דאנק איר פֿאַר באזוכן Nature.com.די ווערסיע פון דעם בלעטערער איר נוצן האט לימיטעד CSS שטיצן.פֿאַר בעסטער רעזולטאַטן, מיר רעקאָמענדירן צו נוצן אַ נייַער ווערסיע פון דיין בלעטערער (אָדער קער אַוועק קאַמפּאַטאַבילאַטי מאָדע אין Internet Explorer).אין דער דערווייל, צו ענשור אָנגאָינג שטיצן, מיר ווייַזן דעם פּלאַץ אָן סטילינג אָדער דזשאַוואַסקריפּט.
רויט דזשינסענג איז געניצט אין טראדיציאנעלן אַסיאַן מעדיצין פֿאַר הונדערטער פון יאָרן.אין דעם לערנען, מיר עוואַלואַטעד די פיייקייט פון פיר טייפּס פון רויט דזשינסענג (כינעזיש רויט דזשינסענג, קאָרעיִש רויט דזשינסענג א, קאָרעיִש רויט דזשינסענג ב, און קאָרעיִש רויט דזשינסענג C) דערוואַקסן אין פאַרשידענע מקומות צו ינכיבאַט די פאָרמירונג און וווּקס פון קאַרסאַנאָודזשאַן-ינדוסט לונג. טומאָרס.א בענזאָ (אַ) פּירענע (ב (אַ) פּ) פּראָבע איז געווען געפירט אויף א / דזש מיסע, און קאָרעיִש רויט דזשינסענג ב איז געפונען צו זיין די מערסט עפעקטיוו אין רידוסינג אָנוווקס מאַסע צווישן די פיר רויט דזשינסענג ווערייאַטיז.אין אַדישאַן, מיר אַנאַלייזד די אינהאַלט פון פאַרשידן דזשינסענאָסידעס (רג1, רע, רק, רב2, רב3, רב1, רה1, רד, רג3, רה2, פ1, רק1 און רג5) אין פיר רויט דזשינסענג עקסטראַקץ און געפונען אַז קאָרעיִש רויט דזשינסענג ב האט די מערסט הויך לעוועלס פון גינסענאָסידע רג 3 (ג-רג 3), סאַגדזשעסטינג אַז ג-רג 3 קען שפּילן אַ וויכטיק ראָלע אין זייַן טעראַפּיוטיק עפיקאַסי.די אַרבעט ווייזט אַז G-Rg3 האט לעפיערעך נידעריק ביאָאַוואַילאַביליטי.אָבער, ווען G-Rg3 איז געווען קאָאַדמינאַסטעד מיט די פּ-גפּ ינכיבאַטער וועראַפּאַמיל, די עפלוקס פון G-Rg3 אין קאַקאָ-2 סעלז איז דיקריסט, די קורס פון ינטעסטאַנאַל אַבזאָרפּשאַן פון G-Rg3 איז געוואקסן אין אַ שטשור מאָדעל, און G-Rg3 איז געוואקסן.אין קאַקאָ-2 סעלז, די אַוטפלאָו פון Rg3 דיקריסאַז, און די מדרגה פון Rg3 קאַנסאַנטריישאַן דיקריסאַז.G-Rg3 איז געוואקסן אין די קישקע און פּלאַזמע, און זיין פיייקייט צו פאַרמייַדן טומאָרס איז אויך ימפּרוווד אין אַ שטשור מאָדעל פון ב (אַ) פּ-ינדוסט טומאָריגענעסיס.מיר אויך געפֿונען אַז G-Rg3 רידוסט B (a) P-ינדוסט סיטאָאָקסיסיטי און דנאַ אַדדוק פאָרמירונג אין מענטשלעך לונג סעלז, און געזונט די אויסדרוק און טעטיקייט פון פאַסע וו ענזימעס דורך די Nrf2 פּאַטוויי, וואָס קען זיין שייַכות צו די פּאָטענציעל מעקאַניזאַם פון קאַמף. פון ג ינאַבישאַן -רג3..וועגן די פּאַסירונג פון לונג טומאָרס.אונדזער לערנען דעמאַנסטרייץ אַ פּאַטענטשאַלי וויכטיק ראָלע פֿאַר G-Rg3 אין טאַרגאַטינג לונג טומאָרס אין מויז מאָדעלס.די מויל ביאָאַוואַילאַביליטי פון דעם גינסענאָסידע איז ימפּרוווד דורך טאַרגאַטינג פּ-גלייקאָפּרוטין, אַלאַוינג די מאַלאַקיול צו האָבן אַנטיקאַנסער יפעקץ.
די מערסט פּראָסט טיפּ פון לונג ראַק איז ניט-קליין צעל לונג ראַק (NSCLC), וואָס איז איינער פון די לידינג סיבות פון ראַק דעטס אין טשיינאַ און צפון אַמעריקע1,2.דער הויפּט פאַקטאָר וואָס ינקריסאַז די ריזיקירן פון דעוועלאָפּינג ניט-קליין צעל לונג ראַק איז סמאָוקינג.פּאַפּיראָס רויך כּולל מער ווי 60 קאַרסינאַדזשאַנז, אַרייַנגערעכנט בענזאָ (אַ) פּירענע (ב (אַ) פּ), ניטראָסאַמינעס, און ראַדיאָאַקטיוו יסאָטאָפּעס פון די פאַרפוילן פון ראַדאָן. רויך.ביי ויסשטעלן צו ב (אַ) פּ, סיטאָטשראָמע פּ450 קאַנווערץ עס צו ב (אַ) פּ-7,8-דיהידראָדיאָל-9,10-עפּאָקסידע (בדע), וואָס ריאַקץ מיט דנאַ צו פאָרעם בפּדע-דנאַ אַדדוקט 4. אַדדיטיאָנאַללי, די אַדדוקץ ינדוסירן לונג טומאָריגענעסיס אין מיסע מיט אָנוווקס בינע און היסטאָפּאַטהאָלאָגי ענלעך צו מענטשלעך לונג טומאָרס5.דעם שטריך מאכט די ב (אַ) פּ-ינדוסט לונג ראַק מאָדעל אַ פּאַסיק סיסטעם פֿאַר יוואַליוייטינג קאַמפּאַונדז מיט מעגלעך אַנטיקאַנסער פּראָפּערטיעס.
איינער מעגלעך סטראַטעגיע צו פאַרמייַדן די אַנטוויקלונג פון לונג ראַק אין הויך-ריזיקירן גרופּעס, ספּעציעל סמאָוקערז, איז די נוצן פון טשעמאָפּרעווענטיווע אגענטן צו פאַרשטיקן די אַנטוויקלונג פון ינטראַעפּיטהעליאַל נעאָפּלאַסטיק ליזשאַנז און דערמיט פאַרמייַדן זייער סאַבסאַקוואַנט פּראַגרעשאַן צו מאַליגנאַנסי.כייַע שטודיום ווייַזן אַז פאַרשידן טשעמאָפּרעווענטיווע אגענטן זענען עפעקטיוו 6.אונדזער פריערדיקן באַריכט 7 כיילייטיד די גוט פאַרהיטנדיק יפעקץ פון רויט דזשינסענג אויף לונג ראַק.דעם קרייַטעכץ איז געניצט פֿאַר סענטשעריז אין טראדיציאנעלן אַסיאַן מעדיצין צו פאַרלענגערן לעבן און געזונט, און איז דאַקיומענטאַד צו האָבן אַנטיטומאָר יפעקץ 8.
די אַקטיוו פאַקטאָר פון דזשינסענג איז דזשינסענאָסידע, וואָס איז געניצט ווי אַ קאָמפּאָסיטע מאַרקער צו אָפּשאַצן די קוואַליטעט פון דזשינסענג אויסצוגן.קוואַנטיטאַטיווע אַנאַליסיס פון גראָב דזשינסענג עקסטראַקץ טיפּיקלי ינוואַלווז די נוצן פון עטלעכע גינסענאָסידעס, אַרייַנגערעכנט RK1, Rg1, F1, Re, Rb1, Rb2, Rb3, Rd, Rh1, Rh2, Rg3, Rg5 און Rc9,10.גינסענאָסידעס האָבן קליין קליניש נוצן רעכט צו זייער נעבעך מויל ביאָאַוואַילאַביליטי11.כאָטש די מעקאַניזאַם פֿאַר דעם נעבעך ביאָאַוואַילאַביליטי איז נישט קלאָר, די עפפלוקס פון גינסענאָסידעס געפֿירט דורך פּ-גלייקאָפּרוטין (פּ-גפּ) 12 קען זיין די סיבה.פּ-גפּ איז איינער פון די מערסט וויכטיק עפפלוקס טראַנספּאָרטערס אין די סופּערפאַמילי פון אַטפּ-ביינדינג קאַסעט טראַנספּאָרטער, וואָס ניצט די ענערגיע פון אַטפּ כיידראַלאַסאַס צו באַפרייַען ינטראַסעללולאַר סאַבסטאַנסיז אין די פונדרויסנדיק סוויווע.פּ-גפּ טראַנספּאָרטערס זענען טיפּיקלי וויידלי פונאנדערגעטיילט אין די קישקע, ניר, לעבער און בלוט-מאַרך באַריער13.פּ-גפּ פיעסעס אַ קריטיש ראָלע אין ינטעסטאַנאַל אַבזאָרפּשאַן, און ינאַבישאַן פון פּ-גפּ ינקריסאַז די מויל אַבזאָרפּשאַן און אַוויילאַבילאַטי פון עטלעכע אַנטיקאַנסער דרוגס12,14.ביישפילן פון ינכיבאַטערז ביז אַהער געניצט אין דער ליטעראַטור זענען וועראַפּאַמיל און סיקלאָספּאָרינע אַ15.די אַרבעט ינוואַלווז גרינדן אַ מויז סיסטעם פֿאַר לערנען ב (אַ) פּ-ינדוסט לונג ראַק צו אָפּשאַצן די פיייקייט פון פאַרשידענע רויט דזשינסענג עקסטראַקץ פון טשיינאַ און קארעע צו ווירקן מאַליגנאַנסיז.די עקסטראַקץ זענען ינדיווידזשואַלי אַנאַלייזד צו ידענטיפיצירן ספּעציפיש גינסענאָסידעס וואָס קען ווירקן קאַרסינאַדזשאַנז.וועראַפּאַמיל איז דעמאָלט געניצט צו ציל פּ-גפּ און פֿאַרבעסערן די מויל ביאָאַוואַילאַביליטי און טעראַפּיוטיק עפיקאַסי פון ראַק-טאַרגאַטינג גינסענאָסידעס.
דער מעקאַניזאַם דורך וואָס דזשינסענג סאַפּאָנינס יגזערט טעראַפּיוטיק יפעקץ אויף קאַרסינאַדזשענעסיס בלייבט ומקלאָר.פאָרשונג האט געוויזן אַז פאַרשידן גינסענאָסידעס קענען רעדוצירן דנאַ שעדיקן געפֿירט דורך קאַרסינאַדזשאַנז דורך רידוסינג אָקסידאַטיווע דרוק און אַקטאַווייטינג פאַסע וו דיטאַקסיפיקיישאַן ענזימעס, דערמיט פּרעווענטינג צעל שעדיקן.גלוטאַטהיאָנע S-טראַנספעראַסע (GST) איז אַ טיפּיש פאַסע וו ענזיים וואָס איז פארלאנגט צו רעדוצירן דנאַ שעדיקן געפֿירט דורך קאַרסינאַדזשאַנז17.יאָדער עריטהראָיד 2-פֿאַרבונדענע פאַקטאָר 2 (Nrf2) איז אַ וויכטיק טראַנסקריפּציע פאַקטאָר וואָס רעגיאַלייץ רעדאָקס כאָומאָסטאַסיס און אַקטאַווייץ די אויסדרוק פון פאַסע וו ענזימעס און סיטאָפּראָטעקטיוו אַנטיאַקסאַדאַנט רעספּאָנסעס18.אונדזער לערנען אויך יגזאַמאַנד די יפעקץ פון יידענאַפייד גינסענאָסידעס אויף רידוסינג B (a) P-ינדוסט סיטאָאָקסיסיטי און BPDE-DNA אַדדוקט פאָרמירונג, ווי געזונט ווי ינדוסינג פאַסע וו ענזימעס דורך מאַדזשאַלייטינג די Nrf2 פּאַטוויי אין נאָרמאַל לונג סעלז.
די פאַרלייגן פון אַ מויז מאָדעל פון ב (אַ) פּ-ינדוסט ראַק איז קאָנסיסטענט מיט די פריערדיקע אַרבעט5.פיגור 1A ווייזט די יקספּערמענאַל פּלאַן פון אַ 20-וואָך באַהאַנדלונג פון אַ מויז ראַק מאָדעל ינדוסט דורך ב (אַ) פּ, וואַסער (קאָנטראָל), כינעזיש רויט דזשינסענג עקסטראַקט (CRG), קאָרעיִש רויט דזשינסענג עקסטראַקט א (KRGA) און קאָרעיִש רויט. דזשינסענג.עקסטראַקט ב (KRGB) און קאָרעיִש רויט דזשינסענג עקסטראַקט C (KRGC).נאָך 20 וואָכן פון רויט דזשינסענג באַהאַנדלונג, מיסע זענען מקריב געווען דורך CO2 אַספיקשאַן.פיגורע 1 ב ווייזט מאַקראָסקאָפּיק לונג טומאָרס אין אַנימאַלס באהאנדלט מיט פאַרשידענע טייפּס פון רויט דזשינסענג, און פיגורע 1 ק ווייזט אַ רעפּריזענאַטיוו ליכט מיקראָגראַף פון אַ אָנוווקס מוסטער.די אָנוווקס מאַסע פון קרגב-באהאנדלט אַנימאַלס (1.5 ± 0.35) איז געווען נידעריקער ווי אַז פון קאָנטראָל אַנימאַלס (0.82 ± 0.2, פּ <0.05), ווי געוויזן אין פיגורע 1 ד.די דורכשניטלעך גראַד פון ינאַבישאַן פון אָנוווקס מאַסע איז געווען 45%.אנדערע רויט דזשינסענג עקסטראַקץ טעסטעד האט נישט ווייַזן אַזאַ באַטייַטיק ענדערונגען אין אָנוווקס מאַסע (פּ> 0.05).קיין קלאָר ווי דער טאָג זייַט יפעקס זענען באמערקט אין די מויז מאָדעל בעשאַס 20 וואָכן פון רויט דזשינסענג באַהאַנדלונג, אַרייַנגערעכנט קיין ענדערונג אין גוף וואָג (דאַטן ניט געוויזן) און קיין לעבער אָדער ניר טאַקסיסאַטי (פיגורע 1E,F).
רויט דזשינסענג עקסטראַקט טריץ לונג אָנוווקס אַנטוויקלונג אין א / דזש מיסע.(א) עקספּערימענטאַל פּלאַן.(ב) גרויס לונג טומאָרס אין אַ מויז מאָדעל.טומאָרס זענען אנגעוויזן דורך אַראָוז.אַ: כינעזיש רויט גינסענג גרופּע.ב: גרופּע א פון קאָרעיִש רויט דזשינסענג.C: קאָרעיִש רויט דזשינסענג גרופּע בי ד: קאָרעיִש רויט דזשינסענג גרופּע C. די: קאָנטראָל גרופּע.(C) ליכט מיקראָגראַף ווייזונג אַ לונג אָנוווקס.מאַגניפיקאַטיאָן: 100. ב: 400. (ד) טומאָר מאַסע אין די רויט דזשינסענג עקסטראַקט גרופּע.(E) פּלאַזמע לעוועלס פון די לעבער ענזיים ALT.(F) פּלאַזמע לעוועלס פון די רענאַל ענזיים קר.דאַטן זענען אויסגעדריקט ווי מיינען ± נאָרמאַל דיווייישאַן.*P <0.05.
די רויט דזשינסענג עקסטראַקץ יידענאַפייד אין דעם לערנען זענען אַנאַלייזד דורך הינטער-פאָרשטעלונג פליסיק קראָומאַטאַגראַפי טאַנדאַם מאַסע ספּעקטראָמעטרי (UPLC-MS/MS) צו קוואַנטיפיצירן די פאלגענדע דזשינסענאָסידעס: Rg1, Re, Rc, Rb2, Rb3, Rb1, Rh1, Rd, Rg3, Rh2, F1, Rk1 און Rg5.די UPLC און MS טנאָים געניצט צו מעסטן די אַנאַליטעס זענען דיסקרייבד אין אַ פריערדיקן באַריכט19.UPLC-MS / MS טשראָמאַטאַגראַמז פון פיר רויט דזשינסענג עקסטראַקץ זענען געוויזן אין פיגורע 2A.עס זענען געווען באַטייַטיק דיפעראַנסיז אין גאַנץ גינסענאָסידע אינהאַלט, מיט די העכסטן גאַנץ גינסענאָסידע אינהאַלט אין CRG (590.27 ± 41.28 μמאָל / ל) (פיגורע 2 ב).ווען עוואַלואַטינג יחיד דזשינסענאָסידעס (פיגורע 2C), קרגב געוויזן די העכסטן שטאַפּל פון G-Rg3 קאַמפּערד מיט אנדערע גינסענאָסידעס (58.33 ± 3.81 μמאָל / ל פֿאַר G-Rg3s און 41.56 ± 2.88 μמאָל / ל פֿאַר G-Rg3r).L).רויט דזשינסענג טיפּ (פּ <0.001).ג-רגקסנומקס אַקערז ווי אַ פּאָר פון סטערעאָיסאָמערז ג-רגקסנומקסר און ג-רגקסנומקסס, וואָס אַנדערש זייַן אין די שטעלע פון די הידראָקסיל גרופּע ביי טשאַד קסנומקס (Fig. קסנומקסד).די רעזולטאַטן אָנווייַזן אַז G-Rg3r אָדער G-Rg3 קען האָבן וויכטיק אַנטיקאַנסער פּאָטענציעל אין אַ B (a) P-ינדוסט ראַק מויז מאָדעל.
אינהאַלט פון גינסענאָסידעס אין פאַרשידן רויט דזשינסענג עקסטראַקץ.(א) UPLC-MS / MS טשראָמאַטאַגראַמז פון פיר רויט דזשינסענג עקסטראַקץ.(ב) אָפּשאַצונג פון גאַנץ גינסענאָסידע אינהאַלט אין די אנגעוויזן אויסצוגן.(C) דיטעקשאַן פון יחיד גינסענאָסידעס אין לייבאַלד אויסצוגן.(ד) סטראַקטשערז פון גינסענאָסידע סטערעאָיסאָמערז G-Rg3r און G-Rg3s.דאַטן זענען אויסגעדריקט ווי די דורכשניטלעך ± נאָרמאַל דיווייישאַן פון טריפּליקאַט דיטערמאַניישאַנז.***P <0.001.
די UPLC-MS / MS לערנען פארלאנגט די קוואַנטאַפאַקיישאַן פון גינסענאָסידעס אין ינטעסטאַנאַל און בלוט סאַמפּאַלז נאָך 20 וואָכן פון באַהאַנדלונג.באַהאַנדלונג מיט קרגב געוויזן די בייַזייַן פון בלויז 0.0063 ± 0.0005 μג / מל Rg5 אין די בלוט.קיין רוען גינסענאָסידעס זענען דיטעקטאַד, וואָס ינדיקייץ נעבעך מויל ביאָאַוואַילאַביליטי און דעריבער רידוסט ויסשטעלן צו די גינסענאָסידעס.
די צווייפּינטל אַדענאָקאַרזינאָמאַ צעל ליניע קאַקאָ-2 איז מאָרפאָלאָגיקאַללי און בייאָוקעמאַקלי ענלעך צו מענטשלעך ינטעסטאַנאַל עפּיטעליאַל סעלז, דעמאַנסטרייטינג זייַן נוצן אין אַססעססינג ענטעראָסיטע אַריבערפירן אַריבער די ינטעסטאַנאַל עפּיטעליאַל שלאַבאַן.דעם אַנאַליסיס איז באזירט אויף אַ פריער לערנען קסנומקס.פיגיערז 3A,B,C,D,E,F ווייַזן רעפּריזענאַטיוו בילדער פון טראַנססעללולאַר אַריבערפירן פון G-Rg3r און G-Rg3 ניצן אַ קאַקאָ-2 מאָנאָלייַער מאָדעל.טראַנססעללולאַר אַריבערפירן פון G-Rg3r אָדער G-Rg3 אַריבער קאַקאָ-2 מאָנאָלייַערס פון די באַסאַלאַטעראַל צו אַפּיקאַל זייַט (פּב-אַ) איז געווען באטייטיק העכער ווי פֿון די אַפּיקאַל צו באַסאַלאַטעראַל זייַט (פּאַ-ב).פֿאַר G-Rg3r, די דורכשניטלעך פּאַ-ב ווערט איז געווען 0.38 ± 0.06, וואָס געוואקסן צו 0.73 ± 0.06 נאָך באַהאַנדלונג מיט 50 μמאָל / ל וועראַפּאַמיל און צו 1.14 ± 0.09 נאָך באַהאַנדלונג מיט 100 μמאָל / ל וועראַפּאַמיל (פּ <0.01 און 0.01 ריספּעקטיוולי; פיגורע 2).3 א).אַבזערוויישאַנז פֿאַר G-Rg3 נאכגעגאנגען אַ ענלעך מוסטער (Fig. 3B), און די רעזולטאַטן געוויזן אַז וועראַפּאַמיל באַהאַנדלונג ענכאַנסט די אַריבערפירן פון G-Rg3r און G-Rg3.וועראַפּאַמיל באַהאַנדלונג אויך ריזאַלטיד אין אַ באַטייטיק פאַרקלענערן אין די דורכשניטלעך Pb-a און G-Rg3r און G-Rg3s עפפלוקס ריישיאָוז (פיגורע 3C,D,E,F), וואָס ינדיקייץ אַז וועראַפּאַמיל באַהאַנדלונג ראַדוסאַז גינסענאָסידע אינהאַלט אין קאַקאָ-2 עפפלוקס סעלז..
טראַנססעללולאַר אַריבערפירן פון G-Rg3 אין קאַקאָ-2 מאָנאָלייַערס און ינטעסטאַנאַל אַבזאָרפּשאַן אין אַ שטשור פּערפוסיאָן אַסייַ.(א) פּאַ-ב ווערט פון ג-רג3ר גרופּע אין קאַקאָ-2 מאָנאָלייַער.(ב) פּאַ-ב ווערט פון G-Rg3s גרופּעס אין קאַקאָ-2 מאָנאָלייַער.(C) פּב ווערט פון ג-רג3ר גרופּע אין קאַקאָ-2 מאָנאָלייַער.(ד) פּב ווערט פון G-Rg3s גרופּעס אין קאַקאָ-2 מאָנאָלייַער.(E) טראָגן פאַרהעלטעניש פון G-Rg3r גרופּעס אין אַ קאַקאָ-2 מאָנאָלייַער.(F) טראָגן פאַרהעלטעניש פון G-Rg3 גרופּעס אין אַ קאַקאָ-2 מאָנאָלייַער.(ג) פּראָצענט פון ינטעסטאַנאַל אַבזאָרפּשאַן פון G-Rg3r אין אַ פּערפוסיאָן אַססייַ אין ראַץ.(ה) פּראָצענט פון ינטעסטאַנאַל אַבזאָרפּשאַן פון G-Rg3 אין אַ פּערפוסיאָן אַססייַ אין ראַץ.לעדוירעס און אַבזאָרפּשאַן זענען קאַמפּערד אָן די אַדישאַן פון וועראַפּאַמיל.דאַטן זענען אויסגעדריקט ווי די דורכשניטלעך ± נאָרמאַל דיווייישאַן פון פינף פרייַ יקספּעראַמאַנץ.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
קאָנסיסטענט מיט פריער אַרבעט 20, אָרטאָטאָפּיק ינטעסטאַנאַל פּערפוסיאָן פון ראַץ איז דורכגעקאָכט צו באַשליסן צי G-Rg3 אַבזאָרפּשאַן אין די קישקע ינקריסיז נאָך וועראַפּאַמיל באַהאַנדלונג.פיגיערז 3G,H ווייַזן רעפּריזענאַטיוו פּערפוסיאָן אַססעס צו אָפּשאַצן די פּראָצענט פון ינטעסטאַנאַל אַבזאָרפּשאַן פון G-Rg3r און G-Rg3 אין ראַק מאָדעל ראַץ בעשאַס די אויבן צייט פּיריאַדז.דער ערשט פּראָצענט פון שוואַך G-Rg3r אַפּטייק פון בעערעך 10% געוואקסן צו מער ווי 20% נאָך באַהאַנדלונג מיט 50 μM וועראַפּאַמיל און צו מער ווי 25% נאָך באַהאַנדלונג מיט 100 μM וועראַפּאַמיל.פּונקט אַזוי, G-Rg3, וואָס האט אַן ערשט אַפּטייק פון 10%, אויך געוויזן אַ שפּיץ פון איבער 20% נאָך באַהאַנדלונג מיט 50 μM וועראַפּאַמיל און קימאַט 30% נאָך באַהאַנדלונג מיט 100 μM וועראַפּאַמיל, סאַגדזשעסטינג אַז ינאַבישאַן פון פּ-גפּ דורך וועראַפּאַמיל ימפּרוווז ינטעסטאַנאַל ג-אַבזאָרפּשאַן Rg3 אין אַ מויז מאָדעל פון לונג ראַק.
לויט די אויבן אופֿן, ב (אַ) פּ-ינדוסט ראַק מאָדעל מיסע זענען ראַנדאַמלי צעטיילט אין זעקס גרופּעס, ווי געוויזן אין פיגורע 4 אַ.קיין באַטייטיק וואָג אָנווער אָדער קליניש וואונדער פון טאַקסיסאַטי זענען באמערקט אין די G-Rg3 באַהאַנדלונג גרופּע קאַמפּערד מיט די קאָנטראָל גרופּע (דאַטן ניט געוויזן).נאָך 20 וואָכן פון באַהאַנדלונג, די לונגען פון יעדער מויז זענען געזאמלט.פיגורע 4 ב ווייזט מאַקראָסקאָפּיק לונג טומאָרס אין מיסע אין די אויבן באַהאַנדלונג גרופּעס, און פיגורע 4 ק ווייזט אַ רעפּריזענאַטיוו ליכט מיקראָגראַף פון אַ רעפּריזענאַטיוו אָנוווקס.וועגן די אָנוווקס מאַסע אין יעדער גרופּע (Fig. 4D), די וואַלועס פֿאַר מיסע באהאנדלט מיט G-Rg3r און G-Rg3s זענען ריספּעקטיוולי 0.75 ± 0.29 mm3 און 0.81 ± 0.30 mm3, בשעת די וואַלועס פֿאַר G Mice באהאנדלט. מיט -רג3ס זענען 1.63 ריספּעקטיוולי ± 0.40 ממ3.קאָנטראָל מיסע (פּ <0.001), ינדאַקייטינג אַז G-Rg3 באַהאַנדלונג רידוסט אָנוווקס מאַסע אין מיסע.אַדמיניסטראַטיאָן פון וועראַפּאַמיל ווייַטער ענכאַנסט דעם רעדוקציע: וואַלועס אין וועראַפּאַמיל+ ג-רג3ר מיסע דיקריסט פון 0.75 ± 0.29 ממ3 צו 0.33 ± 0.25 ממ3 (פּ <0.01), און וואַלועס פֿאַר וועראַפּאַמיל + פון 0.81 ± 0.30.30.2 291 ± 0.2 דיקריסט צו 0.01 mm3 אין G.-Rg3s-באהאנדלט מיסע (פּ <0.05), ינדאַקייטינג אַז וועראַפּאַמיל קען פאַרבעסערן די ינכיבאַטערי ווירקונג פון G-Rg3 אויף טומאָריגענעסיס.טומאָר מאַסע געוויזן קיין באַטייַטיק דיפעראַנסיז צווישן די קאָנטראָל גרופּע און די וועראַפּאַמיל גרופּע, די G-Rg3r גרופּע און די G-Rg3s גרופּע, און די וועראַפּאַמיל + ג-רג3ר גרופּע און די וועראַפּאַמיל + ג-רג3ס גרופּע.דערצו, עס זענען קיין באַטייַטיק לעבער אָדער ניר טאַקסיסאַטיז פֿאַרבונדן מיט די עוואַלואַטעד טריטמאַנץ (פיגורע 4E,F).
טומאָר מאַסע נאָך G-Rg3 באַהאַנדלונג און פּלאַזמע אָדער ינטעסטאַנאַל G-Rg3r און G-Rg3 לעוועלס אין די אנגעוויזן גרופּעס.(א) עקספּערימענטאַל פּלאַן.(ב) מאַקראָסקאָפּיק טומאָרס אין אַ מויז מאָדעל.טומאָרס זענען אנגעוויזן דורך אַראָוז.אַ: ג-רג3ר.ב: ג-רג3ס.c: G-Rg3r אין קאָמבינאַציע מיט וועראַפּאַמיל.ד: G-Rg3 אין קאָמבינאַציע מיט וועראַפּאַמיל.ד: וועראַפּאַמיל.E: קאָנטראָל.(C) אָפּטיש מיקראָגראַף פון די אָנוווקס אין מאַגנאַפאַקיישאַן.ענטפער: 100x.ב: 400X.(ד) ווירקונג פון G-Rg3 + וועראַפּאַמיל באַהאַנדלונג אויף אָנוווקס מאַסע אין א / דזש מיסע.(E) פּלאַזמע לעוועלס פון די לעבער ענזיים ALT.(F) פּלאַזמע לעוועלס פון די רענאַל ענזיים קר.(ג) פּלאַזמע לעוועלס פון G-Rg3r אָדער G-Rg3 פון די אנגעוויזן גרופּעס.(ה) לעוועלס פון G-Rg3r אָדער G-Rg3s אין די געדערעם פון די אנגעוויזן גרופּעס.דאַטן זענען אויסגעדריקט ווי די דורכשניטלעך ± נאָרמאַל דיווייישאַן פון טריפּליקאַט דיטערמאַניישאַנז.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
G-Rg3 לעוועלס אין די B (a) P-ינדוסט ראַק מאָדעל מיסע זענען אַססעססעד דורך UPLC-MS / MS נאָך אַ 20-וואָך באַהאַנדלונג פּעריאָד לויט דעם אופֿן דיסקרייבד אין די מעטהאָדס אָפּטיילונג.פיגיערז 4G און H ווייַזן פּלאַזמע און ינטעסטאַנאַל G-Rg3 לעוועלס ריספּעקטיוולי.פּלאַזמע ג-רג3ר לעוועלס זענען 0.44 ± 0.32 μמאָל / ל און געוואקסן צו 1.17 ± 0.47 μמאָל / ל מיט קאַנקאַמיטאַנט אַדמיניסטראַציע פון וועראַפּאַמיל (פּ <0.001), בשעת ינטעסטאַנאַל ג-רג3ר לעוועלס זענען 0.53 ± 0.08 µג / ל.ווען קאַמביינד מיט וועראַפּאַמיל, ג געוואקסן צו 1.35 ± 0.13 μג / ג (פּ <0.001).פֿאַר G-Rg3, די רעזולטאַטן נאכגעגאנגען אַ ענלעך מוסטער, ינדיקייץ אַז וועראַפּאַמיל באַהאַנדלונג געוואקסן די מויל ביאָאַוואַילאַביליטי פון G-Rg3 אין A / J מיסע.
צעל ווייאַבילאַטי אַסייַ איז געניצט צו אָפּשאַצן די סיטאָטאָקסיסיטי פון B (a) P און G-Rg3 אויף העל סעלז.די סיטאָטאָקסיסיטי ינדוסט דורך ב (אַ) פּ אין העל סעלז איז געוויזן אין פיגורע 5 אַ, בשעת די ניט-טאַקסיק פּראָפּערטיעס פון G-Rg3r און G-Rg3 זענען געוויזן אין Figures 5A און 5B.5B, C. צו אָפּשאַצן די סיטאָפּראָטעקטיוו ווירקונג פון G-Rg3, B (a) P איז קאָ-אַדמינאַסטעד מיט פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז פון G-Rg3r אָדער G-Rg3 אין העל סעלז.ווי געוויזן אין פיגורע 5 ד, G-Rg3r אין קאַנסאַנטריישאַנז פון 5 μM, 10 μM און 20 μM געזונט צעל ווייאַבילאַטי צו 58.3%, 79.3% און 77.3% ריספּעקטיוולי.ענלעכע רעזולטאַטן קענען אויך זיין געזען אין די G-Rg3s גרופּע.ווען די קאַנסאַנטריישאַנז פון G-Rg3s זענען 5 μM, 10 μM און 20 μM, צעל ווייאַבילאַטי איז ריסטאָרד צו 58.3%, 72.7% און 76.7% ריספּעקטיוולי (פיגורע 5E).).די בייַזייַן פון BPDE-DNA אַדדוקץ איז געמאסטן מיט אַן ELISA קיט.אונדזער רעזולטאַטן געוויזן אַז BPDE-DNA אַדדוקט לעוועלס זענען געוואקסן אין די ב (אַ) פּ-באהאנדלט גרופּע קאַמפּערד מיט די קאָנטראָל גרופּע, אָבער קאַמפּערד מיט G-Rg3 קאָ-באַהאַנדלונג, BPDE-DNA אַדדוקט לעוועלס אין די ב (אַ) פּ גרופּע ב אין די באהאנדלט גרופּע, דנאַ אַדדוקט לעוועלס זענען באטייטיק רידוסט.די רעזולטאַטן פון באַהאַנדלונג מיט ב (אַ) פּ אַליין זענען געוויזן אין פיגורע 5F (1.87 ± 0.33 ווס. 3.77 ± 0.42 פֿאַר ג-רג3ר, 1.93 ± 0.48 ווס. 3.77 ± 0.42 פֿאַר ג-רג3ס, פּ <0.001).
צעל ווייאַבילאַטי און BPDE-DNA אַדדוקט פאָרמירונג אין העל סעלז באהאנדלט מיט G-Rg3 און B(a)P.(א) ווייאַבילאַטי פון העל סעלז באהאנדלט מיט ב (אַ) פּ.(ב) ווייאַבילאַטי פון העל סעלז באהאנדלט מיט G-Rg3r.(C) ווייאַבילאַטי פון העל סעלז באהאנדלט מיט G-Rg3.(ד) ווייאַבילאַטי פון העל סעלז באהאנדלט מיט ב (אַ) פּ און ג-רג3ר.(E) ווייאַבילאַטי פון העל סעלז באהאנדלט מיט ב (אַ) פּ און G-Rg3.(F) לעוועלס פון BPDE-DNA אַדדוקט אין העל סעלז באהאנדלט מיט B (a) P און G-Rg3.דאַטן זענען אויסגעדריקט ווי די דורכשניטלעך ± נאָרמאַל דיווייישאַן פון טריפּליקאַט דיטערמאַניישאַנז.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
גסט ענזיים אויסדרוק איז דיטעקטאַד נאָך קאָ-באַהאַנדלונג מיט 10 μM ב (אַ) פּ און 10 μM G-Rg3r אָדער G-Rg3s.אונדזער רעזולטאַטן האָבן געוויזן אַז ב (אַ) פּ סאַפּרעסט גסט אויסדרוק (59.7 ± 8.2% אין די G-Rg3r גרופּע און 39 ± 4.5% אין די G-Rg3s גרופּע), און B (a) P איז געווען פֿאַרבונדן מיט אָדער מיט G-Rg3r , אָדער מיט ג-רג3ר, אָדער מיט ג-רג3ר.קאָ-באַהאַנדלונג מיט G-Rg3s געזונט GST אויסדרוק.גסט אויסדרוק (103.7 ± 15.5% אין די ג-רג3ר גרופּע און 110 ± 11.1% אין די ג-רג3ס גרופּע, פּ <0.05 און פּ <0.001, ריספּעקטיוולי, פייג. 6 אַ, ב, און C).GST טעטיקייט איז אַססעססעד מיט אַן אַקטיוויטעט אַססייַ קיט.אונדזער רעזולטאטן האָבן געוויזן אַז די קאָמבינאַציע באַהאַנדלונג גרופּע האט העכער GST טעטיקייט קאַמפּערד מיט די B (a) P בלויז גרופּע (96.3 ± 6.6% קעגן 35.7 ± 7.8% אין די G-Rg3r גרופּע קעגן 92.3 ± 6.5 אין די G-Rg3r גרופּע ).% ווס 35.7 ± 7.8% אין די G-Rg3s גרופּע, פּ <0.001, פיגורע 6D).
אויסדרוק פון GST און Nrf2 אין העל סעלז באהאנדלט מיט B (a) P און G-Rg3.(א) דיטעקשאַן פון גסט אויסדרוק דורך מערב בלאָטינג.(ב) קוואַנטיטאַטיווע אויסדרוק פון גסט אין העל סעלז באהאנדלט מיט ב (אַ) פּ און ג-רג3ר.(C) קוואַנטיטאַטיווע אויסדרוק פון GST אין העל סעלז באהאנדלט מיט B (a) P און G-Rg3s.(ד) גסט טעטיקייט אין העל סעלז באהאנדלט מיט ב (אַ) פּ און ג-רג3.(E) דיטעקשאַן פון Nrf2 אויסדרוק דורך מערב בלאָטינג.(F) קוואַנטיטאַטיווע אויסדרוק פון Nrf2 אין העל סעלז באהאנדלט מיט B (a) P און G-Rg3r.(ג) קוואַנטיטאַטיווע אויסדרוק פון Nrf2 אין העל סעלז באהאנדלט מיט B (a) P און G-Rg3s.דאַטן זענען אויסגעדריקט ווי די דורכשניטלעך ± נאָרמאַל דיווייישאַן פון טריפּליקאַט דיטערמאַניישאַנז.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
צו דערקלערן די פּאַטווייז ינוואַלווד אין G-Rg3-מעדיאַטעד סאַפּרעשאַן פון ב (אַ) פּ-ינדוסט טומאָריגענעסיס, Nrf2 אויסדרוק איז אַססעססעד דורך מערב בלאָטינג.ווי געוויזן אין פיגיערז 6E,F,G, קאַמפּערד מיט די קאָנטראָל גרופּע, בלויז די מדרגה פון Nrf2 אין די B (a) P באַהאַנדלונג גרופּע איז דיקריסט;אָבער, קאַמפּערד מיט די B (a) P באַהאַנדלונג גרופּע, B (a) Nrf2 לעוועלס אין די PG-Rg3 גרופּע זענען געוואקסן (106 ± 9.5% פֿאַר G-Rg3r קעגן 51.3 ± 6.8%, 117 ± 6. 2% פֿאַר ג-רג3ר קעגן 41 ± 9.8% פֿאַר ג-רג3ס, פּ <0.01).
מיר באשטעטיקט די פאַרהיטנדיק ראָלע פון Nrf2 דורך סאַפּרעסינג Nrf2 אויסדרוק ניצן ספּעציפיש קליין ינטערפירינג רנאַ (סירנאַ).Nrf2 נאַקדאַון איז באשטעטיקט דורך מערב בלאָטינג (Fig. 7A, B).ווי געוויזן אין פיגיערז 7C,D, קאָ-באַהאַנדלונג פון העל סעלז מיט B (a) P און G-Rg3 ריזאַלטיד אין אַ פאַרקלענערן אין די נומער פון BPDE-DNA אַדדוקץ (1.47 ± 0.21) קאַמפּערד מיט באַהאַנדלונג מיט B (a) P אַליין אין די קאָנטראָל סירנאַ גרופּע.) ג-רג3ר איז געווען 4.13 ± 0.49, ג-רג3ס איז געווען 1.8 ± 0.32 און 4.1 ± 0.57, פּ <0.01).אָבער, די ינכיבאַטערי ווירקונג פון G-Rg3 אויף BPDE-DNA פאָרמירונג איז אַבאַלישט דורך Nrf2 נאַקדאַון.אין די siNrf2 גרופּע, עס איז געווען קיין באַטייַטיק חילוק אין BPDE-DNA אַדדוקט פאָרמירונג צווישן ב (אַ) פּ און ג-רג 3 קאָ-באַהאַנדלונג און ב (אַ) פּ באַהאַנדלונג אַליין (3.0 ± 0.21 פֿאַר ג-רג3ר קעגן 3.56 ± 0.32 ).פֿאַר G-Rg3r קעגן 3.6 פֿאַר G-Rg3s קעגן ±0.45 קעגן 4.0±0.37, פּ>0.05).
ווירקונג פון Nrf2 נאַקדאַון אויף BPDE-DNA אַדדוקט פאָרמירונג אין העל סעלז.(א) Nrf2 נאַקדאַון איז באשטעטיקט דורך מערב בלאָטינג.(ב) קוואַנטיפיקאַטיאָן פון Nrf2 באַנד ינטענסיטי.(C) ווירקונג פון Nrf2 נאַקדאַון אויף BPDE-DNA אַדדוקט לעוועלס אין העל סעלז באהאנדלט מיט B (a) P און G-Rg3r.(ד) ווירקונג פון Nrf2 נאַקדאַון אויף BPDE-DNA אַדדוקט לעוועלס אין העל סעלז באהאנדלט מיט B (a) P און G-Rg3.דאַטן זענען אויסגעדריקט ווי די דורכשניטלעך ± נאָרמאַל דיווייישאַן פון טריפּליקאַט דיטערמאַניישאַנז.*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
דעם לערנען עוואַלואַטעד די פאַרהיטנדיק יפעקץ פון פאַרשידן רויט דזשינסענג עקסטראַקץ אויף אַ מויז מאָדעל פון ב (אַ) פּ-ינדוסט לונג ראַק, און KRGB באַהאַנדלונג באטייטיק רידוסט אָנוווקס מאַסע.קאַנסידערינג אַז G-Rg3 האט דעם העכסטן אינהאַלט אין דעם דזשינסענג עקסטראַקט, די וויכטיק ראָלע פון דעם גינסענאָסידע אין ינכיבאַטינג טומאָריגענעסיס איז געלערנט.ביידע G-Rg3r און G-Rg3 (צוויי עפּימערז פון G-Rg3) באטייטיק רידוסט אָנוווקס מאַסע אין אַ מויז מאָדעל פון ב (אַ) פּ-ינדוסט ראַק.G-Rg3r און G-Rg3 האָבן אַנטיקאַנסער יפעקץ דורך ינדוסינג אַפּאָפּטאָסיס פון אָנוווקס סעלז21, ינכיבאַטינג אָנוווקס גראָוט22, אַרעסטירן די צעל ציקל23 און אַפעקטינג אַנגיאָגענעסיס24.G-Rg3 איז אויך געוויזן צו ינכיבאַט סעליאַלער מעטאַסטאַסיס25, און די פיייקייט פון G-Rg3 צו פאַרבעסערן די יפעקץ פון קימאָוטעראַפּי און ראַדיאָטהעראַפּי איז דאַקיומענטאַד26,27.Poon et al דעמאַנסטרייטיד אַז G-Rg3 באַהאַנדלונג קען רעדוצירן די גענאָטאָקסיק יפעקץ פון ב (אַ) פּ28.דער לערנען דעמאַנסטרייץ די טעראַפּיוטיק פּאָטענציעל פון G-Rg3 אין טאַרגאַטינג ינווייראַנמענאַל קאַרסאַנאָודזשעניק מאַלאַקיולז און פּרעווענטינג ראַק.
טראָץ זייער גוט פּראַפילאַקטיק פּאָטענציעל, די נעבעך מויל ביאָאַוואַילאַביליטי פון גינסענאָסידעס איז אַ אַרויסרופן פֿאַר די קליניש נוצן פון די מאַלאַקיולז.פאַרמאַקאָקינעטיק אַנאַליסיס פון מויל אַדמיניסטראַציע פון גינסענאָסידעס אין ראַץ געוויזן אַז די ביאָאַוואַילאַביליטי איז נאָך ווייניקער ווי 5% 29.די טעסץ געוויזן אַז נאָך די 20-וואָך באַהאַנדלונג צייַט, בלויז בלוט לעוועלס פון Rg5 דיקריסט.כאָטש די אַנדערלייינג מעקאַניזאַם פון נעבעך ביאָאַוואַילאַביליטי בלייבט צו זיין ילוסידאַד, פּ-גפּ איז געדאַנק צו זיין ינוואַלווד אין די עפלוקס פון גינסענאָסידעס.די אַרבעט דעמאַנסטרייטיד פֿאַר די ערשטער מאָל אַז די אַדמיניסטראַציע פון וועראַפּאַמיל, אַ פּ-גפּ בלאַקער, ינקריסאַז די מויל ביאָאַוואַילאַביליטי פון G-Rg3r און G-Rg3s.אזוי, דער דערגייונג סאַגדזשעסץ אַז G-Rg3r און G-Rg3s אַקט ווי סאַבסטרייץ פון P-gp צו רעגולירן זייַן עפלאַקס.
די אַרבעט דעמאַנסטרייץ אַז קאָמבינאַציע באַהאַנדלונג מיט וועראַפּאַמיל ינקריסאַז די מויל ביאָאַוואַילאַביליטי פון G-Rg3 אין אַ מויז מאָדעל פון לונג ראַק.דער דערגייונג איז געשטיצט דורך געוואקסן ינטעסטאַנאַל טראַנססעללולאַר אַריבערפירן פון G-Rg3 אויף P-gp בלאַקייד, דערמיט ינקריסינג זייַן אַבזאָרפּשאַן.אַסאַסאַז אין קאַקאָ 2 סעלז געוויזן אַז וועראַפּאַמיל באַהאַנדלונג רידוסט די עפלוקס פון G-Rg3r און G-Rg3s בשעת ימפּרוווינג מעמבראַנע לעדוירעס.א לערנען דורך יאַנג עט על.שטודיום האָבן געוויזן אַז באַהאַנדלונג מיט סיקלאָספּאָרינע א (אן אנדער פּ-גפּ בלאַקער) ינקריסאַז די ביאָאַוואַילאַביליטי פון גינסענאָסידע רה 2 פון אַ באַסעלינע ווערט פון 1% 20 צו מער ווי 30%.גינסענאָסידעס קאַמפּאַונדז ק און רג1 אויך געוויזן ענלעך רעזולטאַטן30,31.ווען וועראַפּאַמיל און סיקלאָספּאָרין א זענען קאָ-אַדמיניסטרירט, די עפפלוקס פון קאַמפּאַונד ק אין קאַקאָ-2 סעלז איז באטייטיק רידוסט פון 26.6 צו ווייניקער ווי 3, בשעת די ינטראַסעללולאַר לעוועלס געוואקסן 40-פאָולד 30.אין דעם בייַזייַן פון וועראַפּאַמיל, Rg1 לעוועלס געוואקסן אין שטשור לונג עפּיטעליאַל סעלז, סאַגדזשעסטינג אַ ראָלע פֿאַר פּ-גפּ אין גינסענאָסידע עפלוקס, ווי געוויזן דורך Meng et al.31.אָבער, וועראַפּאַמיל האט נישט האָבן די זעלבע ווירקונג אויף די עפלוקס פון עטלעכע גינסענאָסידעס (אַזאַ ווי Rg1, F1, Rh1 און Re), וואָס ינדיקייץ אַז זיי זענען נישט אַפעקטאַד דורך פּ-גפּ סאַבסטרייץ, ווי געוויזן דורך Liang et al.32 .די אָבסערוואַציע קען זיין שייַכות צו די ינוואַלוומאַנט פון אנדערע טראַנספּאָרטערס און אָלטערנאַטיוו גינסענאָסידע סטראַקטשערז.
דער מעקאַניזאַם פון די פאַרהיטנדיק ווירקונג פון G-Rg3 אויף ראַק איז ומקלאָר.פריערדיקע שטודיום האָבן געוויזן אַז G-Rg3 פּריווענץ דנאַ שעדיקן און אַפּאָפּטאָסיס דורך רידוסינג אָקסידאַטיווע דרוק און אָנצינדונג16,33, וואָס קען זיין די אַנדערלייינג מעקאַניזאַם פֿאַר פּרעווענטינג ב (אַ) פּ-ינדוסט טומאָריגענעסיס.עטלעכע ריפּאָרץ אָנווייַזן אַז גענאָטאָקסיסיטי ינדוסט דורך ב (אַ) פּ קענען זיין רידוסט דורך מאַדזשאַלייטינג פאַסע וו ענזימעס צו פאָרעם BPDE-DNA34.GST איז אַ טיפּיש פאַסע וו ענזיים וואָס ינכיבאַץ BPDE-DNA אַדדוקט פאָרמירונג דורך פּראַמאָוטינג די ביינדינג פון GSH צו BPDE, דערמיט רידוסינג דנאַ שעדיקן ינדוסט דורך ב (אַ) פּ35.אונדזער רעזולטאטן ווייַזן אַז G-Rg3 באַהאַנדלונג ראַדוסאַז ב (אַ) פּ-ינדוסט סיטאָטאָקסיסיטי און BPDE-DNA אַדדוקט פאָרמירונג אין העל סעלז און ריסטאָרז גסט אויסדרוק און טעטיקייט אין וויטראָ.אָבער, די יפעקץ זענען ניטאָ אין דער אַוועק פון Nrf2, סאַגדזשעסטינג אַז G-Rg3 ינדוסיז סיטאָפּראָטעקטיוו יפעקץ דורך די Nrf2 פּאַטוויי.Nrf2 איז אַ הויפּט טראַנסקריפּציע פאַקטאָר פֿאַר פאַסע וו דיטאַקסיפיקיישאַן ענזימעס וואָס פּראַמאָוץ די רעשוס פון קסענאָביאָטיקס36.אַקטאַוויישאַן פון די Nrf2 פּאַטוויי ינדוסיז סיטאָפּראָטעקשאַן און ראַדוסאַז געוועב שעדיקן37.דערצו, עטלעכע ריפּאָרץ האָבן געשטיצט די ראָלע פון Nrf2 ווי אַ אָנוווקס סאַפּרעסער אין קאַרסינאָגענעסיס38.אונדזער לערנען ווייזט אַז ינדאַקשאַן פון Nrf2 פּאַטוויי דורך G-Rg3 פיעסעס אַ וויכטיק רעגולאַטאָרי ראָלע אין B (a) P-ינדוסט גענאָטאָקסיסיטי דורך קאָזינג B (a) P דיטאַקסיפיקיישאַן דורך אַקטאַווייטינג פאַסע וו ענזימעס, דערמיט ינכיבאַטינג די טומאָריגענעסיס פּראָצעס.
אונדזער אַרבעט ריווילז די פּאָטענציעל פון רויט דזשינסענג אין פּרעווענטינג ב (אַ) פּ-ינדוסט לונג ראַק אין מיסע דורך די וויכטיק ינוואַלוומאַנט פון גינסענאָסידע G-Rg3.די נעבעך מויל ביאָאַוואַילאַביליטי פון דעם מאַלאַקיול כאַמפּערז זייַן קליניש אַפּלאַקיישאַן.אָבער, דעם לערנען ווייזט פֿאַר די ערשטער מאָל אַז G-Rg3 איז אַ סאַבסטרייט פון פּ-גפּ, און די אַדמיניסטראַציע פון אַ פּ-גפּ ינכיבאַטער ינקריסיז די ביאָאַוואַילאַביליטי פון G-Rg3 אין וויטראָ און אין וויוואָו.G-Rg3 ראַדוסאַז B (a) P-ינדוסט סיטאָאָקסיסיטי דורך רעגיאַלייטינג די Nrf2 פּאַטוויי, וואָס קען זיין אַ פּאָטענציעל מעקאַניזאַם פֿאַר זייַן פאַרהיטנדיק פונקציע.אונדזער לערנען קאַנפערמז די פּאָטענציעל פון גינסענאָסידע G-Rg3 פֿאַר דער פאַרהיטונג און באַהאַנדלונג פון לונג ראַק.
זעקס-וואָך-אַלט ווייַבלעך א / דזש מיסע (20 ± 1 ג) און 7-וואָך-אַלט זכר וויסטאַר ראַץ (250 ± 20 ג) זענען באקומען פון די Jackson Laboratory (Bar Harbor, USA) און די וווהאַן אינסטיטוט פון זאָאָלאָגי.אוניווערסיטעט (ווהאַן, טשיינאַ).די כינעזיש טיפּ קולטור קאַלעקשאַן צענטער (ווהאַן, טשיינאַ) צוגעשטעלט אונדז מיט קאַקאָ-2 און העל סעלז.Sigma-Aldrich (סט. לאָויס, USA) איז אַ מקור פון ב (אַ) פּ און טריקאַפּרין.פּוריפיעד דזשינסענאָסידעס G-Rg3r און G-Rg3s, דימעטהיל סולפאָקסידע (DMSO), CellTiter-96 פּראָוליפעריישאַן אַסעי קיט (MTS), וועראַפּאַמיל, מינימאַל יקערדיק מיטל (מעם), און פיטאַל באָווין סערום (FBS) זענען פּערטשאַסט פֿון Chengdu Must Bio-Technology. .קאָו, לטד.(טשענגדו, טשיינאַ).די QIAamp DNA מיני קיט און BPDE-DNA אַדדוקט ELISA קיט זענען פּערטשאַסט פֿון Qiagen (Stanford, CA, USA) און Cell Biolabs (San Diego, CA, USA).GST אַקטיוויטעט אַסיינמאַנט ינווענטאַר און גאַנץ פּראָטעין אַססי קיט (נאָרמאַל בקאַ אופֿן) זענען פּערטשאַסט פֿון Solarbio (בעידזשינג, טשיינאַ).אַלע רויט דזשינסענג עקסטראַקץ זענען סטאָרד אין מינגיו לאַבאָראַטאָרי 7. האָנג קאָנג באַפּטיסט אוניווערסיטעט (האָנג קאָנג, טשיינאַ) און קארעע קאַנסער צענטער (סעאָול, קארעע) זענען געשעפט קוואלן פון קרג עקסטראַקט און פאַרשידן רויט דזשינסענג עקסטראַקץ פון פאַרשידן קאָרעיִש אָריגינס (אַרייַנגערעכנט קרגאַ, קרגב). און KRGC).רויט דזשינסענג איז געמאכט פון די רוץ פון 6-יאָר-אַלט פריש דזשינסענג.רויט דזשינסענג עקסטראַקט איז באקומען דורך וואַשינג דזשינסענג מיט וואַסער דריי מאָל, דעמאָלט קאַנסאַנטרייטינג די ייקוויאַס עקסטראַקט, און לעסאָף דריינג ביי נידעריק טעמפּעראַטור צו באַקומען דזשינסענג עקסטראַקט פּודער.אַנטיבאָדיעס (אַנטי-Nrf2, אַנטי-GST און β-אַקטין), כריין פּעראָקסידאַסע-קאָנדזשוגאַטעד אַנטי-קיניגל ימיונאָגלאָבולין ג (יגג), טראַנספעקשאַן רייידזשאַנט, קאָנטראָל סירנאַ, און Nrf2 סירנאַ זענען פּערטשאַסט פֿון Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA) .), USA).
קאַקאָ 2 און העל סעלז זענען קאַלטשערד אין 100 מם 2 צעל קולטור קיילים מיט MEM מיט 10% פבס ביי 37 ° C אין אַ כיומידיד אַטמאָספער פון 5% CO2.צו באַשטימען די ווירקונג פון באַהאַנדלונג טנאָים, העל סעלז זענען ינקובייטיד מיט פאַרשידענע קאַנסאַנטריישאַנז פון B (a) P און G-Rg3 אין MEM פֿאַר 48 שעה.סעלז קענען זיין ווייַטער אַנאַלייזד אָדער געזאמלט צו צוגרייטן צעל-פריי עקסטראַקץ.
אַלע יקספּעראַמאַנץ זענען באוויליקט דורך די עקספּערימענטאַל אַנימאַל עטיקס קאַמיטי פון טאָנגדזשי מעדיקאַל קאָלעדזש, הואַזשאָנג אוניווערסיטעט פון וויסנשאַפֿט און טעכנאָלאָגיע (האַסקאָמע נומ 2019; פאַרשרייבונג נומ 4587TH).אַלע יקספּעראַמאַנץ זענען דורכגעקאָכט אין לויט מיט באַטייַטיק גיידליינז און רעגיאַליישאַנז, און די לערנען איז געווען געפירט אין לויט מיט די גיידליינז פֿאַר כייַע פאָרשונג: רעפּאָרטינג פון אין וויוואָו יקספּעראַמאַנץ (ARRIVE).אַכט-וואָך-אַלט א / דזש מיסע זענען ערשטער ינטראַפּעריטאָנעאַללי ינדזשעקטיד מיט ב (אַ) פּ אין טריקאַפּרינע לייזונג (100 מג / קג, 0.2 מל).נאָך אַ וואָך, די מיסע זענען ראַנדאַמלי צעטיילט אין קאָנטראָל גרופּעס און פאַרשידענע באַהאַנדלונג גרופּעס, 15 מיסע אין יעדער גרופּע, און גאַוואַדזשד אַמאָל אַ טאָג.נאָך 20 וואָכן פון באַהאַנדלונג, אַנימאַלס זענען מקריב געווען דורך CO2 אַספיקסיאַ.לונגען זענען געזאמלט און פאַרפעסטיקט פֿאַר 24 שעה.די נומער פון אויבנאויפיקער טומאָרס און יחיד אָנוווקס סיזעס זענען קוואַנטאַפייד פֿאַר יעדער לונג אונטער אַ דייסעקטינג מיקראָסקאָפּ.טומאָר באַנד עסטאַמאַץ (V) זענען קאַלקיאַלייטיד ניצן די פאלגענדע אויסדרוק: V (ממ3) = 4/3πr3, ווו ר איז דער אָנוווקס דיאַמעטער.די נעץ סאַכאַקל פון אַלע אָנוווקס וואַליומז אין די לונגען פון מיסע רעפּריזענטיד די גאַנץ אָנוווקס באַנד, און די דורכשניטלעך גאַנץ אָנוווקס באַנד אין יעדער גרופּע רעפּריזענטיד די אָנוווקס מאַסע.גאַנץ בלוט און ינטעסטאַנאַל סאַמפּאַלז זענען געזאמלט און סטאָרד בייַ -80 ° C פֿאַר UPLC-MS / MS פעסטקייַט.סערום איז געזאמלט און אַ אָטאַמייטיד כעמיע אַנאַליזער איז געניצט צו אַנאַלייז די לעוועלס פון אַלאַנינע אַמינאָטראַנספעראַסע (ALT) און סערום קרעאַטינינע (Cr) צו אַססעסס לעבער און ניר פונקציע.
געזאמלט סאַמפּאַלז זענען אַוועקגענומען פון קאַלט סטאָרידזש, טאָד, ווייד און געשטעלט אין טובז ווי דיסקרייבד אויבן.צו דעם איז מוסיף 0.5 μם פלאָריזין (ינערלעך נאָרמאַל) אין 0.8 מל מעטאַנאַל לייזונג.דער געוועב איז דעמאָלט כאָומאַדזשאַנייזד מיט געוועב-טעראָר און די האָמאָגענאַטע איז דערנאָך טראַנספערד צו אַ 1.5 מל מיקראָסענטריפוגע רער.דער געמיש איז געווען סענטריפוגעד ביי 15500 רפּם פֿאַר 15 מינוט.נאָך רימוווינג 1.0 מל פון סופּערנאַטאַנט, טרוקן מיט ניטראָגען.צוויי הונדערט מיקראָליטער מעטאַנאָל איז געניצט פֿאַר אָפּזוך.די בלוט איז געזאמלט און פּראַסעסט אויף איין שורה און איז געניצט ווי אַ רעפֿערענץ פֿאַר אַלע מעזשערמאַנץ.
24-געזונט טראַנסוועלל פּלאַטעס זענען סידעד מיט 1.0 × 105 קאַקאָ-2 סעלז פּער געזונט צו אָפּשאַצן די פּאָטענציעל ענכאַנסמאַנט פון G-Rg3 אַריבערפירן דורך די אַדישאַן פון וועראַפּאַמיל.נאָך 3 וואָכן פון קולטור, סעלז זענען געוואשן מיט HBSS און פּרעינקובאַטעד בייַ 37 ° C.400 μL פון 10 μM G-Rg3 (G-Rg3r, G-Rg3s, אָדער אַ געמיש מיט 50 אָדער 100 μM וועראַפּאַמיל) איז ינדזשעקטיד אויף די באַסאַלאַטעראַל אָדער אַפּיקאַל זייַט פון די מאָנאָלייַער, און 600 μL פון HBSS לייזונג איז צוגעגעבן צו די אנדערע. זייַט.קלייַבן 100 μl פון קולטור מיטל אין די דעזיגנייטיד צייט (0, 15, 30, 45, 60, 90 און 120 מינוט) און לייגן 100 μl HBSS צו מאַכן דעם באַנד.סאַמפּאַלז זענען סטאָרד בייַ -4 ° C ביז דיטעקשאַן דורך UPLC-MS / MS.דער אויסדרוק Papp = דק / (דט × א × C0) איז געניצט צו קוואַנטיפיצירן די קלאָר ונידירעקטיאָנאַל אַפּיקאַל און באַסאַלאַטעראַל לעדוירעס און וויצע ווערסאַ (Pa-b און Pb-a, ריספּעקטיוולי);דק / דט איז די ענדערונג אין קאַנסאַנטריישאַן, א (0.6 סענטימעטער 2) איז די ייבערפלאַך געגנט פון די מאָנאָלייַער, און C0 איז די ערשט מענאַדעוו קאַנסאַנטריישאַן.די עפפלוקס פאַרהעלטעניש איז קאַלקיאַלייטיד ווי פּב-אַ / פּאַ-ב, וואָס רעפּראַזענץ די עפפלוקס קורס פון די לערנען מעדיצין.
זכר וויסטאַר ראַץ זענען געפֿאַסט פֿאַר 24 שעה, געטרונקען בלויז וואַסער און אַנאַסטעטיק מיט אַ ינטראַווינאַס ינדזשעקשאַן פון 3.5% פּענטאָבאַרביטאַל לייזונג.די ינטובאַטעד סיליקאָנע רער האט די סוף פון די דואַדאַנאַם ווי די אַרייַנגאַנג און די סוף פון די ילעום ווי די אַרויסגאַנג.ניצן אַ פּעריסטאַלטיק פּאָמפּע צו פּאָמפּע די ינלעט מיט 10 μM G-Rg3r אָדער G-Rg3s אין יסאָטאָניק HBSS מיט אַ לויפן קורס פון 0.1 מל / מין.די ווירקונג פון וועראַפּאַמיל איז אַססעססעד דורך אַדינג 50 μM אָדער 100 μM פון די קאַמפּאַונד צו 10 μM G-Rg3r אָדער G-Rg3s.UPLC-MS / MS איז דורכגעקאָכט אויף פּערפוסיאָן עקסטראַקץ געזאמלט אין צייט 60, 90, 120 און 150 מינוט נאָך די אָנהייב פון פּערפוסיאָן.דער פּראָצענט פון אַבזאָרפּשאַן איז קוואַנטאַפייד דורך די פאָרמולע% אַבזאָרפּשאַן = (1 - קאָוט / סין) × 100%;די קאַנסאַנטריישאַן פון G-Rg3 ביי די ווענטיל און ינלעט איז אויסגעדריקט דורך Cout און Cin, ריספּעקטיוולי.
העל סעלז זענען סידעד אין 96-געזונט פּלאַטעס אין אַ געדיכטקייַט פון 1 × 104 סעלז פּער געזונט און באהאנדלט מיט ב (אַ) פּ (0, 1, 5, 10, 20, 30, 40 μM) אָדער G-Rg3 צעלאָזן אין DMSO .די דרוגס זענען דעמאָלט דיילוטאַד מיט קולטור מיטל צו פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז (0, 1, 2, 5, 10, 20 μM) איבער 48 שעה.ניצן אַ קאמערשעל בנימצא MTS אַסיי קיט, סעלז זענען אונטערטעניק צו אַ נאָרמאַל פּראָטאָקאָל און דערנאָך געמאסטן מיט אַ מיקראָפּלאַטע לייענער ביי 490 נם.די צעל ווייאַבילאַטי מדרגה פון די גרופּעס קאָ-באהאנדלט מיט ב (אַ) פּ (10 μM) און G-RG3 (0, 1, 5, 10, 20 μM) איז אַססעססעד לויט די אויבן אופֿן און קאַמפּערד מיט די אַנטריטיד גרופּע.
העל סעלז זענען סידעד אין 6-געזונט פּלאַטעס אין אַ געדיכטקייַט פון 1 × 105 סעלז / געזונט און באהאנדלט מיט 10 μMB (אַ) פּ אין דעם בייַזייַן אָדער אַוועק פון 10 μM G-Rg3.נאָך 48 שעה פון באַהאַנדלונג, דנאַ איז יקסטראַקטיד פון העל סעלז מיט די QIAamp DNA מיני קיט לויט די פּראָטאָקאָל פון דער פאַבריקאַנט.די פאָרמירונג פון BPDE-DNA אַדדוקץ איז דיטעקטאַד מיט אַ BPDE-DNA אַדדוקט עליסאַ קיט.קאָרעוו לעוועלס פון BPDE-DNA אַדדוקט זענען געמאסטן מיט אַ מיקראָפּלאַטע לייענער דורך מעסטן אַבזאָרבאַנס ביי 450 נם.
העל סעלז זענען סידעד אין 96-געזונט פּלאַטעס אין אַ געדיכטקייַט פון 1 × 104 סעלז פּער געזונט און באהאנדלט מיט 10 μMB (אַ) פּ אין דער אַוועק אָדער בייַזייַן פון 10 μM G-Rg3 פֿאַר 48 שעה.GST טעטיקייט איז געמאסטן מיט אַ געשעפט GST אַקטיוויטעט אַסיינמאַנט קיט לויט דער פּראָטאָקאָל פון דער פאַבריקאַנט.קאָרעוו גסט אַקטאַוויישאַן איז געמאסטן דורך אַבזאָרפּשאַן ביי 450 נם ניצן אַ מיקראָפּלאַטע לייענער.
העל סעלז זענען געוואשן מיט אייז-קאַלט פּבס און דאַן ליסעד ניצן ראַדיאָיממונאָפּרעסיפּיטאַטיאָן אַססייַ באַפער מיט פּראָטעאַסע ינכיבאַטערז און פאָספאַטאַסע ינכיבאַטערז.נאָך פּראָטעין קוואַנטאַפאַקיישאַן ניצן אַ גאַנץ פּראָטעין אַסעי קיט, 30 μג פון פּראָטעין אין יעדער מוסטער איז געווען אפגעשיידט דורך 12% SDS-PAGE און טראַנספערד צו אַ PVDF מעמבראַנע דורך עלעקטראָפאָרעסיס.מעמבראַנע זענען אפגעשטעלט מיט 5% אָפּשעפּן מילך און ינקובייטיד מיט ערשטיק אַנטיבאָדיעס יבערנאַכטיק ביי 4 ° C.נאָך ינגקיוביישאַן מיט כריין פּעראָקסידאַסע-קאָנדזשוגאַטעד צווייטיק אַנטיבאָדיעס, ענכאַנסט טשעמילומינעסענסע רייידזשאַנץ זענען צוגעגעבן צו וויזשוואַלייז די ביינדינג סיגנאַל.די ינטענסיטי פון יעדער פּראָטעין באַנד איז קוואַנטאַפייד מיט ImageJ ווייכווארג.
GraphPad Prism 7.0 ווייכווארג איז געניצט צו פונאַנדערקלייַבן אַלע דאַטן, אויסגעדריקט ווי דורכשניטלעך ± נאָרמאַל דיווייישאַן.די ווערייישאַן צווישן באַהאַנדלונג גרופּעס איז אַססעססעד מיט אַ סטודענט ס ט פּראָבע אָדער איין-וועג אַנאַליסיס פון וועריאַנס, מיט אַ פּ ווערט <0.05 ינדאַקייטינג סטאַטיסטיש באַטייַט.
אַלע דאַטן באקומען אָדער אַנאַלייזד בעשאַס דעם לערנען זענען אַרייַנגערעכנט אין דעם ארויס אַרטיקל און סאַפּלאַמענטערי אינפֿאָרמאַציע טעקעס.
Torre, LA, Siegel, RL און Jemal, A. לונג ראַק סטאַטיסטיק.אַדווערב.אויסגעגאנגען.מעדיצין.ביאָלאָגי.893, 1-19 (2016).
Hecht, S. טאַבאַק קאַרסינאַדזשאַנז, זייער ביאָמאַרקערס און טאַביק-ינדוסט ראַק.נאַט.קאַנסער טשאַפּלאַן.3, 733-744 (2003).
Phillips, DH און Venitt, S. דנאַ און פּראָטעין אַדדוקץ אין מענטשלעך געוועבן ריזאַלטינג פון ויסשטעלן צו טאַביק רויך.ינטערנאַטיאָנאַליטי.י ראַק.131, 2733-2753 (2012).
Yang Y., Wang Y., Tang K., Lubet RA און Yu M. ווירקונג פון Houttuynia cordata און סיליבינין אויף בענזאָ (אַ) פּירענע-ינדוסט לונג טומאָריגענעסיס אין א / דזש מיסע.ראַק 7, 1053-1057 (2005).
טאַנג, וו. עט על.אַנטיקאַנסער נאַטירלעך פּראָדוקט אפגעזונדערט פון כינעזיש מעדיסינאַל מאַטעריאַלס.קין.מעדיצין.6, 27 (2011).
יאַנג, י. עט על.עפיקאַסי פון פּאָליפענאָן E, רויט דזשינסענג און ראַפּאַמיסין אויף בענזאָ (אַ) פּירענע-ינדוסט לונג טומאָריגענעס אין א / דזש מיסע.ראַק 8, 52-58 (2006).
Wang, CZ, Anderson, S., Du, W., He, TS און Yuan, KS Red, ינוואַלוומאַנט אין ראַק טעראַפּיע.קין.י נוט.מעדיצין.14, 7-16 (2016).
Lee, TS, Mazza, G., Cottrell, AS און Gao, L. Ginsenosides אין די רוץ און בלעטער פון אמעריקאנער דזשינסענג.י אַגריק.פוד כעמיע.44, 717-720 (1996).
Attele AS, Wu JA און Yuan KS פאַרמאַקאָלאָגי פון דזשינסענג: פילע קאַמפּאָונאַנץ און פילע יפעקץ.ביאָכעמיע.פאַרמאַקאָלאָגי.58, 1685-1693 (1999).
פּאָסטן צייט: 17-2023 סעפטעמבער