içeriği CRG'deydi (590,27 ± 41,28 μmol/L) (Şekil 2B).Bireysel ginsenosidleri değerlendirirken (Şekil 2C), KRGB, diğer ginsenosidlere kıyasla en yüksek G-Rg3 seviyesini gösterdi (G-Rg3'ler için 58,33 ± 3,81 μmol/L ve G -Rg3r için 41,56 ± 2,88 μmol/L).L).kırmızı ginseng türü (P <0.001).G-Rg3, karbon 20'deki hidroksil grubunun pozisyonunda farklılık gösteren bir çift stereoizomer G-Rg3r ve G-Rg3 olarak ortaya çıkar (Şekil 2D).Sonuçlar, G-Rg3r veya G-Rg3'ün, B(a)P'nin indüklediği kanser fare modelinde önemli antikanser potansiyeline sahip olabileceğini göstermektedir.
Çeşitli kırmızı ginseng ekstraktlarındaki ginsenosidlerin içeriği.(A) Dört kırmızı ginseng ekstresinin UPLC-MS/MS kromatogramları.(B) Belirtilen ekstraktlardaki toplam ginsenosid içeriğinin tahmini.(C) Etiketli ekstrelerde bireysel ginsenosidlerin tespiti.(D) Ginsenosid stereoizomerleri G-Rg3r ve G-Rg3'lerin yapıları.Veriler, üçlü belirlemelerin ortalama ± standart sapması olarak ifade edilir.***P<0,001.
UPLC-MS/MS çalışması, 20 haftalık tedaviden sonra bağırsak ve kan örneklerinde ginsenosidlerin miktarının belirlenmesini gerektirdi.KRGB ile tedavi kanda yalnızca 0,0063 ± 0,0005 μg/ml Rg5'in varlığını gösterdi.Geriye kalan hiçbir ginsenosid tespit edilmedi; bu, ağızdan biyoyararlanımın zayıf olduğunu ve dolayısıyla bu ginsenosidlere maruz kalmanın azaldığını gösteriyor.
Kolon adenokarsinomu hücre dizisi Caco-2, morfolojik ve biyokimyasal olarak insan bağırsak epitel hücrelerine benzer ve bu durum, bağırsak epitel bariyeri boyunca enterosit taşınmasının değerlendirilmesinde faydasını gösterir.Bu analiz daha önceki bir çalışmaya20 dayanmaktadır.Şekil 3A,B,C,D,E,F, Caco-2 tek katmanlı modeli kullanılarak G-Rg3r ve G-Rg3'ün hücre içi taşınmasının temsili görüntülerini gösterir.G-Rg3r veya G-Rg3'ün Caco-2 tek katmanları boyunca bazolateralden apikal tarafa (Pb-a) transselüler taşınması, apikalden bazolateral tarafa (Pa-b) göre önemli ölçüde daha yüksekti.G-Rg3r için ortalama Pa-b değeri 0,38 ± 0,06 idi; bu değer, 50 μmol/L verapamil ile tedaviden sonra 0,73 ± 0,06'ya ve 100 μmol/L verapamil ile tedaviden sonra 1,14 ± 0,09'a yükseldi (p < 0,01 ve 0,001, sırasıyla Şekil 2).3 A).G-Rg3'e yönelik gözlemler de benzer bir model izledi (Şekil 3B) ve sonuçlar, verapamil tedavisinin G-Rg3r ve G-Rg3'ün taşınmasını arttırdığını gösterdi.Verapamil tedavisi ayrıca ortalama Pb-a ve G-Rg3r ve G-Rg3s akış oranlarında (Şekil 3C,D,E,F) önemli bir düşüşe neden oldu; bu, verapamil tedavisinin Caco-2 akış hücrelerinde ginsenosid içeriğini azalttığını gösteriyor..
Caco-2 tek katmanlarında G-Rg3'ün hücre içi taşınması ve bir sıçan perfüzyon tahlilinde bağırsak emilimi.(A) Caco-2 tek katmanındaki G-Rg3r grubunun Pa-b değeri.(B) Caco-2 tek katmanındaki G-Rg3s gruplarının Pa-b değeri.(C) Caco-2 tek katmanındaki G-Rg3r grubunun Pb değeri.(D) Caco-2 tek katmanındaki G-Rg3 gruplarının Pb değeri.(E) Caco-2 tek katmanındaki G-Rg3r gruplarının verim oranı.(F) Caco-2 tek katmanındaki G-Rg3 gruplarının verim oranı.(G) Sıçanlarda perfüzyon analizinde G-Rg3r'nin bağırsak emiliminin yüzdesi.(H) Sıçanlarda perfüzyon tahlilinde G-Rg3'ün bağırsak emiliminin yüzdesi.Geçirgenlik ve emilim, verapamil eklenmeden karşılaştırıldı.Veriler, beş bağımsız deneyin ortalama ± standart sapması olarak ifade edilmiştir.*P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001.
Daha önceki çalışmalarla tutarlı olarak20, verapamil tedavisinden sonra bağırsakta G-Rg3 emiliminin artıp artmadığını belirlemek için sıçanların ortotopik bağırsak perfüzyonu yapıldı.Şekil 3G,H, yukarıdaki zaman dilimleri sırasında kanser modeli sıçanlarda G-Rg3r ve G-Rg3'ün bağırsak emiliminin yüzdesini değerlendirmek için temsili perfüzyon analizlerini göstermektedir.Yaklaşık %10'luk zayıf G-Rg3r alımının başlangıç yüzdesi, 50 μM verapamil ile tedaviden sonra %20'nin üzerine ve 100 μM verapamil ile tedaviden sonra %25'in üzerine çıktı.Benzer şekilde, başlangıç alımı %10 olan G-Rg3 de 50 μM verapamil ile tedaviden sonra %20'nin üzerinde ve 100 μM verapamil ile tedaviden sonra neredeyse %30'luk bir zirve gösterdi; bu da P-gp'nin verapamil tarafından inhibisyonunun, Akciğer kanserinin bir fare modelinde bağırsak G-emilimi Rg3.
Yukarıdaki yönteme göre B(a)P'nin indüklediği kanser modeli fareler, Şekil 4A'da gösterildiği gibi rastgele altı gruba ayrıldı.G-Rg3 tedavi grubunda kontrol grubuyla karşılaştırıldığında anlamlı bir kilo kaybı veya klinik toksisite belirtileri gözlenmedi (veriler gösterilmemiştir).20 haftalık tedavinin ardından her farenin akciğerleri toplandı.Şekil 4B, yukarıdaki tedavi gruplarındaki farelerdeki makroskopik akciğer tümörlerini gösterir ve Şekil 4C, temsili bir tümörün temsili bir ışık mikrografını gösterir.Her gruptaki tümör yüküne ilişkin olarak (Şekil 4D), G-Rg3r ve G-Rg3'lerle tedavi edilen farelerin değerleri sırasıyla 0,75 ± 0,29 mm3 ve 0,81 ± 0,30 mm3 iken, tedavi edilen G Farelerin değerleri -Rg3'lerle sırasıyla 1,63 ±0,40 mm3 idi.kontrol fareleri (p < 0.001), bu da G-Rg3 tedavisinin farelerde tümör yükünü azalttığını gösterir.Verapamil uygulanması bu azalmayı daha da arttırdı: verapamil+ G-Rg3r farelerindeki değerler 0,75 ± 0,29 mm3'ten 0,33 ± 0,25 mm3'e (p < 0,01) düştü ve verapamil+ için 0,81 ± 0,30 mm3'ten değerler 0,29 ± 0,21'e düştü G.-Rg3s ile tedavi edilen farelerde mm3 (p < 0.05), bu da verapamilin G-Rg3'ün tümör oluşumu üzerindeki önleyici etkisini artırabileceğini gösterir.Tümör yükü, kontrol grubu ile verapamil grubu, G-Rg3r grubu ile G-Rg3s grubu ve verapamil+G-Rg3r grubu ile verapamil+G-Rg3s grubu arasında anlamlı bir fark göstermedi.Ayrıca değerlendirilen tedavilerle ilişkili önemli bir karaciğer veya böbrek toksisitesi yoktu (Şekil 4E,F).
Belirtilen gruplarda G-Rg3 tedavisinden sonra tümör yükü ve plazma veya bağırsak G-Rg3r ve G-Rg3 seviyeleri.(A) Deneysel tasarım.(B) Fare modelindeki makroskopik tümörler.Tümörler oklarla gösterilmiştir.a: G-Rg3r.b: G-Rg3'ler.c: Verapamil ile kombinasyon halinde G-Rg3r.d: Verapamil ile kombinasyon halinde G-Rg3.d: Verapamil.e: kontrol.(C) Tümörün büyütülmüş optik mikrografı.Cevap: 100x.b: 400X.(D) A/J farelerinde G-Rg3 + verapamil tedavisinin tümör yükü üzerindeki etkisi.(E) Karaciğer enzimi ALT'nin plazma seviyeleri.(F) Böbrek enzimi Cr'nin plazma seviyeleri.(G) Belirtilen grupların G-Rg3r veya G-Rg3'ün plazma seviyeleri.(H) Belirtilen grupların bağırsaklarındaki G-Rg3r veya G-Rg3 seviyeleri.Veriler, üçlü belirlemelerin ortalama ± standart sapması olarak ifade edilir.*P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001.
B(a)P'nin indüklediği kanser modeli farelerdeki G-Rg3 seviyeleri, Yöntemler bölümünde açıklanan yönteme göre 20 haftalık bir tedavi periyodundan sonra UPLC-MS/MS ile değerlendirildi.Şekil 4G ve H, sırasıyla plazma ve bağırsak G-Rg3 seviyelerini göstermektedir.Plazma G-Rg3r seviyeleri 0,44 ± 0,32 μmol/L idi ve eşzamanlı verapamil uygulamasıyla 1,17 ± 0,47 μmol/L'ye yükseldi (p < 0,001), bağırsak G-Rg3r seviyeleri ise 0,53 ± 0,08 µg/l idi.Verapamil ile kombine edildiğinde g değeri 1,35 ± 0,13 μg/g'ye yükseldi (p < 0,001).G-Rg3 için sonuçlar benzer bir model izledi; bu da verapamil tedavisinin A/J farelerinde G-Rg3'ün oral biyoyararlanımını arttırdığını gösterdi.
B(a)P ve G-Rg3'ün hEL hücreleri üzerindeki sitotoksisitesini değerlendirmek için hücre canlılığı analizi kullanıldı.HEL hücrelerinde B(a)P tarafından indüklenen sitotoksisite Şekil 5A'da gösterilirken, G-Rg3r ve G-Rg3'ün toksik olmayan özellikleri Şekil 5A ve 5B'de gösterilmektedir.5B, C. G-Rg3'ün sitoprotektif etkisini değerlendirmek için B(a)P, hEL hücrelerine çeşitli G-Rg3r veya G-Rg3 konsantrasyonlarıyla birlikte uygulandı.Şekil 5D'de gösterildiği gibi, 5 μM, 10 μM ve 20 μM konsantrasyonlarındaki G-Rg3r, hücre canlılığını sırasıyla %58,3, %79,3 ve %77,3'e geri yükledi.Benzer sonuçlar G-Rg3 grubunda da görülebilir.G-Rg3 konsantrasyonları 5 uM, 10 uM ve 20 uM olduğunda, hücre canlılığı sırasıyla %58,3, %72,7 ve %76,7'ye geri getirildi (Şekil 5E).).BPDE-DNA eklentilerinin varlığı bir ELISA kiti kullanılarak ölçüldü.Sonuçlarımız, B(a)P ile tedavi edilen grupta BPDE-DNA eklenti seviyelerinin kontrol grubuyla karşılaştırıldığında arttığını, ancak G-Rg3 ortak tedavisiyle karşılaştırıldığında B(a)P grubundaki BPDE-DNA eklenti seviyelerinin arttığını gösterdi. B ile tedavi edilen grupta DNA eklenti seviyeleri önemli ölçüde azaldı.Tek başına B(a)P ile tedavinin sonuçları Şekil 5F'de gösterilmektedir (G-Rg3r için 1,87 ± 0,33'e karşı 3,77 ± 0,42, G -Rg3s için 1,93 ± 0,48'e karşı 3,77 ± 0,42, p < 0,001).
G-Rg3 ve B(a)P ile tedavi edilen hEL hücrelerinde hücre canlılığı ve BPDE-DNA eklenti oluşumu.(A) B(a)P ile tedavi edilen hEL hücrelerinin canlılığı.(B) G-Rg3r ile tedavi edilen hEL hücrelerinin canlılığı.(C) G-Rg3 ile tedavi edilen hEL hücrelerinin canlılığı.(D) B(a)P ve G-Rg3r ile tedavi edilen hEL hücrelerinin canlılığı.(E) B(a)P ve G-Rg3 ile tedavi edilen hEL hücrelerinin canlılığı.(F) B(a)P ve G-Rg3 ile tedavi edilen hEL hücrelerindeki BPDE-DNA eklentisinin seviyeleri.Veriler, üçlü belirlemelerin ortalama ± standart sapması olarak ifade edilir.*P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001.
GST enzim ekspresyonu, 10 μM B(a)P ve 10 μM G-Rg3r veya G-Rg3s ile birlikte işlemden geçirildikten sonra tespit edildi.Sonuçlarımız B(a)P'nin GST ifadesini baskıladığını (G-Rg3r grubunda %59,7 ± 8,2 ve G-Rg3s grubunda %39 ± 4,5) ve B(a)P'nin G-Rg3r ile ilişkili olduğunu gösterdi. veya G-Rg3r ile veya G-Rg3r ile.G-Rg3'lerle birlikte tedavi, GST ifadesini geri yükledi.GST ifadesi (G-Rg3r grubunda %103,7 ± 15,5 ve G-Rg3s grubunda %110 ± 11,1, sırasıyla p < 0,05 ve p < 0,001, Şekil 6A, B ve C).GST aktivitesi, bir aktivite tahlil kiti kullanılarak değerlendirildi.Sonuçlarımız kombinasyon tedavisi grubunun yalnızca B(a)P grubuna kıyasla daha yüksek GST aktivitesine sahip olduğunu gösterdi (G-Rg3r grubunda %96,3 ± 6,6'ya karşı %35,7 ± %7,8'e karşılık G-Rg3r grubunda 92,3 ± 6,5) ).G-Rg3s grubunda %'ye karşılık %35,7 ± %7,8, p < 0,001, Şekil 6D).
B(a)P ve G-Rg3 ile tedavi edilen hEL hücrelerinde GST ve Nrf2'nin ifadesi.(A) GST ifadesinin Western blotlama yoluyla tespiti.(B) B(a)P ve G-Rg3r ile tedavi edilen hEL hücrelerinde GST'nin kantitatif ifadesi.(C) B(a)P ve G-Rg3'lerle tedavi edilen hEL hücrelerinde GST'nin kantitatif ifadesi.(D) B(a)P ve G-Rg3 ile tedavi edilen hEL hücrelerinde GST aktivitesi.(E) Nrf2 ifadesinin Western blotlama yoluyla tespiti.(F) B(a)P ve G-Rg3r ile tedavi edilen hEL hücrelerinde Nrf2'nin kantitatif ifadesi.(G) B(a)P ve G-Rg3'lerle tedavi edilen hEL hücrelerinde Nrf2'nin kantitatif ifadesi.Veriler, üçlü belirlemelerin ortalama ± standart sapması olarak ifade edilir.*P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001.
B(a)P kaynaklı tümör oluşumunun G-Rg3 aracılı baskılanmasında rol oynayan yolları açıklamak için Nrf2 ekspresyonu Western blotlama ile değerlendirildi.Şekil 6E,F,G'de gösterildiği gibi kontrol grubuyla karşılaştırıldığında yalnızca B(a)P tedavi grubunda Nrf2 seviyesi azaldı;ancak B(a)P tedavi grubuyla karşılaştırıldığında, PG-Rg3 grubundaki B(a) Nrf2 seviyeleri arttı (G-Rg3r için %106 ± 9,5 ve G-Rg3r için %51,3 ± %6,8, %117 ± 6,2). G-Rg3r'ye karşılık G-Rg3'ler için %41 ± 9,8, p < 0,01).
Spesifik küçük girişimci RNA (siRNA) kullanarak Nrf2 ifadesini baskılayarak Nrf2'nin önleyici rolünü doğruladık.Nrf2'nin yıkılması Western blotlama ile doğrulandı (Şekil 7A,B).Şekil 7C,D'de gösterildiği gibi, hEL hücrelerinin B(a)P ve G-Rg3 ile birlikte işlenmesi, B(a)P ile tedaviye kıyasla BPDE-DNA eklentilerinin sayısında (1,47 ± 0,21) bir azalmayla sonuçlandı. kontrol siRNA grubunda tek başına.) G-Rg3r 4,13 ± 0,49, G-Rg3s 1,8 ± 0,32 ve 4,1 ± 0,57, p < 0,01 idi.Ancak G-Rg3'ün BPDE-DNA oluşumu üzerindeki önleyici etkisi, Nrf2'nin yıkılması ile ortadan kaldırıldı.siNrf2 grubunda, B(a)P ve G-Rg3 ortak tedavisi ile tek başına B(a)P tedavisi arasında BPDE-DNA eklenti oluşumu açısından anlamlı bir fark yoktu (G-Rg3r için 3,0 ± 0,21'e karşı 3,56 ± 0,32) ).G-Rg3r için 3,6'ya karşılık G-Rg3'ler için ±0,45'e karşı 4,0±0,37, p > 0,05).
Nrf2 yıkımının hEL hücrelerinde BPDE-DNA eklenti oluşumu üzerindeki etkisi.(A) Nrf2'nin yıkılması Western blotlamayla doğrulandı.(B) Nrf2 bant yoğunluğunun ölçülmesi.(C) B(a)P ve G-Rg3r ile tedavi edilen hEL hücrelerinde Nrf2 yıkımının BPDE-DNA eklenti seviyeleri üzerindeki etkisi.(D) B(a)P ve G-Rg3 ile tedavi edilen hEL hücrelerinde Nrf2 yıkımının BPDE-DNA eklenti seviyeleri üzerindeki etkisi.Veriler, üçlü belirlemelerin ortalama ± standart sapması olarak ifade edilir.*P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001.
Bu çalışma, çeşitli kırmızı ginseng ekstraktlarının, B(a)P kaynaklı akciğer kanserinin bir fare modeli üzerindeki önleyici etkilerini değerlendirdi ve KRGB tedavisi, tümör yükünü önemli ölçüde azalttı.Bu ginseng ekstraktında en yüksek içeriğin G-Rg3 olduğu göz önüne alındığında, bu ginsenosidin tümör oluşumunu engellemedeki önemli rolü incelenmiştir.Hem G-Rg3r hem de G-Rg3 (G-Rg3'ün iki epimeri), B(a)P'nin indüklediği kanserin fare modelinde tümör yükünü önemli ölçüde azalttı.G-Rg3r ve G-Rg3, tümör hücrelerinin apoptozunu indükleyerek21, tümör büyümesini inhibe ederek22, hücre döngüsünü durdurarak23 ve anjiyogenezi24 etkileyerek antikanser etkiler gösterir.G-Rg3'ün ayrıca hücresel metastazı inhibe ettiği gösterilmiştir25 ve G-Rg3'ün kemoterapi ve radyoterapinin etkilerini artırma yeteneği belgelenmiştir26,27.Poon ve arkadaşları, G-Rg3 tedavisinin B(a)P28'in genotoksik etkilerini azaltabileceğini gösterdi.Bu çalışma, G-Rg3'ün çevresel kanserojen molekülleri hedeflemede ve kanseri önlemede terapötik potansiyelini göstermektedir.
İyi profilaktik potansiyellerine rağmen, ginsenosidlerin zayıf oral biyoyararlanımı, bu moleküllerin klinik kullanımı açısından bir zorluk teşkil etmektedir.Sıçanlarda ginsenosidlerin oral uygulamasının farmakokinetik analizi, biyoyararlanımının hala %5'ten az olduğunu göstermiştir29.Bu testler, 20 haftalık tedavi süresinden sonra yalnızca Rg5'in kan seviyelerinin azaldığını gösterdi.Zayıf biyoyararlanımın altında yatan mekanizmanın açıklığa kavuşturulması gerekmesine rağmen, P-gp'nin ginsenosidlerin akışında rol oynadığı düşünülmektedir.Bu çalışma ilk kez bir P-gp blokeri olan verapamil uygulamasının G-Rg3r ve G-Rg3'lerin oral biyoyararlanımını arttırdığını gösterdi.Dolayısıyla bu bulgu, G-Rg3r ve G-Rg3'lerin, akışını düzenlemek için P-gp'nin substratları olarak hareket ettiğini göstermektedir.
Bu çalışma, verapamil ile kombinasyon tedavisinin, akciğer kanserine sahip bir fare modelinde G-Rg3'ün oral biyoyararlanımını arttırdığını göstermektedir.Bu bulgu, P-gp blokajı üzerine G-Rg3'ün bağırsakta transselüler taşınmasının artması ve dolayısıyla emiliminin artmasıyla desteklenir.Caco2 hücrelerinde yapılan analizler, verapamil tedavisinin G-Rg3r ve G-Rg3'lerin akışını azaltırken membran geçirgenliğini iyileştirdiğini gösterdi.Yang ve ark.Çalışmalar, siklosporin A (başka bir P-gp blokeri) ile tedavinin, ginsenosid Rh2'nin biyoyararlanımını %120'lik başlangıç değerinden %30'un üzerine çıkardığını göstermiştir.Ginsenosid bileşikleri K ve Rg1 de benzer sonuçlar göstermiştir30,31.Verapamil ve siklosporin A birlikte uygulandığında, Caco-2 hücrelerindeki K bileşiğinin akışı önemli ölçüde 26,6'dan 3'ün altına düşerken, hücre içi seviyeleri 40 kat30 arttı.Verapamil varlığında, sıçan akciğer epitel hücrelerinde Rg1 seviyeleri arttı; bu, Meng ve ark.31 tarafından gösterildiği gibi, ginsenosid akışında P-gp'nin bir rol oynadığını ortaya koydu.Bununla birlikte verapamil, bazı ginsenosidlerin (Rg1, F1, Rh1 ve Re gibi) dışarı akışı üzerinde aynı etkiye sahip değildi; bu da Liang ve arkadaşları tarafından gösterildiği gibi P-gp substratlarından etkilenmediklerini gösteriyor.32.Bu gözlem diğer taşıyıcıların ve alternatif ginsenosid yapılarının katılımıyla ilişkili olabilir.
G-Rg3'ün kanser üzerindeki önleyici etkisinin mekanizması belirsizdir.Önceki çalışmalar, G-Rg3'ün, B(a)P kaynaklı tümör oluşumunu önlemenin altında yatan mekanizma olabilecek oksidatif stresi ve inflamasyonu16,33 azaltarak DNA hasarını ve apoptozu önlediğini göstermiştir.Bazı raporlar, B(a)P'nin neden olduğu genotoksisitenin, faz II enzimlerinin BPDE-DNA34 oluşturacak şekilde modüle edilmesiyle azaltılabileceğini göstermektedir.GST, GSH'nin BPDE'ye bağlanmasını teşvik ederek BPDE-DNA eklenti oluşumunu inhibe eden ve böylece B(a)P35 tarafından indüklenen DNA hasarını azaltan tipik bir faz II enzimidir.Sonuçlarımız, G-Rg3 tedavisinin, hEL hücrelerinde B(a)P kaynaklı sitotoksisiteyi ve BPDE-DNA eklenti oluşumunu azalttığını ve in vitro GST ekspresyonunu ve aktivitesini eski haline getirdiğini göstermektedir.Bununla birlikte, bu etkiler Nrf2'nin yokluğunda yoktu, bu da G-Rg3'ün Nrf2 yolu yoluyla sitoprotektif etkileri indüklediğini düşündürmektedir.Nrf2, ksenobiyotiklerin temizlenmesini destekleyen faz II detoksifikasyon enzimleri için önemli bir transkripsiyon faktörüdür36.Nrf2 yolunun aktivasyonu sitoproteksiyona neden olur ve doku hasarını azaltır37.Ayrıca, çeşitli raporlar Nrf2'nin karsinogenezde tümör baskılayıcı olarak rolünü desteklemiştir38.Çalışmamız, Nrf2 yolunun G-Rg3 tarafından uyarılmasının, faz II enzimlerini aktive ederek B(a)P detoksifikasyonuna neden olarak B(a)P kaynaklı genotoksisitede önemli bir düzenleyici rol oynadığını ve böylece tümör oluşumu sürecini inhibe ettiğini göstermektedir.
Çalışmamız, kırmızı ginseng'in, ginsenosid G-Rg3'ün önemli katılımı yoluyla farelerde B(a)P kaynaklı akciğer kanserini önleme potansiyelini ortaya koyuyor.Bu molekülün oral biyoyararlanımının zayıf olması klinik uygulamasını engellemektedir.Ancak bu çalışma ilk kez G-Rg3'ün bir P-gp substratı olduğunu ve bir P-gp inhibitörünün uygulanmasının G-Rg3'ün in vitro ve in vivo biyoyararlanımını arttırdığını göstermektedir.G-Rg3, koruyucu işlevi için potansiyel bir mekanizma olabilecek Nrf2 yolunu düzenleyerek B(a)P kaynaklı sitotoksisiteyi azaltır.Çalışmamız, ginsenosid G-Rg3'ün akciğer kanserinin önlenmesi ve tedavisindeki potansiyelini doğrulamaktadır.
Altı haftalık dişi A/J fareleri (20 ± 1 g) ve 7 haftalık erkek Wistar sıçanları (250 ± 20 g), Jackson Laboratuvarı (Bar Harbor, ABD) ve Wuhan Zooloji Enstitüsü'nden elde edildi.Üniversite (Wuhan, Çin).Çin Tipi Kültür Toplama Merkezi (Wuhan, Çin) bize Caco-2 ve hEL hücrelerini sağladı.Sigma-Aldrich (St. Louis, ABD) bir B(a)P ve trikaprin kaynağıdır.Saflaştırılmış ginsenosidler G-Rg3r ve G-Rg3'ler, dimetil sülfoksit (DMSO), CellTiter-96 proliferasyon tahlil kiti (MTS), verapamil, minimal esansiyel ortam (MEM) ve fetal sığır serumu (FBS), Chengdu Must Bio-Technology'den satın alınmıştır. .Limited Şirketi.(Chengdu, Çin).QIAamp DNA mini kiti ve BPDE-DNA eklenti ELISA kiti, Qiagen (Stanford, CA, ABD) ve Cell Biolabs'tan (San Diego, CA, ABD) satın alınmıştır.GST aktivite tahlil kiti ve toplam protein tahlil kiti (standart BCA yöntemi), Solarbio'dan (Pekin, Çin) satın alındı.Tüm kırmızı ginseng ekstraktları Mingyu Laboratuvarı 7'de saklanmaktadır. Hong Kong Baptist Üniversitesi (Hong Kong, Çin) ve Kore Kanser Merkezi (Seul, Kore), CRG ekstraktı ve çeşitli Kore kökenli çeşitli kırmızı ginseng ekstraktlarının (KRGA, KRGB dahil) ticari kaynaklarıdır. ve KRGC).Kırmızı ginseng, 6 yıllık taze ginsengin köklerinden yapılır.Kırmızı ginseng ekstraktı, ginseng'in suyla üç kez yıkanması, ardından sulu ekstraktın konsantre edilmesi ve son olarak ginseng ekstraktı tozu elde etmek için düşük sıcaklıkta kurutulmasıyla elde edilir.Antikorlar (anti-Nrf2, anti-GST ve β-aktin), yaban turpu peroksidaz konjuge anti-tavşan immünoglobulin G (IgG), transfeksiyon reaktifi, kontrol siRNA ve Nrf2 siRNA, Santa Cruz Bioteknoloji'den (Santa Cruz, CA) satın alınmıştır. .), AMERİKA BİRLEŞİK DEVLETLERİ).
Caco2 ve hEL hücreleri, %5 CO2'den oluşan nemli bir atmosferde 37 °C'de %10 FBS içeren MEM ile 100 mm2 hücre kültürü kaplarında kültürlendi.Tedavi koşullarının etkisini belirlemek için hEL hücreleri, MEM'de farklı konsantrasyonlarda B(a)P ve G-Rg3 ile 48 saat boyunca inkübe edildi.Hücreler, hücre içermeyen ekstraktlar hazırlamak için daha fazla analiz edilebilir veya toplanabilir.
Tüm deneyler, Huazhong Bilim ve Teknoloji Üniversitesi, Tongji Tıp Fakültesi Deney Hayvanları Etik Kurulu tarafından onaylandı (Onay No. 2019; Kayıt No. 4587TH).Tüm deneyler ilgili kurallara ve düzenlemelere uygun olarak yapıldı ve çalışma, Hayvan Araştırmaları: İn Vivo Deneylerin Raporlanması (ARRIVE) kurallarına uygun olarak yürütüldü.Sekiz haftalık A/J farelerine ilk olarak trikaprin çözeltisi (100 mg/kg, 0,2 ml) içindeki B(a)P intraperitoneal olarak enjekte edildi.Bir hafta sonra fareler, her grupta 15 fare olacak şekilde kontrol gruplarına ve farklı tedavi gruplarına rastgele bölündü ve günde bir kez sondayla verildi.20 haftalık tedaviden sonra hayvanlar CO2 asfiksisiyle öldürüldü.Akciğerler toplandı ve 24 saat süreyle sabitlendi.Yüzeysel tümörlerin sayısı ve bireysel tümör boyutları, bir diseksiyon mikroskobu altında her akciğer için ölçüldü.Tümör hacmi tahminleri (V), aşağıdaki ifade kullanılarak hesaplandı: V (mm3) = 4/3πr3, burada r, tümör çapıdır.Farelerin akciğerlerindeki tüm tümör hacimlerinin net toplamı, toplam tümör hacmini temsil ediyordu ve her gruptaki ortalama toplam tümör hacmi, tümör yükünü temsil ediyordu.UPLC-MS/MS tespiti için tam kan ve bağırsak örnekleri toplandı ve -80°C'de saklandı.Serum toplandı ve karaciğer ve böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek amacıyla alanin aminotransferaz (ALT) ve serum kreatinin (Cr) seviyelerini analiz etmek için otomatik bir kimya analizörü kullanıldı.
Toplanan numuneler soğuk hava deposundan çıkarıldı, çözüldü, tartıldı ve yukarıda anlatıldığı gibi tüplere yerleştirildi.Buna 0,8 ml metanol çözeltisi içindeki 0,5 uM florizin (dahili standart) ilave edildi.Doku daha sonra Tissue-Tearor kullanılarak homojenleştirildi ve homojenat daha sonra 1.5 ml'lik bir mikrosantrifüj tüpüne aktarıldı.Karışım 15500 rpm'de 15 dakika santrifüj edildi.1,0 ml süpernatantı çıkardıktan sonra nitrojenle kurutun.Geri kazanım için iki yüz mikrolitre metanol kullanıldı.Kan tek bir hatta toplanır ve işlenir ve tüm ölçümler için referans olarak kullanılır.
24 oyuklu Transwell plakaları, verapamil ilavesiyle G-Rg3 taşınmasının potansiyel artışını değerlendirmek için oyuk başına 1,0 x 105 Caco-2 hücresi ekildi.3 haftalık kültürden sonra hücreler HBSS ile yıkandı ve 37°C'de ön inkübasyona tabi tutuldu.Tek katmanın bazolateral veya apikal tarafına 400 μL 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s veya 50 veya 100 μM verapamil içeren bir karışım) enjekte edildi ve diğerine 600 μL HBSS çözeltisi eklendi. taraf.Belirlenen zamanlarda (0, 15, 30, 45, 60, 90 ve 120 dakika) 100 µl kültür ortamı toplayın ve bu hacmi oluşturmak için 100 µl HBSS ekleyin.Numuneler UPLC-MS/MS ile tespit edilene kadar -4 °C'de saklandı.Papp = dQ/(dT × A × C0) ifadesi, görünen tek yönlü apikal ve bazolateral geçirgenliği (sırasıyla Pa-b ve Pb-a) ölçmek için kullanılır;dQ/dT konsantrasyondaki değişimdir, A (0,6 cm2) tek tabakanın yüzey alanıdır ve C0 başlangıç donör konsantrasyonudur.Akış oranı, çalışma ilacının akış hızını temsil eden Pb-a/Pa-b olarak hesaplanır.
Erkek Wistar sıçanları 24 saat boyunca aç bırakıldı, sadece su içti ve intravenöz %3,5 pentobarbital solüsyon enjeksiyonu ile anestezi uygulandı.Entübe edilmiş silikon tüp, giriş olarak duodenumun ucuna ve çıkış olarak ileumun ucuna sahiptir.Girişi izotonik HBSS'de 10 μM G-Rg3r veya G-Rg3s ile 0,1 ml/dk akış hızında pompalamak için peristaltik bir pompa kullanın.Verapamilin etkisi, 10 μM G-Rg3r veya G-Rg3s'ye 50 μM veya 100 μM bileşik eklenerek değerlendirildi.UPLC-MS/MS, perfüzyonun başlamasından 60, 90, 120 ve 150 dakika sonra zaman noktalarında toplanan perfüzyon ekstraktları üzerinde gerçekleştirildi.Emilim yüzdesi, emilim yüzdesi = (1 – Cout/Cin) × %100 formülüyle ölçülür;çıkış ve girişteki G-Rg3 konsantrasyonu sırasıyla Cout ve Cin ile ifade edilir.
hEL hücreleri, oyuk başına 1 x 104 hücre yoğunluğunda 96 oyuklu plakalara ekildi ve DMSO içinde çözünmüş B(a)P (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) veya G-Rg3 ile işlendi. .İlaçlar daha sonra kültür ortamıyla 48 saat boyunca çeşitli konsantrasyonlara (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) seyreltildi.Ticari olarak temin edilebilen bir MTS tahlil kiti kullanılarak hücreler standart bir protokole tabi tutuldu ve daha sonra 490 nm'de bir mikroplaka okuyucu kullanılarak ölçüldü.B(a)P (10 μM) ve G-Rg3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) ile birlikte tedavi edilen grupların hücre canlılığı düzeyi, yukarıdaki yönteme göre değerlendirildi ve tedavi edilmeyen grupla karşılaştırıldı.
hEL hücreleri, 1 x 105 hücre/oyuk yoğunluğunda 6 oyuklu plakalara ekildi ve 10 μM G-Rg3 varlığında veya yokluğunda 10 μMB(a)P ile işlendi.48 saatlik tedaviden sonra, üreticinin protokolüne göre QIAamp DNA Mini Kiti kullanılarak hEL hücrelerinden DNA ekstrakte edildi.BPDE-DNA eklentilerinin oluşumu, bir BPDE-DNA eklenti ELISA kiti kullanılarak tespit edildi.BPDE-DNA eklentisinin nispi seviyeleri, 450 nm'de absorbans ölçülerek bir mikroplaka okuyucu kullanılarak ölçüldü.
hEL hücreleri, oyuk başına 1 x 104 hücre yoğunluğunda 96 oyuklu plakalara ekildi ve 48 saat boyunca 10 μM G-Rg3 yokluğunda veya varlığında 10 μMB(a)P ile işlendi.GST aktivitesi, üreticinin protokolüne göre ticari bir GST aktivite tahlil kiti kullanılarak ölçüldü.Bağıl GST aktivasyonu, bir mikroplaka okuyucu kullanılarak 450 nm'de absorbansla ölçüldü.
hEL hücreleri buz soğukluğunda PBS ile yıkandı ve daha sonra proteaz inhibitörleri ve fosfataz inhibitörleri içeren radyoimmünopresipitasyon tahlil tamponu kullanılarak parçalandı.Toplam protein tahlil kiti kullanılarak protein miktarının belirlenmesinden sonra, her numunedeki 30 ug protein, %12 SDS-PAGE ile ayrıldı ve elektroforez yoluyla bir PVDF membranına aktarıldı.Membranlar %5 yağsız süt ile bloke edildi ve primer antikorlarla gece boyunca 4°C'de inkübe edildi.Yaban turpu peroksidaz konjuge ikincil antikorlarla inkübasyondan sonra, bağlanma sinyalini görselleştirmek için geliştirilmiş kemilüminesans reaktifleri eklendi.Her protein bandının yoğunluğu ImageJ yazılımı kullanılarak ölçüldü.
Ortalama ± standart sapma olarak ifade edilen tüm verileri analiz etmek için GraphPad Prism 7.0 yazılımı kullanıldı.Tedavi grupları arasındaki varyasyon, Öğrenci t testi veya tek yönlü varyans analizi kullanılarak değerlendirildi; P değeri <0.05, istatistiksel anlamlılığı gösterir.
Bu çalışma sırasında elde edilen veya analiz edilen tüm veriler, yayınlanan bu makaleye ve ek bilgi dosyalarına dahil edilmiştir.
Torre, LA, Siegel, RL ve Jemal, A. Akciğer kanseri istatistikleri.zarf.Günü geçmiş.ilaç.Biyoloji.893, 1–19 (2016).
Hecht, S. Tütün kanserojenleri, biyobelirteçleri ve tütüne bağlı kanser.Nat.Kanser papazı.3, 733–744 (2003).
Phillips, DH ve Venitt, S. DNA ve tütün dumanına maruz kalma sonucu insan dokularındaki protein katkı maddeleri.uluslararasılık.J. Kanser.131, 2733–2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA ve Yu M. Houttuynia cordata ve silibininin A/J farelerinde benzo(a)piren kaynaklı akciğer tümörü oluşumu üzerindeki etkisi.Kanser 7, 1053–1057 (2005).
Tang, W. ve ark.Çin tıbbi malzemelerinden izole edilen antikanser doğal ürünü.çene.ilaç.6, 27 (2011).
Yang, Y. ve ark.A/J farelerinde polifenon E, kırmızı ginseng ve rapamisinin benzo(a)piren kaynaklı akciğer tümörü oluşumu üzerindeki etkinliği.Kanser 8, 52–58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS ve Yuan, KS Red, kanser terapisine katılım.çene.J. Nutt.ilaç.14, 7–16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS ve Gao, L. Amerikan ginsenginin köklerinde ve yapraklarında Ginsenosidler.J. Agric.Gıda Kimyası.44, 717–720 (1996).
Attele AS, Wu JA ve Yuan KS Ginseng Farmakolojisi: birçok bileşen ve birçok etki.biyokimya.farmakoloji.58, 1685–1693 (1999).
Gönderim zamanı: 17 Eylül 2023